刘宁
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金西京医院学科助推计划陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 天花粉蛋白突变体TCS_(KR173-174CG)生物活性及免疫原性研究
- 2008年
- 目的:对中草药成分天花粉蛋白(TCS)进行定点突变,使其免疫原性有所降低而生物活性不受或少受影响。方法:选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(KR173-174)进行定点突变,并将所构建的突变体(TCSKR173-174CG)基因在大肠杆菌中表达及纯化。随后与野生型TCS(wTCS)比较,分析其DNA酶活性、致核糖体失活活性、免疫原性和急性毒性。结果:初步检测发现,所构建的突变型TCS活性与wTCS活性几乎相当,而免疫原性有所降低。结论:通过该方法改造TCS是可行的,有可能为抗HIV治疗提供一种高效、低毒、廉价的药物。
- 安群星穆士杰张献清陈蕤雷迎峰余瑞刘宁徐志凯
- 关键词：基因转变
- 人CCR5Delta32基因的克隆及其重组慢病毒载体的构建被引量：2
- 2007年
- 目的:克隆人CCR5Delta32基因并构建含目的基因的重组慢病毒载体pLenti-CCR5Delta32,用于获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的基因治疗研究.方法:从CCR5Delta32突变个体外周血单个核细胞(PBMCs)内提取人基因组DNA,利用PCR技术扩增CCR5Delta32全长基因,经EcoRI单酶切后与pUCm-T载体连接,随后转化感受态E.coli DH5α,提取质粒进行酶切鉴定及DNA测序.再将鉴定正确的CCR5Delta32基因亚克隆至慢病毒载体pLenti6/V5-D-TOPO并进行酶切鉴定及DNA序列分析.结果:经PCR扩增获得约650bp的DNA片段,测序结果与GenBank上的序列完全一致,克隆的目的基因已经正确插入到慢病毒载体pLenti6/V5-D-TOPO中.结论:成功克隆了人CCR5Delta32基因并构建了含目的基因的重组慢病毒载体pLenti-CCR5Delta32,为进一步AIDS基因治疗研究奠定基础.
- 安群星穆士杰张献清陈蕤张颖余瑞刘宁
- 关键词：基因克隆慢病毒载体HIV感染
