傅志强
- 作品数:187 被引量:376H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术发展基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学自然科学总论更多>>
- 小鼠抗日本血吸虫感染的脾早期细胞免疫应答的初步研究被引量:2
- 2017年
- 以日本血吸虫尾蚴攻击感染C57BL/6小鼠,分别于感染后第1、2、3、4、5、7、9、11、13天收集小鼠脾组织,检测分析早期感染阶段小鼠脾中重要炎症因子的表达动态变化,观察脾不同亚群免疫细胞的变化趋势,分析先天免疫分子在血吸虫感染宿主免疫应答进程中的作用。RT-q PCR结果表明,GZMA、GZMB、GZMK等颗粒酶,CCL2、CXCL10、CXCL11等趋化因子,IL-12a、IL-4、IL-6、IL-10等白细胞介素在感染后均不同程度上调表达;流式细胞术结果表明,小鼠感染日本血吸虫后CD3^+CD4^+T细胞和CD3^+CD8^+T细胞比值一直高于未感染对照组;同时NK细胞亚群比例在感染后第5天和7天明显增多。这些免疫相关细胞和分子的变化可能在小鼠抗血吸虫感染中发挥了重要作用。本研究为探究日本血吸虫感染的先天免疫机制等积累了实验数据。
- 张祖航韩宏晓曹晓丹沈元曦韩倩洪炀傅志强林矫矫
- 关键词:日本血吸虫先天免疫免疫分子
- 免疫蛋白质组学及其在病原生物学中的研究进展被引量:2
- 2012年
- 免疫蛋白质组学是蛋白质组学与免疫学相结合而产生的一门新兴的交叉学科。该文介绍了免疫蛋白质组学的研究技术及其在病原生物学中的应用,并对其在诊断抗原及疫苗分子筛选中的应用前景及发展的局限性进行了论述。
- 洪炀傅志强朱传刚陆珂杨健美李浩石耀军苑纯秀林矫矫
- 关键词:病原生物学
- 一种喷鼻装置用可调节双喷头及喷鼻装置
- 本实用新型公开了一种喷鼻装置用宽度可调节双喷头,包括一输出主管和两输出支管,所述输出主管为三通结构,所述输出主管的一端设有进药口,另一端设有两个出药口,两所述输出支管的一端分别与一个出药口进行连接,两所述输出支管的另一端...
- 李浩陆珂石耀军洪炀杨健美林矫矫傅志强徐玉梅杨艺朱传刚
- 文献传递
- 日本血吸虫可溶性虫卵和童虫抗原刺激RAW264.7巨噬细胞的初步分析
- 2017年
- 本文采用不同浓度的日本血吸虫虫卵抗原(SEA)、童虫抗原(SSA)刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,结果显示SEA抗原能明显刺激巨噬细胞增殖分化(SI〉2),且多数巨噬细胞形态发生了改变并出现细胞死亡。实时定量荧光PCR结果显示,在SEA、SSA抗原刺激下,巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL,10和CCL2的mRNA表达量都明显高于对照组。结果提示血吸虫抗原对巨噬细胞的刺激作用可能在宿主抗血吸虫感染的先天免疫应答和虫卵肉芽肿形成免疫调节中发挥了一定的作用。
- 沈元曦张祖航韩宏晓傅志强洪炀林矫矫
- 关键词:日本血吸虫巨噬细胞虫卵抗原
- 日本血吸虫中国大陆株21.7kD蛋白编码基因的克隆和表达
- 2002年
- 根据日本血吸虫菲律宾株编码 2 1 7kD蛋白的基因设计引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT PCR法扩增出大小为 5 5 8bp的基因片段。经序列分析推断该基因片段为编码日本血吸虫中国大陆株2 1 7kD蛋白基因的完整阅读框 ,与菲律宾株该基因的碱基序列同源性为 98%。将其克隆到表达载体pET2 8a(+)中 ,在大肠杆菌BL2 1中获得表达 ,融合表达产物分子量约为 2 5 4kD。利用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对该表达产物进行Western印迹检测 ,在预测位置出现了明显的识别条带 。
- 金亚美林矫矫张亮傅志强吴祥甫周元聪蔡幼民
- 关键词:日本血吸虫中国大陆株编码基因基因克隆基因表达
- 日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因在家蚕细胞及幼虫中的表达被引量:10
- 1999年
