季俊杰 作品数:8 被引量:5 H指数:1 供职机构: 中国科学院微生物研究所 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 国家科技重大专项 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
非典型应答调控蛋白活性调控机制 2012年 双组分信号转导系统是生物中广泛存在的调控系统,通常由组氨酸激酶和应答调控蛋白(Responseregulator,RR)两个组分构成。典型的RR通过一个磷酸化机制调控活性。非典型应答调控蛋白在细菌中广泛存在,并调控细菌的生长发育、抗生素合成、Fe的转运等多种生理功能。以下主要综述目前研究比较清楚的非典型应答调控蛋白的结构和功能方面的进展,并以链霉菌中杰多霉素生物合成途径中的非典型应答调控蛋白JadR1为例,阐明调控蛋白活性调控的新机制。 彭晓静 季俊杰 张玉秀 杨克迁 张红梅 朱卉高浓度底物下青霉素扩环酶的活性评价与底物抑制现象 被引量:2 2015年 本文对青霉素扩环酶(Penicillin expandase,也称Deacetoxycephalosporin C synthase,DAOCS)在高浓度青霉素G下的底物抑制现象进行初步评价与表征,筛选适合工业应用条件的高活力突变体。我们通过HPLC对已报道的几个DAOCS高活力突变体在青霉素G浓度5.6至500 mmol/L间的比活力进行定量测定,并与不同催化反应动力学模型的理论推测变化趋势比较,发现DAOCS野生型酶及高活力突变体H4、H5、H6与H7在高浓度青霉素G条件下均表现出明显的底物抑制现象,但是变化趋势不同。野生型酶与突变体H4的比活力先上升后下降,与竞争性抑制模型预测不符。突变体H5、H6与H7的比活力变化呈现更复杂的变化趋势。在所有测试的突变体中,H6的活性显著高于其他突变体酶。青霉素G对野生型DAOCS的底物抑制现象符合非竞争性抑制模型的预测。而部分突变体表现出复杂的底物抑制行为,表明其具有更复杂的作用机制。在高底物浓度下筛选具有较强催化活性的青霉素扩环酶突变体对于推动其在工业生产中的应用具有重要指导作用。 伍林军 范可强 季俊杰 杨克迁芳香聚酮后修饰氧化酶 被引量:1 2010年 氧化酶在芳香聚酮生物合成后修饰中普遍存在并对终产物的结构产生关键影响。本文简要总结了芳香聚酮后修饰氧化酶中几类最常见的氧化酶的结构和功能,并以杰多霉素生物合成途径中的后修饰氧化酶为例,阐明这些氧化酶在后修饰反应中发生作用的方式。并对后修饰氧化酶在组合生物学中的应用做了展望。 季俊杰 范可强 彭晓静 田秀云 戴美学 杨克迁关键词:氧化酶 鉴别杰多霉素生物合成后修饰氧化酶JadH中参与底物结合或催化的关键残基 2012年 JadH是羟化脱水双功能酶,参与杰多霉素生物合成中的聚酮后修饰反应,将2,3-dehydro-UWM6催化为dehydrorabelomycin。为了分析杰多霉素生物合成途径中后修饰氧化酶JadH结合、催化底物的关键氨基酸,构建了JadH与底物复合物的三维结构模型。利用该模型并结合JadH同源蛋白氨基酸序列比对分析,推测出JadH活性中心中可能参与底物结合或催化的关键氨基酸(R50、G51、L52、G53、F100、R221、I223、P295和G298)。通过定点突变及体外酶学实验对这些位点的突变体的催化活性进行评价,结果显示这些突变株活性均显著低于野生型,表明这9个氨基酸是JadH参与底物结合或催化的关键氨基酸。 彭晓静 季俊杰 张霞 范可强 金玲 张玉秀 杨克迁关键词:定点突变 活性中心 头孢药物中间体合成关键酶—青霉素扩环酶的定向改造 我们利用基于结构信息学的定点突变,靶向突变以及迭代组合突变的策略对棒状链霉菌来源的青霉素扩环酶进行定向改造以提高其对非天然底物青霉素G的催化活性。其中,我们对十个与底物非直接相互作用的氨基酸残基(Y184,V245, S... 季俊杰关键词:棒状链霉菌 定点突变 定点突变改造棒状链霉菌青霉素扩环酶 2013年 利用定点突变技术对ScDAOCS进行改造,得到3个突变体Q166E、D28E、M73I,生物活性检测和比活力数据表明2个突变体D28E、M73I的催化活性提高,为7-ADCA的合成提供了技术支持。 季俊杰 张红梅关键词:定点突变 棒状链霉菌 青霉素扩环酶的定向改造 第一部分:青霉素扩环酶是实现酶法转化青霉素生产各种半合成头孢菌素的关键前体7-ADCA的关键酶。获得对青霉素G具有高催化能力的扩环酶突变体,是将其引入工业化生产需要解决的关键问题。本实验室利用定点突变和靶向突变的方法对来... 季俊杰关键词:动力学参数 文献传递 定向改造棒状链霉菌青霉素扩环酶的研究进展 被引量:1 2013年 青霉素扩环酶是实现酶法转化青霉素生产各种半合成头孢菌素的关键前体7-ADCA的关键酶。获得对青霉素G具有高催化能力的扩环酶突变体,是将其引入工业化生产需要解决的关键问题。目前利用非理性和理性的方法对改酶进行改造,取得了一些活性提高的突变株。本文对改造青霉素扩环酶的研究进展进行总结,并结合其自身的工作对改酶的进一步研究提供理论基础。 季俊杰关键词:棒状链霉菌