刘小兰
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：江西农业大学更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 不同脱霉剂对二元猪生产性能及免疫功能的影响
- 本文旨在研究不同脱霉剂对二元育龄猪生产性能及免疫功能的影响。选用420头猪,分成7组,每组60头,每组设3个重复小组,每个重复小组20头。1号、2号脱霉剂为某公司提供。对照组为空白组,A组为空白对照组、B组为1号脱霉剂0...
- 刘小兰
- 关键词：免疫功能
- 文献传递
- 猪痘病毒TK、ORF121、ORF143基因缺失毒株的 构建及其生物学特性的测定被引量：4
- 2020年
- 为筛选猪痘病毒(SWPV)复制非必需区并测定其缺失株的生物学特性,本研究根据同源重组原理分别针对SWPV的TK(ORF063)、ORF 121和ORF 143基因设计引物。应用重叠延伸PCR技术拼接同源重组左右臂及EGFP筛选标记表达盒,将拼接片段分别转染到感染SWPV的PK15细胞。利用荧光显微镜观察标记含EGFP的单个蚀斑,筛选获取重组毒株。应用PCR及Western blotting对重组毒株进行鉴定。分别测定各毒株感染PK15细胞的蚀斑大小和皮下接种保育猪致病性。PCR结果表明,目的基因成功整合到相应位点,成功获得重组毒株rSWPV-TK、rSWPV-121和rSWPV-143;Western blotting结果显示,连续传代的重组毒株在PK15细胞上稳定表达外源蛋白。重组毒株在PK15细胞上形成的痘斑均小于亲本毒株,其中ORF121缺失株差异极显著(P<0.01)。各毒株均可导致保育猪痘斑形成,其中ORF121缺失株引起病变时间短,产生痘斑小,毒力较亲本下降。综上所述,本研究筛选到2个SWPV基因组中可供外源蛋白插入的复制非必需区ORF121和ORF143,为构建SWPV基因工程载体奠定了基础。
- 刘昌锦邓舜洲罗锋钟罗华王喆高映雪刘小兰
- 关键词：重叠延伸PCR生物学特性
