孙宏丹
- 作品数:19 被引量:144H指数:6
- 供职机构:大连医科大学更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 反义hTERT对K562细胞端粒酶活性及细胞增生的影响被引量:1
- 2003年
- 目的 :观察反义 h TERT表达质粒转染 K5 6 2细胞后是否能够抑制端粒酶活性及K5 6 2细胞的增生。方法 :质粒的构建与转染 :将 2 90 bp h TERT c DNA片段 ,反向连接于 p L NCX- neo质粒上得到反义 h TERT基因表达质粒。在体外转染中通过脂质体法将质粒导入 K5 6 2细胞中 ,以G4 18进行筛选得到阳性克隆 ;以 MTT法和形态学法检测反义 h TERT表达质粒对 K5 6 2细胞增生的抑制作用 ;以 TRAP- PCR EL ISA法来研究反义 h TERT基因对 K5 6 2细胞的端粒酶活性的抑制作用。结果 :转染反义 h TERT表达质粒组与对照组 (空白对照及空质粒组 )相比较 ,生长速率明显变慢 ,部分细胞出现凋亡等形态学改变。反义 h TERT对 K5 6 2细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用。结论 :研究构建的端粒酶反义 h TERT基因表达质粒转染到 K5 6 2细胞中后 ,能够封闭 K5 6 2细胞h TERT- m RNA的表达 ,在抑制端粒酶活性的同时 ,减慢了 K5 6 2细胞的生长速度。
- 孟秀香张卓然孙宏丹赵心宇宋振岚赵瑾瑶
- 关键词:K562细胞反义HTERT端粒酶细胞增生细胞凋亡
- 蝎毒对人白血病细胞株的抑制作用被引量:11
- 2001年
- 目的 :采用 3种人白血病细胞株 (人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL - 6 0、人红白血病细胞株K5 6 2 )作为实验模型 ,观察东亚钳蝎毒对人白血病细胞的生长抑制作用。方法 :台盼蓝排染法细胞计数观察细胞生长、MTT法检测蝎毒对细胞的毒性、流式细胞术分析凋亡细胞。结果 :蝎毒对Raji、HL - 6 0、K5 6 2 3种人白血病细胞具有明显的细胞毒性和生长抑制作用 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,并且其作用强度在一定范围内呈现浓度和时间依赖性。结论
- 贾莉孙宏丹孟秀香宋振岚孔力
- 关键词:蝎毒人白血病细胞株抗肿瘤细胞毒性
- 反义hTERT在体外对HL-60细胞的抑制作用
- 目的:探讨反义hTERT表达质粒是否能够抑制HL-60细胞端粒酶活性及其增殖.方法:通过脂质体法将质粒导入HL-60细胞中;以MTT法和体外集落形成实验检测反义hTERT表达质粒对HL-60细胞增殖的抑制作用;以TRAP...
- 孟秀香刘丹丹赵心宇孙宏丹
- 关键词:反义HTERT端粒酶白血病基因治疗肿瘤细胞
- 文献传递
- 端粒酶反义hTERT的构建及其对K562细胞的作用被引量:10
- 2003年
- 目的 观察反义人类端粒酶逆转录酶 (humantelomerasereversetranscriptase ,hTERT)是否能够抑制端粒酶活性及K5 6 2细胞的增殖。方法 选择hTERT基因上游部分的起始密码子上下 2 90bp长度的核苷酸片段 ,设计引物并进行PCR扩增后 ,反向连接于pLNCX neo质粒上得到反义hTERT基因表达质粒。在体外转染中通过脂质体法将质粒导入K5 6 2细胞。以MTT法和体外集落形成实验检测反义hTERT表达质粒对K5 6 2细胞增殖的抑制作用 ;以TRAP PCRELISA法来研究反义hTERT基因对K5 6 2细胞的端粒酶活性的抑制作用。结果 ①转染反义hTERT表达质粒组与对照组 (空白对照及空质粒组 )相比较 ,生长速度明显变慢 ,集落形成能力明显下降 ,空白对照组K5 6 2细胞集落数为 ( 10 0 .33± 7.5 7) / 10 3 细胞 ,空质粒组K5 6 2neo细胞集落数为 ( 92 .6 7± 5 .86 ) / 10 3 细胞 ,转染反义质粒组HL 6 0as集落数为 ( 5 0 .33± 6 .11) / 10 3 细胞 (P <0 .0 1) ;②反义hTERT对K5 6 2细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用 ,K5 6 2neo细胞活性为 1.2 79± 0 .0 73 ,K5 6 2as为 0 .82 6± 0 .0 36 ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 该研究构建的端粒酶反义hTERT基因表达质粒转染到K5 6 2细胞中后 ,能够封闭K5 6 2细胞hTERTmRNA的表?
