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干扰素β通过RANK/RANKL信号分子调控胶原抗体诱导关节炎小鼠的分子学机制被引量：1: 2014年; 目的:研究干扰素β(interferonβ,IFN-β)在抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的小鼠类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)样模型中的调控作用,探讨RA潜在的干预新靶点。方法:应用抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导建立胶原抗体诱导关节炎(collagen antibody induced arthritis,CAIA)小鼠模型,通过其表型、关节评分、免疫组织化学染色、X射线衍射分析是否建模成功,并用IFN-β基因工程药物干预,RANK体外诱导破骨细胞生成,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测破骨细胞数量,实时荧光定量聚合酶链反应检测RANK/RANKL关键分子变化。结果:CAIA小鼠建模成功,IFN-β能显著缓解CAIA小鼠的病情,实时荧光定量聚合酶链反应显示IFN-β干预后小鼠骨关节中c-FOS、NFATc-1的表达量下降,IFN-β能抑制破骨细胞生成。结论:IFN-β缓解CAIA小鼠模型发病的可能机制是通过RANK/RANKL-IFN-β-NFATc-1下调破骨细胞的生成。; 陈呢喃赵蓉周晓薇苗平许荣张冬青; 关键词：干扰素Β

抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体对IL-6信号分子调控浅析被引量：4: 2014年; 目的:分析鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体[anti-IL-6Rβ(gp130)mAb]的生物学特性及对IL-6信号分子的调节作用。方法:利用Western blot、竞争性ELISA实验、功能表位结合实验,检测anti-IL-6Rβ(gp130)mAb的亲和力、效价及与gp130抗原表位结合特异性。进而探讨anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对U266细胞、RA患者外周血单个核细胞(PBMC)及滑膜液单个核细胞(SFMC)增殖和分化中的IL-6信号分子的调控机制。结果:Anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对gp130具有高亲和性(如10A1细胞株的亲和力常数可达为2.62E-10),所获得的多株单抗还具有针对不同抗原结合表位的特性,可用于分析和研究IL-6信号通路及下游STAT3的磷酸化。结论:获得针对不同抗原结合表位的anti-IL-6Rβ(gp130)mAb,初步的实验结果表明此类单抗不仅具有调控IL-6信号分子和下游STAT3磷酸化的生物学功能,并为解析临床RA的发病与IL-6信号分子的关联性提供了初步的实验结果。; 周晓薇苗平陈呢喃赵蓉钱柳余奇文张继英许荣何东仪何东仪陆梅生张冬青; 关键词：IL-6 GP130 STAT3 RA

骨桥蛋白促进结肠癌细胞增殖的机制研究被引量：2: 2014年; 骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型非胶原性富含硅铝酸的趋化因子样蛋白,属小整合素结合配体N连接糖蛋白(SIBLING)家族成员,在许多肿瘤中具有重要的致癌作用,其配体是整合素和CD44。我们的研究发现,OPN可以通过和CD44的作用上调结肠癌细胞株HT29内果蝇Zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)的表达和其活性,导致组蛋白3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)水平增高,对结肠癌细胞具有显著的促增殖作用。通过阻断OPN或利用EZH2特异性抑制剂(GSK126)可以抑制结肠癌细胞的体内外的增殖,从而具有潜在的临床应用价值。; 张辉周晓薇余奇文张继英张冬青陈雪华顾琴龙; 关键词：OPN EZH2 结肠癌细胞

IL-17^+γδT细胞与疾病关联性的研究进展被引量：1: 2013年; γδT细胞是一群异质细胞,人和小鼠不同组织部位的γδT细胞亚群表型多变、功能丰富。γδT细胞经过胸腺选择,形成IL-17+γδT细胞、IFN-γ+γδT细胞或IL-4+γδT细胞,它的分化受到很多因素的调控。γδT细胞是炎症介质IL-17的重要来源,IL-17+γδT细胞可以参与多种疾病的诱发和发展,如过敏、自身免疫性疾病,甚至恶性肿瘤。此外,它们也在宿主防御中发挥保护作用,防治传染病和诱导细胞毒性T淋巴细胞对癌症的反应。就IL-17+γδT细胞的发育、分化和调节机制以及在各种疾病中的作用进行综述。; 周晓薇胡朝英张冬青; 关键词：ΓΔT细胞 IL-17 分化自身免疫性疾病肿瘤

