岳莉莉
- 作品数:10 被引量:79H指数:5
- 供职机构:武汉大学生命科学学院病毒学研究所更多>>
- 发文基金:世界银行贷款项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统高效表达绿色荧光蛋白标记的HBVe抗原被引量:20
- 1998年
- 通过基因工程操作,使乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)基因与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合,用新型Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中高效表达了HBeAg-GFP双功能融合蛋白。经ELISA法和荧光显微镜观察证实,表达产物既能发射易于检测的绿色荧光,又具有HBV的e抗原活性。
- 岳莉莉齐义鹏杜全胜李燕
- 关键词:GFP基因
- 截短和融合的绿色荧光蛋白的表达及其荧光特性被引量:9
- 1998年
- 水母Aequoreavictoria的绿色荧光蛋白 (GFP)是一种能发射强烈荧光的特殊蛋白质 ,其荧光的产生是由于内部第 6 5~ 6 7位的Ser Tyr Gly自身环化和氧化形成生色基团的缘故 .Ser6 5→Thr(简称S6 5T)突变型的荧光强度较野生型GFP高出6倍 ,并且其激发波更长 ,肉眼可见发出的强烈荧光 .将 gfpS65T基因从 3′端截短 36bp ,不影响GFPS65T的荧光特性 ,但当截短到 2 2 5bp时 ,几乎失去了荧光特性 .将HBVe抗原基因与突变型 gfpS65TP融合 ,发现其激发光谱又回复到野生型状态 .虽然其荧光强度与 gfpS65T相似 ,但发射波谱变宽且肉眼不能观察 .若将表达这种融合蛋白的菌落在低温下存放数日 ,则又恢复了它肉眼可见的绿色荧光 .以上结果说明GFP的发光机制除与生色基团有关外 ,也与GFP分子的构象完整性和分子内微环境有关 ,野生型GFP与HCVCore抗原的融合也证实了这一点 .
- 岳莉莉齐义鹏胡建红邓小昭
- 关键词:荧光特性绿色荧光蛋白融合蛋白
- 肝炎病毒双功能蛋白与新型发光试剂的研究
- 岳莉莉
- 关键词:绿色荧光蛋白融合蛋白克隆表达免疫诊断试剂
- 发光蛋白基因载体的构建与发光基因免疫诊断试剂
- 本发明采用基因工程手段,将绿色荧光蛋白(GFP)基因与人肝炎病毒基因融合,形成表达载体pGC-220和pS65TP-He,并在大肠杆菌中表达。两类表达蛋白质均可发射绿色荧光,pGC-220质粒表达蛋白质具有人丙型肝炎病毒...
- 齐义鹏黄永秀岳莉莉邓元卉吕利群王业富李晓锋林宏肖庚富
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白与 HCV 核心蛋白的融合及在大肠杆菌中的高效表达被引量:7
- 1997年
- 利用基因工程重组技术获得了绿色荧光蛋白(gfp)基因与HCV核心蛋白(core)基因的嵌合体,并在大肠杆菌中高效表达了48kDa的融合蛋白,经DotELISA和Westernblot免疫活性分析证实,融合蛋白仍具有core抗原的三个免疫活性部位,同时用荧光显微镜观察并用荧光光度计测定了大肠杆菌表达的融合蛋白的荧光光谱,结果证实,我们在大肠杆菌中表达的GFPcore融合蛋白既能发射易于检测的绿色荧光,又具有HCV核心蛋白的抗原活性,实现了用绿色荧光蛋白等分子标记抗原,为免疫诊断新方法的建立,打下了理论基础。
- 岳莉莉齐义鹏林宏苏霏邓小昭
- 关键词:丙型肝炎病毒核心蛋白绿色荧光蛋白融合蛋白
- 绿色荧光蛋白——现代细胞生物学与分子生物学研究领域的新标记物被引量:33
- 1997年
- 从多管水母属Aequorenvicturia分离出的绿色荧光蛋白(GFP),因其特有的生物化学性质及该基因在异源细胞内的表达产物亦能产生强烈的绿色荧光,使其在现代细胞生物学和分子生物学研究领域的应用具有广阔前景。
- 岳莉莉齐义鹏
- 关键词:多管水母绿色荧光蛋白细胞生物学分子生物学
- ELISA法以单一单克隆抗-HBe测定e系统的研究被引量:2
- 1996年
- 制备了一株HBe单抗细胞株,同时用于包被和酶标,以ELISA法测定e抗原及病人血清中抗-HBe获得成功.
- 刘永平刘子夜赵伟光岳莉莉黄永秀齐义鹏
- 关键词:HBEAGELISA法乙型肝炎
- 乙型肝炎病毒e抗原基因与绿色荧光蛋白基因的融合及其表达被引量:9
- 1997年
- 质粒pS65T含有T7启动子驱动的绿色荧光蛋白突变型gfpS65T基因,经修饰后,在其中插入乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)基因,使两基因同框成为融合基因。在大肠杆菌BL21中由于T7启动子的控制,高效表达了具有双功能(抗原性和发光性)的融合蛋白(GFP-HBeAg)。融合蛋白MW为52kDa,N端有6个组氨酸残基,因而用Ni金属螯合层析柱对融合蛋白进行了分离纯化,利用诊断HBV的ELISA试剂盒检测了融合蛋白的抗原性,在荧光显微镜下观察到了融合蛋白的绿色荧光。并探讨了用其组装成新型免疫诊断试剂的可能性。
- 岳莉莉齐义鹏邓岩卉吕利群邓小昭
- 关键词:乙型肝炎病毒绿色荧光蛋白基因
- 新型报导基因及绿色荧光蛋白发光特性的研究被引量:2
- 1998年
- 绿色荧光蛋白基因 (gfp)是一个极有潜力的新型报导基因。本文将突变型 gfp3′末端不同程度地截短 ,构建成表达载体 ,在大肠杆菌 BL 2 1中表达了不同长度的绿色荧光蛋白 (GFP) ,当其生色基因中 65位 Ser点突变成 Thr,则 GFP的激发波由 396nm增至 4 70 nm,不用 UV激发 ,仅在自然光源下就可看到强烈的绿色荧光 ,发光强度增加 6倍 ,若从 3′端截短 12个氨基酸密码 ,对发光无影响 ,但截短 75个氨基酸密码 ,则激发波长降到 360 nm,发光强度减少 12倍。实验证明GFP的发光机制 ,除与 65到 67位的三个氨基酸组成的生色基因有关外 ,与蛋白质分子的完整性 。
- 邓小昭岳莉莉刁振宇张林元李光富
- 关键词:绿色荧光蛋白基因表达大肠杆菌
- 丙型肝炎病毒基因组多样性的分子基础及临床意义被引量:5
- 1997年
- 丙型肝炎病毒(HCV)是一种有包膜的单股正链RNA病毒,其编码的前体多聚大蛋白可加工成具有不同功能的结构蛋白和非结构蛋白。研究结果表明,HCV核酸序列的变异很大,因此存在许多不同的基因型和亚型。了解HCV基因组多样性的分子基础,对HCV的病原学、流行病学、诊断和治疗都具有重要的指导意义。
- 岳莉莉齐义鹏
- 关键词:丙型肝炎病毒基因组多样性分子基础