- 目的: 在家蚕细胞和幼虫中表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白( Sj14) 基因。方法: 将该基因克隆于昆虫病毒转移载体p Bac P A K His1 中, 再与修饰的家蚕核型多角体病毒( Bm N P V) 线性化 D N A 共转染家蚕细胞,经体内重组得重组病毒 Bm Sj14 , 再将 Bm Sj14 感染家蚕细胞和幼虫以表达 Sj14 , 用 Western blot 和间接 E L I S A测定表达产物的抗原性。结果: Bm Sj14 感染家蚕细胞和幼虫后 Sj14 获得较高表达; 表达产物r Sj14 ( His) 为18k Da 的融合蛋白, 在家蚕细胞中的产量约为100 μg/1 ×106 细胞, 在培养上清中产量为33 μg/ml; 在家蚕血淋巴中得量为4 mg/ml; 在家蚕幼虫组织的得量为46 mg/g 组织。 Western blot 和间接 E L I S A 显示r Sj14 ( His) 具有较高抗原性。结论: Sj14 在家蚕细胞和幼虫中获得高效表达且表达产物具有较高抗原性。
- 刘金明蔡学忠林矫矫杨冠珍沈小川傅志强施福恢沈纬李铭苑纯秀李浩蔡幼民吴祥甫
- 关键词:日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因表达疫苗
- 东方田鼠重复感染日本血吸虫试验研究初步被引量:27
- 2001年
- 本试验以 10 0 0条日本血吸虫尾蚴同时攻击感染东方田鼠洞庭湖种群和东方田鼠宁夏指名亚种进行重复感染对比试验 ,并在攻击后不同天数分别同时解剖相同数目的两种群东方田鼠 ,收集其体内不同时段、不同部位的日本血吸虫童虫 ,比较结果证实东方田鼠对日本血吸虫具有天然的抗性 ,其抗性是可遗传的 ,不以东方田鼠的地域分布不同、生活环境的差异或传代数目的变化而有所不同 。
- 李浩何燕艳林邦发林矫矫陈永军石耀军魏梅雄刘金明傅志强
- 关键词:东方田鼠日本血吸虫抗性
- 日本血吸虫体表蛋白rSj29的保护性效果被引量:1
- 2009年
- 目的克隆表达日本血吸虫体表蛋白Sj29基因,分析其表达特性和免疫保护效果。方法根据日本血吸虫体表蛋白Sj29基因序列(GenBank登录号为AY814537)设计引物,PCR扩增目的基因,生物信息技术分析序列特性。将目的基因部分片段亚克隆到原核表达载体pET28c中,构建重组质粒pET28c-Sj29,将其转至大肠埃希菌后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,组氨酸(His)柱亲和层析法纯化重组蛋白;蛋白质印迹(Western blotting)分析其免疫原性。30只雌性BALB/c小鼠均分3组,实验组每鼠皮下多点注射重组蛋白rSj29共100μl(0.1mg/ml,用206佐剂配制)、佐剂对照组和空白(PBS)对照组,分别免疫3次,每次间隔2周。末次免疫后2周用血吸虫尾蚴攻击感染小鼠,每鼠40±2条,感染后第53天剖杀,收集虫体计算减虫率;取肝脏和粪便计算减卵率。ELISA法检测实验鼠血清特异性IgG抗体水平,免疫组织化学法检测rSj29蛋白在各期虫体的定位,荧光定量PCR法分析各期虫体及攻击感染后42d虫体Sj29基因表达水平。结果获得576bp的Sj29基因。重组蛋白的相对分子质量(Mr)为22900,以包涵体形式存在。Western blotting表明,重组蛋白可被免疫小鼠血清和感染日本血吸虫的小鼠血清识别。攻击感染后42d,小鼠体内Sj29基因转录水平分别为佐剂对照组和空白对照组虫体的9.1倍和51.8倍。实验组小鼠成虫数(15.4±5.9)、肝组织虫卵数(40143.3±2995.9)和粪便虫卵数(3803.9±110.9)与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,免疫小鼠可产生高滴度(1∶32000)特异性IgG抗体。免疫组织化学结果表明,重组蛋白rSj29可在7、14d童虫,28、32d成虫和42d雄、雌虫的体表表达。荧光定量PCR结果表明,虫龄为32d的日本血吸虫成虫Sj29基因转录水平最高。结论重组蛋白rSj29有一定的免疫保护效果。
- 陈虹傅志强陈雷邱春辉付光伟李晔邵东华冯新港林矫矫
- 关键词:日本血吸虫荧光定量PCR免疫组化
- 血吸虫细胞凋亡研究进展被引量:1
- 2015年
- 细胞凋亡对血吸虫及各种生物体的生长、发育具有重要的作用。近年来,一些学者在血吸虫的细胞凋亡现象观察、凋亡在血吸虫生长发育中的作用方面开展了探索,以寻找、开拓防治血吸虫病的新途径.为控制血吸虫病的传播提供新思路。该文对有关血吸虫细胞凋亡、血吸虫与宿主细胞凋亡现象、血吸虫重要凋亡基因的相关研究及血吸虫细胞凋亡研究的应用前景作一简述。
- 王涛洪炀傅志强林矫矫
- 关键词:血吸虫细胞凋亡凋亡通路凋亡基因
- 东方田鼠清洁级种群的建立和抗日本血吸虫病机制研究
- 林矫矫高诚魏梅雄谢建云傅志强刘金明邢正弘柏熊蒋守富李浩潘漪清石耀军邵伟娟何艳燕倪丽菊姚利晓王胜昌孙军吴祖立陆珂沈志敏潘彩娥刘雄伟蔡幼民王长江
- 该项目引进了洞庭湖东方田鼠(长江亚种),宁夏青铜峡东方田鼠(指名亚种)和黑龙江金山屯东方田鼠(东北亚种),进行驯化,在此基础上建立了清洁级东方田鼠种群。该项目观察了日本血吸虫在东方田鼠体内的发育与消亡情况,证实了东方田鼠...
- 关键词:
- 关键词:东方田鼠日本血吸虫抗病机制