周余来
- 作品数：136 被引量：257H指数：7
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 重组人抑瘤素M的表达、纯化及鉴定
- 目的研究重组人抑瘤素M(rhOSM)在毕赤酵母中分泌表达的条件及rhOSM的纯化方法。方法利用已筛选出来的rhOSM毕赤酵母高表达菌株,在实验室条件下,利用5 L摇瓶发酵表达rhOSM。对发酵液上清分别应用SP Seph...
- 孔宁周余来王毅宿晓云王芳丛中一苏曼曼侯宜颜炜群
- 关键词：发酵纯化
- 文献传递
- 原位回肠代膀胱实验动物模型的建立
- 目的:探索犬膀胱全切原位回肠代膀胱、尿道术的实验方法,为组织工程膀胱、尿道移植研究提供实验模型。方法:体重13kg的雄性京犬,术前禁食24小时,以3％戊巴比妥钠按1ml/kg剂量对犬麻醉,采用标准全膀胱切除手术方法。在距...
- 周余来高伟石毅田奇李胜文王芳宿晓云
- 关键词：膀胱实验动物模型全切除术
- 文献传递
- 兔膀胱移行上皮细胞的体外培养被引量：2
- 2007年
- 目的:对兔膀胱移行上皮细胞进行原代及传代培养,探索用于泌尿系统组织工程的膀胱移行上皮种子细胞的最佳培养方法。方法:实验于2005-09/2006-01在吉林大学药学院生物工程实验室完成。①取1月龄新西兰大耳白兔,耳缘静脉行空气栓塞处死,超净台内无菌取膀胱。②采用中性蛋白酶分离膀胱各层组织。③胰蛋白酶消化获得膀胱移行上皮细胞。④将获取的膀胱移行上皮细胞分别接种到含体积分数为0.01,0.05,0.1血清的DMEM-F12培养液进行培养。④每日在倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长状况;分别在第1,3,5,7,9天以四甲基偶氮唑盐法作细胞生长曲线。结果:①原代移行上皮细胞于接种后34～48h贴壁,培养六七天时可达80%融合,呈典型铺路石状。②传代后的细胞生长稳定快速,24～36h贴壁,五六天可达80%融合。③应用四甲基偶氮唑盐法检测不同体积分数血清对移行上皮细胞增殖的影响,显示膀胱移行上皮细胞在含有体积分数为0.05血清的DMEM-F12培养中生长状态最佳。结论:采用中性蛋白酶与胰蛋白酶联合消化法,对兔膀胱移行上皮细胞进行原代及传代培养,是一种稳定、快速的膀胱移行上皮细胞的培养方法。
- 田奇石毅陈月宿晓云王芳周余来
- 关键词：膀胱上皮细胞细胞培养
- 树突细胞在直肠癌免疫治疗中的研究进展被引量：1
- 2009年
- 李响刘朋飞朱磊周余来
- 关键词：树突细胞直肠癌疫苗免疫疗法
- 细胞凋亡在家兔正常软骨化骨过程中作用的电镜观察被引量：2
- 2005年
- 目的通过对家兔软骨细胞超微结构的观察,探讨细胞凋亡在正常软骨细胞向软骨分化过程中的作用。方法采用透视电镜,检测5周龄正常家兔肋软骨细胞超微结构的变化。结果超微结构显示,软骨细胞的骨化过程是渐进过程,从静止区到骨化区,软骨细胞的形态、细胞核及各种细胞器的变化是逐渐增殖活跃到凋亡出现,且细胞的凋亡从增殖带和肥大带交接处开始出现。结论家兔肋软骨生长板软骨细胞从静止区到骨化区细胞的增殖和分化是一个渐进的过程,在此过程中凋亡可能起着重要的作用。
- 王欣周余来杨春伟颜炜群
- 关键词：细胞凋亡软骨细胞超微结构
- 兔角膜缘干细胞的研究进展被引量：5
- 2007年
- 目前,角膜移植是临床上治疗角膜疾患的最有效途径,但供体角膜非常有限。新近兴起的干细胞技术,为组织工程角膜的研制和应用提供了契机。对于以角膜缘干细胞缺乏或功能障碍为特征的疾病也有治疗效果。采取角膜缘干细胞移植应是一种合理有效的治疗手段。本文主要介绍了兔角膜缘干细胞的体外分离、培养、鉴定及一些生长因子对其增殖的影响。
- 白靓周余来成岩顾国贞
- 关键词：兔角膜缘干细胞体外培养细胞增殖
- 应用改性聚乳酸构建复层组织工程皮肤的可行性研究被引量：1
- 2007年
- 目的:以改性聚乳酸为细胞外基质网架,探索利用其构建复层组织工程皮肤的可行性。方法:取出生24h以内的Wistar大鼠背部皮肤,以Dispase-trypsin双酶消化分离培养表皮角质形成细胞;以Ⅰ型胶原酶消化分离培养真皮成纤维细胞。采用盐析法制备机械性能得到部分改进的聚乳酸多孔泡沫支架,向支架接种真皮成纤维细胞(密度为3.0×105cell·mL-1)和表皮角质形成细胞(密度为5.0×105cell·mL-1),体外培养1周,构建复层组织工程皮肤,并取培养的皮肤进行切片检测。结果:复层组织工程皮肤在结构上与正常皮肤相似,具有真皮、表皮双层结构。改性聚乳酸网架上有双层细胞生长,生长的细胞与网架接触,并且在其表面形成较为明显而连续的细胞层。结论:双醛淀粉作为良好的增柔剂在改善聚乳酸网架机械性能的同时,也使其具有良好的细胞相容性,不影响细胞的生长增殖和代谢,可以进一步用作组织工程皮肤的支架材料。
- 王宗良师铁英石毅冯颖崔百元李俊锋颜炜群周余来
- 关键词：皮肤聚乳酸双醛淀粉
- 克山病致病因素对大鼠心肌线粒体α－磷酸甘油脱氢酶的影响
- 1994年
