刘幸平
- 作品数：80 被引量：272H指数：10
- 供职机构：南京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学理学化学工程更多>>
- 碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心肌缺血再灌注不同时间肌浆网钙泵活性的影响
- 2013年
- 碘化N-正丁基氟哌啶醇（N-n-butyl haloperidol iodide,F2）是我课题组合成的一个新化合物（专利号：ZL96119098．1）。以往一系列研究表明，F2可以改善心肌缺血再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）造成的血流动力学变化和酶学变化、缩小心肌梗死面积、减轻再灌注心肌组织炎症，对心肌I/R损伤具有全面的保护作用。
- 张艳美王春燕李伟秋刘幸平郑燕珊徐涵郑付春
- 关键词：碘化N-正丁基氟哌啶醇钙泵活性HALOPERIDOL肌浆网血流动力学变化心肌梗死面积
- 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌临床菌株耐药表型与基因型被引量：12
- 2007年
- 目的调查临床分离鉴定的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药表型与基因型的关系。方法以琼脂稀释法测定67株产ESBLs肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物的MIC;应用PCR扩增其SHV、TEM和CTX-M型β-内酰胺酶编码基因,并对部分菌株的PCR产物进行克隆测序以确定其基因亚型。结果67株除未检出对亚胺培南耐药株外,对其他10种抗菌药物的耐药率在10.45%～89.55%,多重耐药率为74.63%;其中60株对氨基糖苷类耐药株和44株对β-内酰胺类耐药株的交叉耐药率各为88.33%和40.91%;67株SHV、TEM和CTX-M基因型检出率分别为91.04%、56.72%、28.36%,对其中7株克隆测序发现存在SHV-12、TEM-1及CTX-M-3基因亚型。结论67株产ESBLs肺炎克雷伯菌对除亚胺培南以外的大多数抗菌药物,呈现明显的多重耐药和交叉耐药,其中7株同时产SHV-12和CTX-M-3型超广谱和TEM-1型广谱β-内酰胺酶。
- 石蓉林陈淑贞蔡应木刘幸平钱元恕
- 关键词：肺炎克雷伯菌产超广谱Β-内酰胺酶表型基因型
- MS302系统在药理实验教学中的应用
- 2000年
- 在传统的药理学四项实验中引入MS30 2多媒体化生物信号记录分析系统 (MS30 2 ) ,对曲线及数据进行记录和测量。这些实验分别是 :药物的量效曲线及pD2 、pA2 的求算法 ,强心甙对离体蛙心的作用 ,缩宫素对小白鼠离体子宫的作用和利多卡因的抗心律失常作用。经过近两年的实践验证 ,它显示出诸多优点 :原始记录图像的质量明显提高 ,曲线可扩展、压缩 ,自动测量数据 ,资料可重显、剪辑、打印 ,资料可储存。原始记录图像和数据尚可在office软件中插用 ,为教学提供了很大方便 ,并为科研提供了许多借鉴之处 ,作者认为 。
- 吴惜贞刘幸平陈锦香庄学煊宋卉石刚刚
- 关键词：药理学实验教学多媒体教学
- 人肝癌细胞冷冻保存方法研究被引量：6
- 2000年
- 有关利用普通冰箱-18℃冷冻保存组织及细胞,迄今未见报道.本实验对-18℃冷冻保存人肝癌细胞株 Bel-7402进行实验研究,现报告如下:1 材料和方法人肝癌细胞株 Bel-7402引自中山医科大学实验动物中心,置于含100 mL/L新生牛血清的 RPMI 1640培养液中,在37℃,50 mL/L CO2,饱湿条件下传代培养,细胞贴壁生长.将处于对数生长期的细胞经 D-Hank’s 液洗2次,后用2.5 g/L 胰蛋白酶消化,再用含100mL/L 新生牛血清的1640液洗涤1次.后分别用含0mL/L,5mL/L,10mL/L,15mL/L,20mL/L DMSO的完全培养基（含100mL/L 新生牛血清1640）重新制成细胞悬液.细胞浓度保持在1×106/mL 左右.将细胞悬液置于2mL的硬塑料冻存管中,加盖密封,做好标记.直接迅速地放入-18℃冰箱中冻存.每种浓度各分装12支冻存管,每管装1 mL 悬液.于1 wk,1 mo,2 mo,3 mo 后分别进行融冻.将上述的冻存管,直接从-18℃冰箱中取出,迅速投入40℃水浴中使之迅速完全融化（约1min 左右）.