刘晓丽
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程理学生物学更多>>
- 水通道蛋白4调控恶性胶质瘤细胞凋亡的研究被引量：3
- 2011年
- 目的观察抑制胶质瘤细胞LN229中水通道蛋白4（AQP4）的表达对胶质瘤细胞凋亡的影响，探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰（siRNA）技术稳定转染恶性胶质瘤细胞株LN229并得到细胞克隆（实验组siAQP4／LN229和对照组scr／LN229），Westernblot技术检测AQP4的蛋白表达；噻唑蓝（MTr）比色法检测细胞的存活率；流式细胞术（FCM）检测细胞色素C（Cyt—C）含量的变化．并用Westernblot检测Cyt—C、bcl-2及Bad的变化。建立裸鼠皮下成瘤模型，接种siAQP4／LN229和ser／LN229两组细胞（每组20只），观察AQP4降表达对移植瘤生长的影响。结果稳定转染LN229筛选出AQP4降表达的稳定克隆（clone2），与对照组比较AQP4的表达明显降低，MTr比色法分别检测在6d内两组细胞的存活率，第6天存活率分别为：scr／LN229组（587．00±4．68）％，siAQP4／N229组（317．00±26．30）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；应用流式细胞术检测发现Cyt-C的平均荧光强度分别为scr／LN229组（57．20±16．64），siAQP4／LN229组（468．80±46．90），差异有统计学意义（P〈0．05）；在蛋白水平上，siAQP4／LN229组Cyt—C含量的相对灰度值（1．62±0．16）较scr／LN229组（0．83±0．29）显著升高，siAQP4／LN229组Bad含量（1．30±0．24）较scr／LN229组（0．56±0．21）显著增加，而siAQP4／LN229组bcl-2含量（0．53±0．03）较scr／LN229组（0．73±0．12）的表达明显降低（P〈0．05）。裸鼠皮下成瘤实验显示第6周时，成瘤平均体积分别为对照组（402．67±34．27）mm3，实验组（65．15±32．12）mm。，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论AQP4能够调控胶质瘤细胞LN229的凋亡，其调节机制可能与Cyt—C的释放及凋亡相关基因Bad和bcl-2有关。
- 丁婷王静刘晓丽付丽马勇杰谷峰
- 关键词：胶质瘤AQP4脱噬作用
- Girdin蛋白调控恶性胶质瘤细胞凋亡的研究被引量：10
- 2011年
- 目的观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞凋亡的影响，并探讨其分子机制。方法利用小RNA干扰（siRNA）技术，沉默LN229细胞中Girdin的表达，得到实验组克隆（siardin／LN229），阴性对照组命名为scr／LN229。采用Westemblot技术检测Girdin、细胞色素c（Cyt—C）及Bad蛋白水平的变化。利用增殖实验、噻唑蓝（MTT）比色法检测LN229细胞的存活率；应用流式细胞术检测线粒体释放的Cyt—C量的变化。建立成瘤模型（每组20只），观察Girdin降表达对移植瘤生长情况的影响。结果siRNA技术有效沉默了LN229细胞中Girdin的表达。增殖实验显示siGirdin／LN229细胞增殖能力下降（P〈0．05），至第6天时实验组细胞数为（15．08±1．17）×10^4；对照组为（53．93±6．26）×10^4。MTr实验发现siGirdin／LN229细胞的存活率明显下降（P〈0．05），第5天时实验组为（323．15±57．01）％；对照组为（640．67±59．66）％。流式检测显示siGirdin／LN229细胞Cyt—C含量增加，平均荧光强度为12531．00±1412．98，对照组为183．67±41．55（P〈0．01）。分析Westernblot结果显示，siGirdin／LN229细胞Cyt—C、Bad的相对灰度值分别为3．57±0．43和4．78±1．03，均高于对照组Cyt—C、Bad的表达水平（相对灰度值分别为1．13±0．11、1．78±0．20）。体内实验证实Girdin降表达组肿瘤体积明显小于对照组（P〈0．05），至第7．5周时，siGirdiir／LN229组肿瘤体积为（36．42±2．00）mm3，对照组为（262．42±24．12）mm3。结论Girdin能够调控胶质瘤细胞LN229的凋亡，其调节细胞凋亡的机制可能与Cyt—C从线粒体释放及Bad的表达有关。
- 王静丁婷刘晓丽李文良谷峰马勇杰
- 关键词：胶质瘤脱噬作用
