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polo样激酶-1干扰质粒构建及对人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡的影响: 2012年; 目的构建polo样激酶-1（PLK1）基因小于扰RNA（siRNA），观察其对肝癌细胞凋亡的影响。方法设计合成3个PLK1siRNA（siRNAl、siRNA2、siRNA3）干扰序列，构建干扰载体，转染人肝癌细胞株SMMC-7721，观察48h后转染效率，采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）筛选下调PLK1mRNA效果最好的siRNA；然后选择以该siRNA转染48h的SMMC-7721细胞，分别以实时定量RT－PCR和Westernblot法检测空白组、对照组及转染组细胞中PLK1基因和蛋白表达；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果肝癌细胞株SMMC-7721中存在PLK1蛋白的过表达。应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48h后，PLK1mRNA相对水平siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了74％和78％，而PLK1蛋白的表达siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了83％和88％，抑制率达88％；siRNA2组中出现大量凋亡细胞，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PLK1基因在肝癌细胞增殖中具有重要的调控作用。PLK1-siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖，诱导凋亡是其重要机制之一。; 倪侃陈佳慧贾乃昕吴龙祥常仁安陈钟; 关键词：肝细胞小干扰RNA

靶向polo样激酶-1基因小干扰RNA质粒的构建及其效能检测: 2012年; 目的:用脂质体法构建polo样激酶-1(polo-like kinase-1,PLK1)基因RNA(siRNA)。方法 :设计合成PLK1siRNA干扰序列,构建干扰载体,然后以该siRNA转染SMMC-7721细胞后,以实时定量Western Blot检测各组细胞PLK1蛋白表达情况。结果:应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48 h后,PLK1蛋白的表达siRNA分别较无关对照组和空白对照组有明显下降。结论:通过脂质体转染法成功构建靶向PLK1的siRNA,实现了细胞的稳定转染,为进一步研究奠定了基础。; 倪侃陈佳慧贾乃昕吴龙祥常仁安陈钟; 关键词：肝细胞性肝癌小干扰RNA

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吴龙祥