迅速倒入已备好的RPMI 1640营养液中,并用 RPMI 1640洗涤冻存管2次.后离心,再用 RPMI 1640洗涤细胞2次,置瓶培养;同时制成一定量的细胞悬液,取其中0.5mL 的细胞悬液加入4mL/L 台盼蓝染液0.5 mL,混匀,取少许滴于计数板的计数池内,静置2min 后计算细胞存活率（不着蓝色的细胞为活细胞）.细胞存活率=（活细胞数）/（活细胞数+死细胞数）×100%观察指标:①存活率:台盼蓝拒染试验计数;②冻存后复苏的细胞接种入培养瓶,置于含100mL/L 新生牛血清的 RPMI1640培养基中,于37℃,50 mL/L CO2,饱湿培养箱中培养,24 h 后半保留换液,每天观察.2 结果-18℃条件下用不同浓度的 DMSO 为冷冻保护剂,冻存Bel-7402 1 wk,1 mo,2 mo 及3 mo 后细胞存活率及镜下观察到的生长状况见表1.表1 不同浓度 DMSO 对 Bel-7402的影响DMSO 浓度细胞存活率（%） 接种后见细胞贴壁生长天数（mL/L） 1 wk 1 mo 2 mo 3mo 1 wk 1 mo 2 mo 3 mo0 22.1 17
- 周燕琼刘小辉刘幸平曾自立
- 关键词：冷冻保存BEL-7402肝癌细胞
- 反义寡脱氧核苷酸对内皮细胞缺氧再复氧损伤组织因子表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的研究反义寡脱氧核苷酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧再复氧损伤后组织因子(TF)基因转录和表达的影响。方法培养的HUVEC随机等分成为正常对照组、缺氧再复氧组、反义寡脱氧核苷酸转染组(AS/TF组)、正义寡脱氧核苷酸转染组(S/TF组)和错配寡脱氧核苷酸转染组(Sc/TF组)。设计合成针对人TF的反义寡脱氧核苷酸(AS/TF),同时设计TF的正义寡脱氧核苷酸(S/TF)的错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF)作为对照。用SuperFectTransfectionReagent(SF)作载体,将AS/TF、S/TF和Sc/TF分别转染AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC,正常对照组和缺氧再复氧组HUVEC只加SF,不转染任何寡核苷酸。将缺氧再复氧组、AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC培养24h后,充入氮气,缺氧条件下培养2h,正常条件下培养1h,完成缺氧再复氧模型的制作。收集各组HUVEC,用发色底物法检测HUVEC表面TF的活性,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HUVEC中的TF抗原(TF:Ag)。并用膨胀裂解法分离细胞核,进行细胞核连缀反应(Run-onreaction)后,Bio-dot狭线印迹杂交检测HUVEC中的TFmRNA。结果与未经缺氧再复氧的正常对照组HUVEC相比,经过缺氧再复氧的HUVEC表面TF活性明显增强(P<0.001),细胞裂解液中的TF:Ag也显著增多(P<0.001),AS/TF组HUVEC的TF活性和TF:Ag的增加幅度低于缺氧再复氧组、S/TF组以及Sc/TF组(P<0.05-0.01)。体外细胞核连缀反应后,Bio-dot狭线印迹杂交显示,HUVEC缺氧再复氧后TF基因的转录增强,AS/TF组HUVECTFmRNA的转录弱于缺氧再复氧组、S/TF组和Sc/TF组。结论HUVEC缺氧再复氧后,TF基因的转录和表达均显著增强,针对TF的反义寡脱氧核苷酸能够明显抑制HUVEC缺氧再复氧损伤后TF基因的转录和表达。提示TF反义寡脱氧核苷酸对于因TF水平升高所致的血栓性疾病可能有潜在的治疗作用。
- 尹俊郑庆棠谢舜峰刘幸平
- 关键词：反义寡脱氧核苷酸人脐静脉内皮细胞缺氧再复氧损伤
