孔繁华
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
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- 白细胞介素-6在人白血病细胞中的转录与自分泌被引量：7
- 2000年
- 目的 探讨白细胞介素 6 (IL 6 )基因在不同类型白血病细胞中的构成表达以及白血病细胞是否自泌IL 6 ,为更好地利用IL 6 /IL 6R系统介导重组白细胞介素 6 假单胞菌外毒素融合蛋白(IL 6 PE40 )靶向治疗白血病提供可靠依据。方法 采用反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)半定量技术、序列分析及ELISA方法检测白血病细胞系U937、HL6 0、KG1、TF1、K5 6 2、HuT2 8、CEM及Raji中IL 6mRNA的表达以及IL 6的自泌含量。结果 IL 6mRNA在粒、红、单以及淋系白血病细胞系中的相对表达丰度甚低 ,仅在 0 0 3～ 0 0 7之间 ,而慢性粒细胞白血病K5 6 2却高表达 ,其丰度达 1 2 5 ;所检测的8种白血病细胞在自泌IL 6水平上也存在着显著差异 ,按分泌含量的不同拟可将各型白血病细胞分为高、中、低三型。结论 不同类型的白血病细胞其IL 6基因的构成性表达和自泌IL 6的水平是明显不同的 ,大量自泌的IL 6有可能会对重组IL 6 PE40的靶向性结合产生竞争性抑制 ,从而影响其特异性杀伤白血病细胞的效果。
- 刘爽奚永志郭斯启刘楠屠敏孔繁华
- 关键词：白血病白细胞介素6
- 低分辨率和高分辨率HLA-Ⅱ类PCR-SSP基因分型在骨髓移植中的应用被引量：3
- 1999年
- 为满足临床骨髓移植对HLA配型的要求，本研究采用先进、快速的DNA提取方法和低分辨率与高分辨率HLA-ⅡPCR—SSP分型方法，对150例临床骨髓移植供、受者进行HLA-Ⅱ类分型研究，并且对分型方法进行了改进，建立了随时间释放DNA聚合酶活性的分型方法。结果表明：DNA提取方法可以满足微量HLA-Ⅱ类DNA分型方法对DNA样本的要求，200μl全血DNA产量为4—12μg，A260／A280为1．7～1．9。低分辨率和高分辨率HLA-Ⅱ类PCR-SSP均具有良好稳定性、可靠性和准确性。低分辨率HLA-Ⅱ类PCR—SSP方法耗时1．5小时，适用于同胞兄弟姐妹间的骨髓移植配型。高分辨率HLA-Ⅱ类亚型PCR-SSP分型方法耗时2小时50分钟，适用于同胞兄弟姐妹间骨髓移植配型的特殊病例和无血缘关系骨髓移植供、受者间的配型。本研究的分型方法对于推动我国骨髓移植工作的开展和未来的发展均具有重要的意义。
- 郑黎燕孔繁华屠敏金荔陈兴国奚永志郭斯启刘楠
- 关键词：骨髓移植聚合酶链反应-序列特异性引物组织相容性
- HLA-A抗原的三维结构模型预测GVHD的发生<英文>被引量：1
- 1999年
- 如何准确预测GVHD的发生始终是造血干细胞移植领域中十分棘手的难题。采用HLA抗原三维结构的模型来预测GVHD的发生是移植免疫研究的最新进展之一。我们在对17个移植家系进行筛选时，发现了一个供、受体HLA-A位点不合的家系，临床移植后该患者发生了Ⅳ级GVHD。本实验采用南分辨巢式PCR-SSP和DNA序列测定证实患者的HLA-A位点发生了重组(A^*6901→A^*0201)。进行蛋白质三维结构模型分析显示，供、受体差异抗原的空间构象存在明显差异。可能会成为移植后发生GVHD的分子基础，从而验证了我们的实验结果和理论推断。由此可见，该HLA抗原三维结构模型在预测GVHD的发生中具有重要意义。