- 抑制信号转导和转录激活因子-3活化对恶性胶质瘤细胞LN229运动能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察抑制信号转导和转录激活因子-3（STAT3）的活化对调控人恶性胶质瘤LN229细胞运动能力的影响。方法应用JAK／STAT3信号通路抑制剂AG490处理LN229细胞株，Westernblot检测STAT3、磷酸化STAT3（P—STAT3）的表达。噻唑蓝（MTT）比色法筛选能够阻断LN229细胞STAT3活化的最适AG490浓度；划痕实验和趋化实验检测AG490给药后，LN229细胞运动能力的变化；F-肌动蛋白（F-actin）实验检测AG490对LN229细胞肌动蛋白聚合能力的影响。结果AG490可有效抑制LN229细胞STAT3的持续活化。50μmol／L浓度的AG490在不影响LN229细胞存活时（t=1．862，P〉0．05），能够有效抑制STAT3的磷酸化，对照组和50wmol／LAG490处理组的p-STAT3／STAT3的密度比值分别为0．530±0．040和0．291±0．036（t=4．821，P〈0．01）。伤口愈合实验可见50μmol／LAG490处理的LN229细胞非定向运动能力降低，24h时对照组运动的距离为（0．290±0．049）mm；实验组为（0．150±0．054）mm（P〈0．05）。体外趋化实验显示50μmol／LAG490处理的12q229细胞定向运动能力降低（P〈0．01），表皮细胞生长因子（EGF）浓度为10μg/L时对照组穿过膜的细胞数为93．92±9．52；实验组为24．52±3．04。50μmol／L浓度的AG490抑制LN229细胞肌动蛋白聚合能力（P〈0．05）。结论STAT3信号转导通路参与调控胶质母细胞瘤LN229的细胞运动过程，阻断STAT3的活化可以抑制恶性胶质瘤的运动能力。
- 张姣李文良刘晓丽谷峰马勇杰
- 关键词：胶质瘤细胞运动
- 还原-氧化预处理对Co_3O_4催化分解N_2O性能的影响被引量：2
- 2019年
- 采用液相沉淀法制备了Co_3O_4催化剂,并对其进行还原-氧化预处理制得Co_3O_4-RO。通过XRD、N_2-physisorption、Raman、H_2-TPR、XPS和O_2-TPD等技术对催化剂进行表征,在连续流动微反应装置上考察了催化剂催化分解N_2O性能。结果表明,经过还原-氧化预处理,与Co_3O_4催化剂相比,Co_3O_4-RO结晶度变差,晶粒粒径减小,尤其是尖晶石结构重构过程削弱了Co-O键,增强了催化剂表面的氧物种脱附能力,降低了催化分解N_2O反应的活化能,因而显著提高了催化剂的催化活性。同时,Co_3O_4-RO对原料气中的O_22%(体积分数)和H_2O 2. 3%(体积分数)表现出较强的耐受性。
- 郑珂王永钊胡晓波武瑞芳刘晓丽赵永祥
- 关键词：CO3O4
- 桥梁分子1-S的SH3结构域对胶质瘤细胞增殖和运动能力的影响
- 2013年
- 目的观察桥梁分子1一S（ITSNl-S）的SH3结构域对恶性胶质瘤细胞LN229增殖和运动能力的影响，并探讨其相关分子机制。方法将ITSNl-S的全长和去除SH3结构域的ITSNl一S（即EHl一EH2一CC片段）分别连接人双酶切后线性化的PCDH—CMV—MCS—EFl，Puro载体中作为实验组，用不作处理的PCDH—CMV．MCS．EFl一Puro载体作为对照组，通过慢病毒转染上述3个重组质粒进入LN229细胞，筛选稳定表达的细胞克隆；Westernblot检测目的蛋白的表达；噻唑蓝（M订）实验检测连续培养6d各组胶质瘤细胞的增殖；软琼脂克隆形成实验检测连续培养2周的各组胶质瘤细胞克隆形成能力；划痕试验检测各组胶质瘤细胞在0、3、6、9、12、24h的非定向运动能力。结果MTF实验和软琼脂克隆形成实验均证明ITSN1-S全长组细胞的增殖能力比EHl-EH2-CC片段组和空载体对照组显著增强（P〈0．05），但EH1-EH2-CC片段组和空载体对照组两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。第6天时ITSNl．S全长组、EH1-EH2-CC片段组和空载体对照组细胞增殖率分别为（523．604-32．12）％、（409．54±31．33）％和（353．89±13．98）％；第14天时ITSNl-S全长组克隆形成率达（46．49±2．34）％，而EHl-EH2-CC片段组和空载体对照组克隆形成率分别为（23．00±1．66）％和（17．684-3．47）％。划痕试验12h时ITSNl一S全长组细胞的运动速度比EHl-EH2-CC片段组和空载体对照组明显提高（P〈0．05），但EH1-EH2-CC片段组和空载体对照组两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。24h时ITSN1-S全长组运动距离为（0．39±O．02）mill，EHl一EH2一CC片段组和空载体对照组分别为（0．304-0．02）mm和（0．29±0．01）mm。结论ITSN1-S参与调节胶质瘤细胞的增殖和运动，ITSN1-S中SH3结构域是影响胶质瘤细胞增殖与运动能力的主要功能结构域。
- 田春迎刘晓丽李智慧谷峰马勇杰
- 关键词：胶质瘤增殖迁移
