安琳
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
- 供职机构：北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 改变毕赤酵母信号肽对人三叶因子3表达的影响被引量：8
- 2002年
- 为了表达具有天然N 末端的人三叶因子 3,构建了含两种信号肽序列的毕赤酵母表达载体 ,其中一种表达载体在分泌信号肽序列α factor后保留STE13信号肽切割序列 ,另一种表达载体去除了该序列。将 2种表达载体分别转化到毕赤酵母GS115中进行表达。经甲醇诱导后目的蛋白分泌到发酵液上清中 ,SDS PAGE和Western印迹证明 2种重组蛋白均以二体的形式分泌表达 ,分子质量约为 13ku ,都能被TFF3抗体所识别。N 端氨基酸测序证明其中一个重组蛋白具有天然人TFF3的N端 ,质谱检测分子质量与天然蛋白一致 ;另一重组蛋白N 端则带有 2个未切割完全的信号肽序列GluAla ,质谱检测该蛋白中还含有部分切割完全的蛋白。
- 王艳茹安琳李令媛茹炳根
- 关键词：毕赤酵母信号肽三叶因子3甲醇酵母分泌
- 人三叶因子3在毕赤酵母中表达条件的研究被引量：7
- 2001年
- 为提高人三叶因子 3 (HumanTrefoilfactor 3 ,hTFF3 )在毕赤酵母中的表达量 ,研究了转化子生长的培养条件 ,包括不同碳源对转化子生长的影响和接种量、甲醇浓度、pH值、摇瓶转速及不同诱导时间对人三叶因子 3表达的影响。结果表明转化子在生长阶段加入葡萄糖生长旺盛 ,培养 14h后OD6 0 0 就可达到 5 0。在 10 0mL生长培养基上的菌液以 1∶1接入诱导培养基时蛋白表达量最高 ;转化子在 1%的甲醇、pH6 0、摇瓶转速 2 4 0r min的条件下诱导4 8h ,菌体密度OD6 0 0 为 15 ,目的蛋白表达量达到 2 0mg L。用 5L发酵罐进行了高密度发酵 ,经 2 %甲醇 3 2h诱导 ,最终菌体密度OD6 0 0 达到 12 0 ,每升发酵液中含目的蛋白 10 0mg。
- 王艳茹方敏安琳李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子3毕赤酵母发酵
- 重组人三叶因子3对细胞的增殖及迁移的影响被引量：3
- 2002年
- 将重组人三叶因子 3(Trefoilfactor 3,TFF3)作用于人结肠肿瘤细胞 ,研究重组蛋白对细胞增殖的影响 ,结果发现该蛋白在较低的浓度 (10～ 5 0mg L)下对细胞的增殖基本没有影响 ,在 10 0～2 0 0mg L浓度下该蛋白对细胞仅有微弱的刺激作用 ,提高浓度对细胞增殖作用没有改变。同时研究了TFF3对损伤的单层结肠肿瘤细胞迁移的影响 。
- 王艳茹方敏安琳乔玮李令媛茹炳根
- 关键词：三叶因子3增殖迁移
