姜珊
- 作品数：4 被引量：74H指数：3
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- 大肠杆菌表达抗脂多糖因子的发酵条件优化被引量：2
- 2011年
- 抗脂多糖因子(anti-lipopolysaccharide factor,ALF)作为一种重要的抗菌肽,具有抗菌性强,抗菌谱广的特点。将中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)抗脂多糖因子基因ALF克隆至pET32a载体获得原核表达载体。为了提高ALF融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量,保持抑菌活性,对已构建的重组大肠杆菌的发酵条件进行了优化,通过单因素分析的方法,考察了五种不同的培养基对表达量的影响,并在LB+M9培养基的基础上对培养基各组分进行了选择和优化,确定最佳培养基组分为:2.5 g/L蔗糖,10 g/L酵母膏,2.4 g/L(NH4)2SO4,12.8 g/L Na2HPO4,3 g/L KH2PO4,10.5 g/L NaCl,2 mmol/L MgSO4,0.1 mmol/L CaCl2溶液。分析了多种因素对表达量的影响,结果表明,培养基pH调至6.5,在菌体OD600达到0.8时加入诱导剂IPTG至终浓度为0.5 mmol/L,33℃继续诱导5 h,蛋白表达量最高。表达的融合蛋白可以抑制藤黄微球菌(Micrococ-cus luteus)在平板上的生长。
- 姜珊刘梅王宝杰蒋克勇王雷
- 关键词：大肠杆菌发酵条件
- 重组抗菌肽海藻酸钠微囊制备与体外释放特征研究被引量：8
- 2012年
- 对重组表达的海洋生物抗菌肽对虾素3-2进行亲和层析纯化,以海藻酸钠为壁材,采用凝聚法制备了重组抗菌肽海藻酸钠微囊,以微囊的形态和包封率为指标优化制备工艺,对制备的微囊进行体外释放特征的初步研究。结果显示,在氯化钙浓度为1.5%,海藻酸钠浓度为2.0%时,制备的微囊为完整的球形,冷冻干燥后的直径约为1.1 mm,包封率为83.87%。微囊在模拟胃液(pH 2.0)中2 h左右释放量趋于稳定,释放量低于14%;微囊在模拟肠液(pH 7.8)中不断释放,5 h时释放量达98%,表明微囊具有良好的肠溶性而可以抵抗胃液的破坏,可以用作重组抗菌肽缓释/控释制剂,为抗菌肽在水产病害防治过程的口服给药提供实验基础。
- 张守庆王宝杰姜珊蒋克勇刘梅王雷
- 关键词：海藻酸钠微囊包封率体外释放口服给药
- 中国对虾血蓝蛋白基因cDNA的克隆与序列分析被引量：11
- 2010年
- 利用3’和5’RACE技术从中国对虾Fenneropenaeus chinensis肝胰腺中克隆了1个血蓝蛋白基因FCHc,FCHc基因cDNA全长为2161bp。其中,开放阅读2 034bp,编码678个氨基酸,预测分子量为77.59 kDa。FCHc序列与凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei血蓝蛋白同源性为82%,与日本囊虾Marsupenaeus japonicas同源性为85%。Real-timePCR实验结果表明,FCHc在肝胰腺中的相对表达量最高,在心脏和表皮中几乎不表达。该基因在鳗弧菌和对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后的对虾肝胰腺中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达趋势,提示中国对虾FCHc基因在免疫反应中具有重要作用。
- 孙杰王宝杰孙姝娟李晓华姜珊刘梅蒋克勇王雷
- 关键词：中国对虾血蓝蛋白基因克隆
- 饲料中添加重组抗菌肽对吉富罗非鱼生长性能及免疫力的影响被引量：55
- 2011年
- 以吉富罗非鱼(genetically improved farmed tilapia,GIFT)幼鱼(体质量10.68 g±0.53 g)为研究对象,在实验饲料中分别添加0、5、10、20、50 mg/kg重组中国明对虾抗菌肽以及100 mg/kg氟苯尼考,并于实验结束时进行注射攻毒(嗜水气单胞菌)。通过8周的养殖实验,研究了饲料中添加抗菌肽对吉富罗非鱼幼鱼的生长性能、免疫指标以及攻毒实验的影响。结果显示,饲料中添加5～10 mg/kg抗菌肽可以显著提高罗非鱼的增重率、红细胞总数以及过氧化氢酶的活性,当添加量为5 mg/kg时,特定生长率最高;当添加量为50 mg/kg时,肝脏的超氧化物歧化酶与血清中溶菌酶活性较对照组显著降低(P<0.05);添加100 mg/kg氟苯尼考组较对照组能显著提高红细胞总数;当添加量为5～20 mg/kg时,嗜水气单胞菌攻毒后的死亡率显著降低(P<0.05),以5 mg/kg组存活率最高,氟苯尼考组差异不显著。结论认为,饲料中添加适量重组抗菌肽对幼鱼有一定的促生长作用,并能提高部分免疫指标以及攻毒后的存活率,但过高剂量的抗菌肽对幼鱼的生长与部分酶指标有一定的负面影响,因此建议抗菌肽的添加量不超过20 mg/kg。本研究旨为对虾抗菌肽在罗非鱼饲料中的合理应用提供实验依据。
- 姜珊王宝杰刘梅蒋克勇宫魁王雷
- 关键词：吉富罗非鱼免疫