- 测定了克山病病区粮喂养大鼠心肌线粒体α－磷酸甘油脱氢酶（ａ－ＧＰＤ）活性，并观察了硒和维生素Ｅ对该酶的影响。结果表明，病区粮组大鼠心肌线粒体α－ＧＰＤ活力明显低于非病区粮组和常规．食组，并在补０．１μｇ／ｇ＋８００μｇ／ｇＶＥ后，α－ＧＰＤ活性升高与病区粮组比较有显著差异、本实验结果提示：１、饲克山病病区粮大鼠心肌线粒体α－ＧＰＤ活力的降低，此时的心肌可能处于甲状腺激素功能低下状态．２、硒（０．１μｇ／ｇ）＋维生素Ｅ（８００μｇ／ｇ）的补充可以升高该酶活性，改善甲状腺激素功能不足状态。
- 刘晓亮许丽艳周余来刘松岩王凡
- 关键词：克山病维生素E
- 槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素致体外心肌细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2017年
- 目的观察槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷对阿霉素(ADR)致心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法实验选用出生24 h内的Wistar大鼠6只,雌雄不限,分离心肌细胞。采用纯化培养的心肌细胞建立ADR损伤模型,实验分为6组:空白对照组(正常细胞培养,加入等数量的MEM培养基,不加入任何药物)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(加入含DMSO浓度为5μg/ml的MEM培养液)、ADR损伤组(加AOR浓度为1μg/ml的MEM培养液)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组(分别为低剂量12.5μg/ml、中剂量25μg/ml、高剂量50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷保护组)。分组给药后孵育24 h。显微镜下观察心肌细胞形态,MTT法测定心肌细胞存活率,应用试剂盒分别检测样品中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果与ADR损伤组比较,低、中、高剂量保护组均可使心肌细胞存活率增高(P<0.01),LOH活性降低(P<0.01或P<0.05),NO活性降低(P<0.01),SOD活性增强(P<0.01)。结论 12.5~50μg/ml槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷均能减轻ADR对心肌细胞损伤,具有明显的心肌细胞保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。
- 李希宁吴璇周余来杨锦竹姜波
- 关键词：阿霉素心肌细胞损伤
- 应用转BMP7基因软骨细胞构建组织工程软骨被引量：7
- 2006年
- 目的:利用转BMP7基因软骨细胞构建组织工程软骨,测定BMP7基因在构建的组织工程软骨中的表达,探讨与未转BMP7基因软骨细胞构建的组织工程软骨的生物学差异。方法:实验于2004-06/2005-01在哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所完成。应用转染重组pcDNA3.1-BMP7真核表达载体质粒并用G418筛选14d的阳性克隆软骨细胞,以胶原-纤维蛋白凝胶为支架,构建转BMP7基因组织工程软骨。以未转BMP7基因组织工程软骨作为对照,软骨细胞的接种密度为5×109L-1。用甲苯胺蓝、苏木精-伊红染色对组织工程软骨培养物组织学分析;原位杂交法检测Ⅱ型胶原mRNA的表达;透射电镜观察组织工程软骨培养物的超微结构;原位杂交和免疫组化法测定体外培养物BMP7mRNA和蛋白的表达。结果:①BMP7基因转染软骨细胞情况:G418筛选7d时大量细胞死亡,约30%的细胞存活,且贴壁生长。G418连续筛选14,28d均有阳性克隆细胞生成,贴壁生长率100%,存活的阳性克隆细胞为转染成功的软骨细胞。②组织工程软骨培养物大体形态及显微镜观察结果:构建的组织工程软骨培养物呈浅粉红色胶冻样圆盘状,透明,体积约为16mm×16mm×3mm。显微镜下只能观察到呈圆形的浅层细胞。③组织工程软骨培养物组织学分析结果:组织工程软骨培养物体外培养7,14,28d,细胞周围有丰富的细胞外基质,转BMP7基因组织工程软骨培养物细胞基质较多,体外培养14d软骨细胞合成和分泌最为活跃。④组织工程软骨培养物Ⅱ型胶原表达mRNA原位杂交检测结果:软骨细胞核周围呈棕黄色,有mRNA表达。⑤不同培养时间下组织工程软骨培养物DNA含量的测定情况:DNA含量随着培养时间的推移逐渐增加,21d时达到高峰,转BMP7基因比未转染BMP7基因的组织工程软骨培养物DNA含量高(P<0.05)。⑥不同培养时间下组织工程软骨培养物糖胺多糖含量的测定情况:转BMP
- 曲福军侯宜刘丽玲周余来侯立中
- 关键词：生物医学工程转基因软骨细胞
