宋明宇
- 作品数：12 被引量：29H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三磷酸腺苷促进骨髓间充质干细胞成骨分化的机制被引量：3
- 2015年
- 目的探讨三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)对骨髓间充质干细胞增生和向成骨分化的影响及初步机制。方法体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞,分对照组和ATP作用组,加入一定浓度的ATP(600、300、150μmol)。用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和real time PCR法检测多个成骨指标mRNA的表达,对硝基苯磷酸盐(ρ-nitrophenylphosphate,PNPP)法检测碱性磷酸酶的表达,Von kossa法检测钙结节的形成。结果 ATP组碱性磷酸酶活性升高(P<0.05),多个成骨指标如BMP2、BSP、DLX等表达升高(P<0.05),ATP组钙结节数量明显多于对照组。在加入P2X7受体抑制剂后,ATP促成骨指标BMP2、BSP、DLX等的表达有所减弱(P<0.05)。结论一定浓度的ATP促进骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶的表达、多个成骨指标的表达、钙结节的形成,以及促进骨髓间充质干细胞向成骨分化,并受P2X7受体的影响。
- 杨勇李文凯宋明宇吴华
- 关键词：三磷酸腺苷骨髓间充质干细胞成骨分化
- 肠道菌群改变与肝纤维化相互作用的研究进展被引量：6
- 2014年
- 正常的肠道菌群对维持人体的健康起着重要的作用.当机体内外环境发生变化,产生肠道菌群失调时,会引起或加重机体多种疾病,特别是肝脏疾病.相反,肝纤维化发生时也可以引起或加重肠道菌群失调.机体肠道菌群的状况与肝纤维化进程关系密切、相互影响.本文主要探讨二者的关系,为临床提供新的治疗思路.
- 王蓉宋明宇李学文杜鹏杨玲
- 关键词：肠道菌群肝纤维化
- 正弦电磁场对高糖环境下大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨正弦电磁场对高糖环境下大鼠BMSCs分化的影响,并探讨其中可能的分子机制。方法贴壁筛选法分离、培养大鼠BMSCs,将第三代细胞分为暴磁组、高糖组、高糖暴磁组及对照组。高糖组采用高糖培养基(葡萄糖浓度为15 mmol/L),电磁场组每天给予1 mT、50 Hz正弦电磁场刺激2 h。刺激21 d后采用茜素红染色、油红O染色观察各组在成骨和成脂分化上的差异,刺激7 d后Real-time PCR检测成骨/成脂相关基因Runx2、ALP、Id4、PPARγ、aP2的表达变化。结果暴磁组钙结节形成能力较对照组增强、成骨相关基因表达增高,高糖组形成脂滴能力增强、成脂相关基因表达增高,高糖暴磁组成骨和成脂基因表达均有增高,但前者更为明显。结论正弦电磁场对高糖环境下的大鼠骨髓间充质干细胞有促进成骨、间接抑制成脂分化的作用,其机制可能与通过上调关键分子Id4有关。
- 刘阳杨勇虞冀哲宫晨徐飞宋明宇吴华
- 关键词：电磁场骨髓祖代细胞高糖细胞分化
- 雷帕霉素与低频电磁场联合应用对大鼠骨髓间充质干细胞成骨效应的影响
- 2013年
- 目的观察雷帕霉素与低频电磁场联合运用对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨效应的影响。方法选取成年SD大鼠15只，采用体外分离法培养大鼠BMSCs，传代3次后接种至细胞培养板中，将其分为对照组、雷帕霉素组、电磁场刺激组和联合应用组。对照组应用达尔伯改良伊格尔培养基（DMEM）进行培养；雷帕霉素组在DMEM中加入浓度为5nM的雷帕霉素；电磁场刺激组则在DMEM基础上给予频率为15Hz、强度为1mT的脉冲电磁场刺激；联合应用组在加入浓度为5nM雷帕霉素的DMEM基础上给予频率为15Hz、强度为1mT，每天1h的脉冲电磁场刺激。分别于干预后7d、14d和21d，提取细胞的总RNA和总蛋白，采用茜素红染色后置于显微镜下观察，分析比较不同时间点各组的成骨效应。
- 易智谦宋明宇虞冀哲刘阳韦盛杨勇李峰吴华
- 关键词：雷帕霉素电磁场
- 地塞米松对骨髓间充质细胞增殖及成骨、成脂分化的效应被引量：6
- 2017年