- 组织因子反义寡脱氧核苷酸防治心肌缺血再灌注损伤的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的:研究组织因子(TF)反义寡脱氧核苷酸(AS/TF)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法:设计针对大鼠TF的AS/TF、正义寡脱氧核苷酸(S/TF)和错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF)。50只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)、反义寡脱氧核苷酸防治组(AS/TF组)、正义寡脱氧核苷酸防治组(S/TF组)和错配寡脱氧核苷酸防治组(Sc/TF组),每组10只。Sham组和I/R组大鼠经静脉注入生理盐水,AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组大鼠分别注入AS/TF、S/TF和Sc/TF。于注射后10h麻醉大鼠,开胸暴露心脏,于冠状动脉左前降支中1/2处穿线,Sham组只穿线不结扎,其余4组均结扎造成心肌缺血,90min后解除结扎,再灌注1h。用ELISA检测大鼠血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、血浆凝血酶鄄抗凝血酶复合物(TAT)和血小板P鄄选择素的含量。Northern印迹杂交检测大鼠缺血区心肌组织中TF基因的转录,HE染色观察缺血区心肌组织的病理变化。结果:大鼠心肌缺血再灌注后,血清cTnI、血浆TAT和P鄄选择素含量明显上升(P<0.001),AS/TF组的上升幅度低于I/R组、S/TF组和Sc/TF组(P<0.05)。Northern印迹杂交显示大鼠缺血区心肌组织TF基因的转录明显增强,AS/TF组TFmRNA的转录弱于I/R组、S/TF组和Sc/TF组。HE染色可见大鼠缺血区心肌组织有灶性坏死。
- 尹俊石刚刚刘幸平谢舜峰
- 关键词：再灌注损伤反义寡脱氧核苷酸心肌缺血
- 二步酶消化法分离大鼠主动脉血管平滑肌细胞及活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:建立一种有效、方便的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的酶解分离方法。方法:采用二步酶消化法分离VSM-Cs,显微镜下观察细胞形态,锥虫蓝染色观察细胞成活率,荧光显微镜检测细胞内钙荧光强度(FI)在KCl刺激下的变化,全细胞膜片钳记录电压-依赖性钾电流。结果:分离的VSMCs镜下呈典型的梭状或长条状,成活率达68.0%;VSMCs内钙FI在KCl刺激下可增高;并可记录到稳定的电压-依赖性钾电流。结论:本法可获得大量形态和结构良好的VSMCs,且胞膜离子通道功能良好。
- 刘幸平沈岱菲郑燕珊方欢高分飞
- 关键词：血管平滑肌细胞急性分离
- 灯盏花素自微乳在大鼠肠道吸收动力学研究被引量：10
- 2009年
- 目的研究灯盏花素自微乳在大鼠肠道吸收的动力学特征。方法建立大鼠在体肠循环模型,采用酚红标记校正肠循环液体积,以比色法和高效液相色谱法分别测定循环液中酚红和灯盏花素的含量。结果灯盏花素自微乳在药物浓度为20,40,80μg.mL-1时,Ka基本保持不变;不同肠段肠循环液中灯盏花素的剩余量的对数值与时间成线性关系,且不同肠段灯盏花素的吸收速率差异无显著性。结论灯盏花素自微乳在小肠吸收呈一级动力学过程,吸收机制为被动扩散,并且在小肠中无特定吸收部位。
- 张新勇张兴德高运军刘幸平
- 关键词：灯盏花素自微乳
- 离体和在体机械损伤致血管平滑肌增殖模型的建立
- 2014年
- 目的建立离体和在体机械损伤致血管平滑肌增殖模型。方法原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),体外建立机械划伤致VSMCs增殖模型,采用5-溴脱氧尿嘧啶(5-BrUd)掺入法,流式细胞术检测细胞增殖情况;整体动物上,采用新西兰兔左侧颈总动脉球囊损伤,术后7d取颈总动脉段,常规病理切片,HE染色,观测血管内膜厚度、内膜面积、内膜厚度/中膜厚度、内膜面积/中膜面积。结果机械划痕损伤12 h后划伤处两侧的细胞开始有部分增殖和迁移,24 h后细胞增殖较为明显。流式细胞术检测机械损伤后细胞增殖增多(P<0.05)。整体动物上,与假手术组比较,模型组术后7 d血管内膜厚度、内膜面积、内膜厚度/中膜厚度、内膜面积/中膜面积显著增加(P<0.01)。结论机械损伤可以导致离体和在体血管平滑肌细胞增殖。
- 高林江刘幸平韩莎莎姜红岩李金玉黄展勤
- 关键词：机械损伤血管平滑肌细胞增殖离体在体
- 复方仙鹤草粉对兔股动脉切口及肝脏创面止血作用实验研究被引量：2
- 1997年
- 报道复方仙鹤草粉对兔股动脉切口及肝创面的止血作用，实验结果经用等级序值法统计处理表明，复方仙鹤草粉止血效果确实，与云南白药相仿，因此认为，临床可以广用于创伤、烧伤、烫伤等的局部止血及手术止血等。
- 吴惜贞庄学煊沈达刘幸平潘毅生
- 关键词：股动脉止血