- 任素萍孔繁华孙玉英金荔屠敏陈兴国奚永志
- 关键词：人类白细胞抗原分子构象移植物抗宿主病基因重组
- HLA-DQB1-PCR-SSP方法的建立及其在骨髓移植中的应用研究被引量：2
- 1998年
- 为了改进骨髓移植中供、受体配型技术,在已有技术的基础上改进、建立了新的HLA-DQB1-PCR-SSP方法。利用澳大利亚皇家医院赠送的HLA标准分型细胞对自行设计引物的特异性进行鉴定,发现该引物设计合理、扩增特异。通过内部阳性对照引物的设立,可较容易地将纯合子及杂合子分型细胞分开,并对个体DNA进行了尝试。结论表明,HLA-DQB1-PCR-SSP快速、简便、灵敏、重复性好,结果易于判断,适于小样本及急症病人的器官及骨髓移植配型,是比较理想的HLA-Ⅱ类基因分型方法。
- 孙玉英孔繁华奚永志刘广贤陈兴国金荔孙成文
- 关键词：HLA-DQB1基因骨髓移植
- 应用CREG,残基匹配和HLA三维结构选择不完全相合造血干细胞移植的供体被引量：1
- 2002年
- 应用造血干细胞库进行检索后 ,往往有多个供体满足一定的检索条件 ,为了确定最适合的供体 ,选择了待进行移植的临床病例 ,分别从交叉反应组 (CREG)抗原、残基匹配理论和HLA抗原模拟三维结构比较等角度对各个供体进行了分析。结果表明 ,3种筛选方法的结果并不完全一致 ,但至少可以排除某些不适合的供体 ,进一步缩小选择范围。结论 :综合应用CREG、残基配型和三维结构比较方法 。
- 韩红星孔繁华奚永志孙玉英金荔刘楠郭斯启
- 关键词：造血干细胞移植供体选择
- 造血干细胞移植中供受体配型选择新标准──HLA分子模拟三维结构匹配被引量：3
- 2001年
- 为了确定人类白细胞抗原 (HLA)三维结构配型的标准 ,总结出主要的可允许错配和免疫原性错配等位基因 ,我们采用分子模拟技术模拟了HLA分子的三维结构 ,用计算机软件比较模拟结构间的差异大小。结果表明 ,HLA分子模拟结构间的差异不同 ,在大量统计分析基础上可以认为 ,HLA A和 B分子整体相对均方差 (relativemeansquaredeviation ,RMSD ,单位nm)大于 0 .0 4nm为差异显著 ,小于 0 .0 2nm为差异不显著 ;DRB1位点间RMSD大于 0 .0 2nm为差异显著 ,小于 0 .0 1nm为差异不显著 ,据此进一步总结了主要的可允许错配和免疫原性错配等位基因情况。本研究提示 ,HLA三维结构配型是移植配型领域的新观点 ,值得进一步深入研究。
- 韩红星孔繁华奚永志金荔刘楠屠敏郭斯启
- 关键词：造血干细胞移植人类白细胞抗原
- 细胞因子模拟肽/非肽刺激造血的研究进展被引量：7
- 2002年
- 能刺激造血的细胞因子如红细胞生成素 (EPO)和血小板生成素 (TPO)等通过与其受体的特异性结合来调控造血细胞的自我更新、增殖、分化、成熟及程序性死亡。近年来利用噬菌体展示文库等技术业已筛选出类似于细胞因子活性的模拟肽类和非肽类小分子 ,经体外和动物试验证实它们具有类似于细胞因子的刺激造血生物学功能。这为进一步探讨细胞因子的作用机制、筛选出理想的模拟其它细胞因子功能的小分子肽 /非肽类药物奠定了坚实基础。本文概述了模拟红细胞生成素和血小板生成素等细胞因子的肽类 /非肽类小分子的作用机理。
- 袁志宏奚永志孔繁华
- 关键词：细胞因子红细胞生成素血小板生成素