- 目的探讨不同浓度地塞米松(dexamethasone,DEX)作用不同时间对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖及成骨、成脂分化的影响。方法体外分离培养大鼠BMSCs,将状态良好的第三代细胞接种于96孔板中,随机分组为对照组(不加入DEX)及不同浓度(1 nmol/L、10 nmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)DEX作用组,培养1、3、5、7、9 d后,分别用细胞增殖检测(CCK-8)法检测细胞增殖状况。将BMSCs接种于6孔板中,随机分为对照组及不同浓度(1 nmol/L、10 nmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L)DEX作用组,培养7、14 d后分别用荧光定量PCR方法检测成骨、成脂相关基因的表达,培养14 d后用Western blot检测成骨、成脂相关蛋白的表达。培养5 d后进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,培养14 d后进行油红"O"染色、茜素红染色。结果较低浓度的DEX促进BMSCs增殖,而较高浓度DEX抑制BMSCs增殖。干预早期,较低浓度的DEX促进BMSCs成骨分化而高浓度DEX抑制其成骨分化;干预晚期,各浓度DEX均促进BMSCs成骨指标的表达,但是不能诱导BMSCs钙质沉积。DEX浓度依赖性地促进BMSCs成脂相关指标基因和蛋白的表达,并诱导BMSCs细胞内脂质沉积。结论 DEX可直接影响BMSCs增殖及向成骨、成脂方向分化,这种效应存在浓度和干预时间依赖性。
- 宋明宇王蓉杨勇吴华
- 关键词：地塞米松间充质干细胞分化
- 50Hz正弦电磁场对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨50Hz、1．0mT正弦电磁场对骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响。方法将骨肉瘤MG-63细胞分成对照组和实验组，对照组放在无电磁场的培养箱中，实验组放入含有50Hz、1．0mT正弦电磁场的培养箱中，分别在第2天、第4天和第6天采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖活性，流式细胞仪测定细胞周期，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测cyclin B1和cyclin D1的mRNA表达水平变化。结果2组比较，实验组细胞增殖活性明显降低、G0-G1期细胞数目增多、cyclin B1和cyclin D1的mRNA表达水平下降。结论50Hz、1．0mT正弦电磁场能够显著抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖。
- 尚林刘阳宋明宇虞冀哲吴华
- 关键词：正弦电磁场骨肉瘤细胞增殖细胞周期
- 周期性单轴牵张应力对大鼠前软骨干细胞相关增殖基因的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察周期性单轴牵张应力对大鼠前软骨干细胞增殖相关基因的影响。方法采用四点弯曲应力仪分别以2 000μstrain和4 000μstrain的牵张力刺激前软骨干细胞1 h,并设空白对照组,荧光定量PCR检测相关增殖基因PCNA和Cyclin D1的表达情况,并用免疫荧光检测力学激前后Ki67阳性细胞的表达情况。结果 2 000μstrain刺激组细胞表达PCNA以及CyclinD1较对照组高(P<0.05),免疫荧光检测提示2 000μstrain刺激组的细胞核内Ki67表达较对照组明显增多;而4 000μstrain刺激组细胞PCNA的表达与对照组相比明显降低(P<0.05),而Cyclin D1降低不明显(P>0.05)。结论适宜的周期性单轴牵张力能引起大鼠前软骨干细胞相关增殖基因的表达增加。
- 杨开祥吴颖星宋明宇程鹏郭风劲
- 关键词：软骨细胞干细胞
- 探讨电磁场影响骨髓间充质干细胞增殖分化的时间依赖性被引量：1
- 2012年
- 目的探究正弦波电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨方向分化、促进其增殖的时间依赖性。方法用差速贴壁法分离培养(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs),取用生长状态良好的第三代细胞进行实验。将细胞按照1×105个/孔接种于3.5 cm细胞培养皿中。将细胞培养皿按照完全随机分组的原则分为实验组与对照组,每组分别设有1 d组、4 d组、7 d组、10 d组、14 d组共五个亚组。将实验组置于15 Hz 1 mT正弦波电磁场中每天暴磁1 h,对照组在同条件无磁场的细胞培养箱中培养。暴磁结束后提取各组细胞总RNA,用荧光定量PCR方法检测比较各组中成骨指标:RUNX2、碱性磷酸酶(ALP)、骨唾液酸蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)基因相对表达量的变化趋势。