Vγ9Vδ2T细胞亚群的建立与功能分析被引量：2: 2013年; 目的:建立γδT细胞的一个亚群(Vγ9Vδ2 T细胞亚群),分析其免疫学相关功能。方法:对健康人外周血单个核细胞进行磁珠分选,获得富含γδT细胞的细胞群,用异戊烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,IPP)、白细胞介素2(IL-2)刺激γδT细胞增殖。通过流式细胞仪检测分析Vγ9Vδ2 T细胞(γδT细胞主要亚群)在IPP刺激后的分化趋势及表面标志,分离出效应型Vγ9Vδ2 T细胞,对其抗原递呈功能进行研究,并分析不同表型的Vγ9Vδ2 T细胞的分泌格局。结果:Vγ9Vδ2 T细胞在IPP作用下可被激活,不断增殖并分化为效应记忆型(TEM、CD45RA-CD27-γδT),该细胞群高表达HLA-DR和CD80/86等分子,呈现出专职性抗原递呈细胞的表型特征;此群效应记忆型Vγ9Vδ2 T细胞能有效递呈PPD、TT等可溶性抗原给CD4+T细胞,具有与B细胞相当的抗原递呈功能。实验还发现,不同表型的Vγ9Vδ2 T细胞具有不同的细胞因子分泌格局,新鲜分离的健康人外周血Vγ9Vδ2 T细胞(非效应型)以分泌IFN-γ为主,而效应记忆型Vγ9Vδ2 T细胞在产生IFN-γ的同时能分泌IL-17。结论:Vγ9Vδ2 T细胞亚群能在IPP的作用下激活、增殖,并分化为具有抗原递呈细胞功能的效应记忆型细胞,其分泌IFN-γ的同时可分泌IL-17。; 邱潮林周晓薇胡朝英谢秋华胡锦辉赵蓉钱柳张冬青; 关键词：T细胞

IFN-β干预抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的RA样小鼠模型(CAIA)的分子学机制研究: 研究背景:新近研究表明B细胞在 RA的发病中起着重要的作用,因此本研究采用CAIA小鼠模型研究 RA这一因免疫功能紊乱并最终引起骨质损伤而致残的自身免疫性疾病。IFN-β不仅具有抗病毒和免疫调节作用,且在维持骨平衡中也有...; 赵蓉周晓薇苗平钱柳余奇文张继英许荣陈雪华张冬青; 关键词：IFN-Β C-FOS

抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的RA样小鼠模型的建立及其免疫病理学指标分析被引量：5: 2013年; 应用IFN-β药物干预由抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导建立的类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)样小模型(CAIA),揭示RA发病可能的新靶点以及为将IFN-β药物用于RA患者以调节其免疫功能紊乱和骨代谢失衡提供新的理论和实验依据。本研究采用不同浓度的抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导BAIB/c小鼠,建立RA样动物模型,通过观察其外观、关节评分以及番红固绿和HE染色并与正常对照组比较来评估该模型的成功建立:采用RT-PCR和免疫组化等技术检测各组模型小鼠与免疫功能紊乱和骨质破坏密切相关的MMP-3、MMP-3/TIMP-1、RANKL及c-Fos分子的表达水平。研究发现CAIA组模型小鼠上述各炎症分子的表达均显著高于对照组小鼠,同时利用重组鼠源性IFN-β调控该模型,发现其能缓解CAIA小鼠的发病情况,证明IFN-β具有使RA样小鼠免疫功能重建以及阻抑模型小鼠骨破坏的生物学作用,为进一步深入研究其调控机制和尽快将IFN-β用于临床RA的治疗奠定了实验基础。; 赵蓉许荣周晓薇苗平钱柳余奇文张继英陈雪华张冬青

类风湿关节炎患者自身抗体及关节损伤因子检出的临床意义被引量：5: 2014年; 目的:检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者关节损伤因子及多种自身抗体,探讨其与RA发病间的关联性。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测15例RA患者血清和滑膜液中关节损伤相关因子基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinases 3,MMP3)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP-1)、骨破坏因子——核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和其保护性抑制剂骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的表达。检测6例RA患者的sIL-6和sIL-6Rα、sgp130表达水平,同时设骨关节炎(osteoarthritis,OA)为对照组(6例)及正常对照组(8例)。分析22例RA患者临床常用的检测指标,包括类风湿因子、抗环瓜氨酸多肽抗体、葡萄糖-6-磷酸异构酶及23例RA患者抗胶原Ⅱ抗体的表达,并以OA患者为对照;针对用合成的EBV肽段和人HLA-DR4肽段检测和分析15例RA患者抗EBV肽段和抗HLA-DR4肽段抗体的阳性率。结果:RA患者关节腔滑膜液中MMP3和TIMP1表达异常,滑膜液MMP3/TIMP1比值显著高于相应的血清相应比值(P<0.001)。与OA组相比,RA患者血清及滑膜液中RANKL水平升高(P<0.05),RA患者血清中RANKL/OPG比值高于RA患者滑膜液(P<0.05)。RA患者体内IL-6信号系统表达异常,其滑膜液中sIL-6Rα水平高于OA组(P<0.05),而天然拮抗剂sgp130的血清水平则显著低于OA组血清中(P<0.001),RA组滑膜液及血清sIL-6Rα/sgp130比值均异常升高。检测患者自身抗体发现,RA患者组与OA患者组间,血清类风湿因子-IgM、抗环瓜氨酸多肽抗体、葡萄糖-6-磷酸异构酶阳性比例及滑膜液抗胶原Ⅱ的IgG型抗体的水平差异有统计学意义(P<0.05)。此外,80%的RA患者被检出为HLA-DR4阳性,且其体内存在EBVgp110、EBV EBNA1(IgG)及EBV VCA(IgG)抗体。结论:RA患者异常的炎症因子及自身抗体表达可能介导患者关节炎症及骨平衡的紊乱,是导致患者发生关节病变和破坏�; 许荣周晓薇陈呢喃赵蓉苗平钱柳胡朝英余奇文张继英何东仪肖连波张冬青; 关键词：类风湿关节炎关节损伤骨关节炎

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周晓薇

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