- 孟秀香苏本利贾莉孙宏丹张卓然
- 关键词:白血病K562细胞细胞增殖
- 大连地区耐甲氧西林葡萄球菌调查及药敏试验分析
- 1995年
- 大连地区耐甲氧西林葡萄球菌调查及药敏试验分析大连医科大学附属二院大连116023刘敏,王敏营口市中心医院国素华大连医科大学检验系孙宏丹葡萄球菌是最常见的化脓性球菌之一,是临床化脓性感染和医院内感染的主要病原菌,近年来,由于抗菌药物和激素的广泛应用,造...
- 刘敏王敏国素华孙宏丹
- 关键词:抗菌素葡萄球菌甲氧西林药敏试验
- 无根根霉脂肪酶的菌株筛选及产酶条件设置被引量:4
- 2001年
- 目的 :筛选产酶菌株并探讨其最佳产酶条件。结果 :其中的一株无根根霉 (RhizopusarrhizusFischer - 2 9)显示了最高的脂肪酶酶活力。它的最适产酶条件为培养基初始pH 7 0 ,鱼油加入量1% ,32℃。摇瓶发酵 4 8h ,最高发酵液酶活 34 98u/ml,在此条件下水解鱼油 ,可使其中的DHA、EPA的含量由原来的 10 %提高到 4 0 % ,是任何传统方法所无法比拟的 。
- 孙宏丹胡军姚民昌
- 关键词:微生物脂肪酶
- 微生物脂肪酶及其相关研究进展被引量:78
- 2001年
- 孙宏丹孟秀香贾莉宋振岚
- 关键词:脂肪酶固定化酯合成
- 无根根霉脂肪酶的酶学性质研究及酯合成的应用被引量:5
- 2001年
- 初步探讨了无根根霉脂肪酶 (RhizopusarrhizusFischerLipase)的酶学性质及酯合成应用。结果表明 :在不同表现形式下该酶具有不同的最适pH、pH稳定性、最适温度和热稳定性。当用胆盐处理发酵液 ,Tween - 80处理菌体细胞时发现该脂肪酶活力分别提高 3倍和 3 5倍。本文利用溶致液晶固定化的方法在有机介质中催化酯合成 ,固定化后该酶酯合成的反应速度比其游离态高 30倍以上。最适条件下 ,合成油酸 - 2 -辛基十二烷酯的能力达 5× 10 - 5mol·hr- 1·u- 1。
- 孙宏丹刘健杰姚民昌
- 关键词:微生物脂肪酶FISCHER酯合成
- 复方中药诱导Burkitt′s淋巴瘤Raji细胞凋亡作用的研究被引量:12
- 2002年
- 目的 :研究复方中药对 Burkitt′s淋巴瘤细胞株 Raji细胞的影响 ,并探讨其机制。方法 :采用 MTT法检测细胞毒作用 ,利用 Wright- Gimesa染色法 ,Hoechst 33342荧光染色等手段观察凋亡细胞的形态结构变化 ,应用透射电镜技术和流式细胞分光光度术进行凋亡定性定量观察 ,并探讨凋亡抑制基因 bcl- 2蛋白表达。结果 :复方中药对 Raji细胞具有明显的生长抑制作用。共同孵育一段时间后 ,细胞呈现典型的凋亡形态学变化。流式细胞仪分析表明复方中药能使 Raji细胞发生凋亡 ,凋亡率呈现对浓度和时间的依赖性 ,并发现复方中药使 Raji细胞 bcl- 2基因的表达下调。结论 :复方中药能诱导 Raji细胞发生凋亡 ,其作用机制与 bcl- 2基因表达的下调有关。
- 孙宏丹贾莉孟秀香宋振岚
- 关键词:中药细胞凋亡RAJI细胞BCL-2基因白血病
- 姜黄素对人类红白血病细胞(K_(562))的抑制及诱导分化作用被引量:5
- 1999年
- 用人类红白血病细胞(K562)为材料,通过细胞计数、MTT法测定,形态学观察、NBT还原试验及联苯胺反应等方法检测了不同浓度姜黄素对体外人K562细胞的作用。结果表明,姜黄素对K562细胞有明显的抑制作用,随浓度增加,抑制作用逐渐增强。形态学观察可见轻微诱导分化作用。鉴于姜黄素对人类红白血病细胞兼有轻微诱导分化和增殖抑制作用,提示姜黄素有可能应用于人类红白血病的治疗。
- 孟秀香宋振岚贾莉孙宏丹陈峰
- 关键词:姜黄素K562细胞细胞毒诱导分化