刘文倩
- 作品数：13 被引量：19H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 重组PrP102-242在COS-1中的表达及表达产物的检测
- 2010年
- 目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测到目的蛋白在COS-1细胞中的表达。结论目的蛋白PrP102-242在COS-1细胞中的成功表达为下一步研究PrPc的结构和功能奠定了基础。
- 丁耀忠刘永生陈浩泰刘文倩张杰
- 关键词：朊蛋白
- 副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶基因序列分析与推导蛋白三维结构的分子模拟被引量：3
- 2011年
- 利用PCR方法获得副猪嗜血杆菌S-核糖基高半胱氨酸酶(luxS)基因全长DNA,将PCR纯化产物与pMD18-T载体连接并转化E.coil DH5α菌株,重组阳性质粒测序并采用生物信息学软件对所推导的氨基酸序列进行三维结构分析。结果表明,该基因全长510bp,并与GenBank中登录的其他5株菌株luxS基因完整参考序列进行比较,同源性均在70%以上。用ExPAsy软件包预测了推导蛋白的特性,运用Swiss-PDB viewer软件的SWISS-Model处理器,并利用同源建模的思想建立HPS-luxS的三维结构。拉马钱德兰图证明,构建的luxS蛋白的空间结构是合理的。
- 马艳平张杰陈豪泰马丽娜赵娜丁耀忠刘文倩王猛刘永生
- 关键词：副猪嗜血杆菌分子模拟
- 猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗研究进展被引量：2
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是威胁世界养猪业的最主要的疾病之一,每年都给养猪业带来巨大的经济损失。目前,世界上还没有对PRRS确实有效的防控措施,免疫预防是防控的主要手段。基因工程疫苗是现在疫苗研究的重点,特别是核酸疫苗不仅能引起体液免疫和激发较强的细胞免疫,而且其生产工艺简单,稳定性好,成本低,便于贮藏,不具有感染性,不会出现毒力返强等安全问题。现在对PRRS核酸疫苗的研究已初具成效,现就核酸疫苗的研究进展进行综述。
- 张奕强王猛刘文倩刘永生张杰
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗
- 绵羊腺病毒287作为基因传递载体的应用前景
- 2011年
- 绵羊腺病毒287(OAdV287)具有独特的基因组结构,全长29 576bp。基因组最大的特点是有很高的A/T含量(66.4%)和缺少典型的E1区,以及含有一段较长的冗余片段。已识别出其基因组中有3个外源基因插入区,理论上最多可容纳6.3kb的外源DNA。OAdV287的纤维和五邻体结构结构独特,衣壳蛋白上缺少可识别的整合蛋白结合域。OAdV287能感染一系列人和动物的细胞系,但是不能在非绵羊源细胞内成功复制。OAdV287载体可以避免人腺病毒的免疫干扰,具有很高的转染效率。目前,OAdV287已成为研究最热的动物源腺病毒载体之一。
- 谷元兴王猛刘文倩张杰刘永生
- 关键词：基因组结构基因载体
- 牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达
- 2010年
- 为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-7细胞中成功表达。
- 丁耀忠张杰刘永生陈豪泰马丽娜马艳平杨生海王猛刘文倩殷宏
- 关键词：COS-7细胞
- C型口蹄疫结构蛋白VP3的原核表达及生物活性
- 2011年
- 利用PCR扩增技术,以本实验室构建的C型口蹄疫pMD-P1重组质粒为模板扩增C型口蹄疫VP3片段,并连接到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建阳性质粒pGEX-VP3并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。使用不同IPTG浓度进行诱导,收集菌液进行SDS-PAGE。使用Model 422 Electro-Eluter切胶回收目的蛋白,并进行Western-Blotting分析。结果得到50 ku左右目的条带,证实融合蛋白VP3大肠杆菌中得到以包涵体形式表达,且使用切胶回收后的蛋白能被C型口蹄疫阳性血清识别,具有良好的反应原性。
- 刘文倩王猛张奕强刘永生张杰
- 关键词：原核表达生物活性
- 异构系统中检测蛋白质相互作用方法的原理及应用
- 2009年
- 基因组测序的完成并没有真正解释出细胞生命活动的本质。科学家们逐渐发现所有细胞功能都涉及蛋白质相互作用,许多疾病的发病也是由于蛋白质相互作用的改变,因此研究蛋白质相互作用具有重要的意义,也成为蛋白质组学研究的重点。目前已有许多实用且成熟的技术应用于蛋白质相互作用的检测。异构系统中检测蛋白质相互作用的方法包括细菌、酵母、哺乳动物细胞的双杂交系统和免疫共沉淀技术。文章将对这些技术的原理及应用作以综述。
- 刘文倩马艳平刘永生张杰
- 关键词：异构系统蛋白质相互作用
- DNA芯片技术在动物医学中的应用研究进展(英文)
- 2011年
- 从基因表达谱研究、病原微生物检测、细菌分型、基因突变和多态学研究等多方面概述了DNA芯片技术在动物医学中的应用进展,并对DNA芯片技术的原理和分类进行综述。
- 马艳平陈豪泰马丽娜周建华张杰丁耀忠王猛刘文倩刘永生
- 关键词：DNA芯片动物医学
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入介体的研究进展被引量：2
- 2011年
- 为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵入宿主细胞的途径,介绍了PRRSV的细胞嗜性和其侵入的介体(硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素和CD163等),以及它在病毒侵入宿主细胞时所表现的生物学功能,提出了PRRSV入侵猪肺泡巨噬细胞的一般途径。
- 张奕强刘文倩刘永生王印张杰
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒受体硫酸乙酰肝素
- 动物消化道黏膜免疫的研究现状被引量：7
- 2009年
- 介绍了动物消化道黏膜免疫系统的组成,阐述了消化道黏膜免疫的免疫机理及影响因素的研究进展。
- 刘文倩张杰刘永生
- 关键词：消化道黏膜免疫免疫机制黏膜疫苗