另有一批细胞按照1×103个/孔接种于96孔细胞培养板中,每块细胞培养板设7个副孔,共接种10块细胞培养板。按照完全随机分组原则,随机分组为实验组与对照组,每组分别设有1 d组、4 d组、7 d组、10 d组、14 d组共五个亚组。将实验组置于15 Hz 1mT正弦波电磁场中每天暴磁1 h,对照组在同条件无磁场的细胞培养箱中培养。用CCK8法检测比较各组细胞增殖情况。结果电磁场作用骨髓间充质干细胞的早期阶段(1 d、4 d)可以诱导其向成骨方向分化,而在其作用的晚期阶段则抑制其进一步成骨方向分化;相应的电磁场作用初期抑制大鼠骨髓间充质干细胞增殖,电磁场作用后期可促进其增殖,尤其在7 d、10 d时效应明显。结论电磁场可以影响大鼠骨髓间充质干细胞增殖和成骨方向分化,并且这种影响具有时间依赖效应。
- 宋明宇李峰杨勇虞冀哲易智谦刘阳吴华
- 关键词：电磁场成骨
- 低频电磁场干预大鼠骨髓间充质干细胞体外成软骨分化的研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨在体外条件下低频电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的可行性。方法 大鼠骨髓间充质干细胞传代至第5代后,采用微团培养法在含成纤维生长因子-2和转化生长因子-β的培养基中生长,并给予正弦波电磁场（1.0 mT,50 Hz）干预。3周后进行阿利新蓝染色以检测软骨基质生成量,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测软骨特异性蛋白的基因表达水平,并使用二甲基-亚甲蓝（DMMB）染料结合法评估细胞微团中糖胺多糖水平。结果在电磁场和生长因子的协同作用下,大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）细胞微团向软骨分化,细胞微团中Ⅱ型、X型胶原及蛋白多糖基因表达水平显著增加,而性别决定区Y框蛋白9（SOX9）的表达没有明显变化。与非暴磁组比较,暴磁组细胞糖胺多糖（GAG）/DNA比例较高（3.108±0.341）。结论电磁场促进大鼠BMSCs成软骨分化可能与细胞表达Ⅱ、X型胶原及糖胺多糖增多有关。电磁场在生长因子的协同作用下可诱导及维持间充质干细胞成软骨分化,但单因素电磁场刺激不能诱导大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化。
- 虞冀哲杨勇刘朝旭宋明宇刘阳吴华
- 关键词：电磁场间充质干细胞微团培养成软骨分化
- 不同作用时间下正弦波电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的效应被引量：4
- 2012年
- 目的探究15Hz正弦波电磁场体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨方向分化的最佳时间窗。方法体外分离培养SD大鼠BMSCs，将长势良好的第三代细胞，按照1×10^5个／孔接种细胞于3．5cm细胞培养皿中，接种后第2天将所有培养皿编号。按随机数字表法随机分为对照组和暴磁组，再按暴磁总天数分为A组（7d）、B组（14d）、C组（28d），A组包括A0组（对照组）、A1组（暴磁每日1h）、A2组（暴磁每日4h）、A3组（暴磁每日8h）；B组包括B0组（对照组）、B1组（暴磁每日1h）、B2组（暴磁每日4h）、B3组（暴磁每日8h）；C组包括C0组（对照组）、C1组（暴磁每日1h）、C2组（暴磁每日4h）、C3组（暴磁每日8h）。每批次细胞取自同一只老鼠，暴磁组置于15Hz1mT正弦波电磁场中暴磁。用荧光定量PCR方法检测各组Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨唾液酸蛋白（BSP）、骨桥蛋白（OPN）基因表达量的变化；用茜素红染色方法比较各组钙结节分布；用蛋白印迹法（Westernblot）检测比较各组RUNX2蛋白量的变化。结果15Hz正弦波电磁场刺激7d可以体外诱导大鼠BMSCs向成骨方向分化，以A，组的效应最为明显，并且以早期成骨指标RUNX2的效应最为突出；磁场刺激14d后，则以B．组效用明显，并且以晚期成骨指标OPN的效应明显。WesternBlot比较各组RUNX2蛋白量的变化，趋势相近。电磁场刺激14d和28d后，以B1组和C1组的钙结节量最多。结论15Hz正弦波电磁场诱导BMSCs成骨分化有明显的时间窗口效应；随着暴磁天数的增加．每天短时间（1h）暴磁即可达到较好的诱导效果。
- 宋明宇杨勇虞冀哲易智谦徐西强尚林刘阳吴华
- 关键词：电磁场骨髓间充质干细胞成骨分化
