张华刚
- 作品数：11 被引量：21H指数：3
- 供职机构：北京大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用肿瘤抗原肽对肝癌患者进行免疫治疗的临床前研究及可行性分析
- 张华刚
- 关键词：肝癌肿瘤转移免疫疗法肿瘤抗原
- CD28协同刺激分子对T细胞受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响被引量：4
- 2003年
- 目的:分析anti-TCRαβ mAb、anti-TCRαβ mAb+anti-CD28mAb诱导小鼠胸腺淋巴细胞不同亚群的凋亡及凋亡程度,分析CD28协同刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡 的影响。方法:新鲜分离胸腺细胞,加入anti-TCRαβ mAb、anti-TCRαβ mAb+anti-CD28 mAb等培养20 h,进行多重染色,流式细胞仪分析。结果:与胸腺细胞自发凋亡的结果相比较:①双信号刺激可明显增加胸腺细胞凋亡的数目,尤其是CD4+ CD8+胸腺细胞的凋亡数目。②凋亡的CD4+ CD8+亚群、CD4+ CD8-亚群细胞表面CD28的表达均增多。结论:CD28共刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响与细胞的成熟程度有关。CD28共刺激分子能明显增强不成熟皮质胸腺细胞的凋亡。
- 李红梅张华刚王宏程钱晓萍陈慰峰孔宪涛
- 关键词：细胞凋亡
- HLA-A2限制性NY-ESO-1b肽段诱导的CD8^+T细胞对稳定表达NY-ESO-1的HepG2肝癌细胞系的杀伤效应
- 2005年
- 目的分析体外诱导的NY-ESO-1特异性杀伤性T淋巴细胞对稳定表达NY-ESO-1蛋白的肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞系的杀伤效应,为进一步分析NY-ESO-1蛋白作为疫苗用于治疗HCC的可能性提供实验支持。方法从HLA-A2阳性的肝癌患者体内分离出外周血单个核细胞,用NY-ESO-1肽段体外诱导特异性杀伤性T淋巴细胞,并通过酶联免疫斑点法分析特异性杀伤性T淋巴细胞对稳定表达NY-ESO-1蛋白的HCC细胞系HepG2细胞的杀伤效应。结果转染了NY-ESO-1的HepG2细胞(HLA-A2+)可有效地被NY-ESO-1157-165抗原肽诱导的特异性CD8+T淋巴细胞所识别。效应细胞中大量GrB的释放表明其对稳定转染了NY-ESO-1基因的HepG2细胞有很强的杀伤作用。结论HepG2细胞中表达的NY-ESO-1蛋白可被此肝癌细胞有效地加工处理,而且HLA-A2限制性的抗原肽NY-ESO-1157-165也可被有效地提呈到细胞表面,从而被效应T细胞所识别。
- 乔欢钱晓萍张华刚田婵陈慰峰
- 关键词：酶联免疫吸附测定
- 肝细胞癌肿瘤微环境的免疫抑制因素
- 目前已有很多关于肿瘤微环境免疫抑制因素的报道。为了研究肝细胞癌肿瘤局部的免疫状态,我们从新鲜的肿瘤及癌旁组织用酶消化的方法分离出肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)和癌旁浸润淋巴细胞(NIL)。与NIL相比,TIL中CD4T细胞增...
- 庞艳莉张华刚张毓陈慰峰
- 文献传递
- A11.肝癌患者CD8+T淋巴细胞对NY-ESO-1和MAGE-A3抗原肽的免疫应答
- 迄今为止,人们已经发现大量的癌/睾丸抗原(Cancer/testisantigen,CT抗原),包括MAGE、BAGE、GAGE、LAGE及NY-ESO-1等一系列抗原家族.它们仅在癌组织和睾丸、胎盘中表达,而正常组织一...
- 陈红松张华刚彭吉润商晓英梅铭惠冷希圣魏来陈慰峰
- 关键词：肝癌抗原肽免疫应答
- 文献传递
- 用酶联免疫斑点法检测肝癌患者抗原特异性免疫应答能力被引量：4
- 2001年
- 目的 研究HLA A2阳性肝细胞癌 (HCC)患者及正常人外周血CD8+T细胞对流感病毒抗原肽 (Flup58 66)的免疫应答能力。方法 用免疫磁珠法分离出HCC患者与正常人外周血CD8+T细胞 ,以照射后自体CD8- 外周血单个核细胞 (PBMC)或树突状细胞 (DC)作为抗原提呈细胞 (APC) ,加载Flu抗原肽 ,经 7d培养诱导 ,用酶联免疫斑点 (ELISPOT)法检测诱导后产生γ干扰素的效应CD8+T细胞频数。结果 当效应细胞为 5× 1 0 4个 /孔时 ,CD8- PBMC作为APC ,Flu抗原肽特异的CD8+T细胞频数在HCC患者组 (n =8)为 2 2个± 9个 /孔 ,正常人组 (n =1 2 )为 59个± 2 7个 /孔 ,两组间差异有非常显著意义 (P <0 0 1 ) ,但均为阳性应答 ;在 5名正常人 ,Flu抗原特异的CD8+T细胞频数以DC为APC时高于以CD8- PBMC为APC时 (P <0 0 5)。结论 HCC患者对Flup58 66的免疫应答程度虽较正常人低 ,但大多数中晚期HCC患者仍然具有对抗原肽产生特异免疫应答的能力。
- 庞学雯商小英吕建峰彭吉润张华刚冷希圣陈慰峰
- 关键词：肝细胞癌抗原
- 酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答试验条件的优化被引量：2
- 2002年
- 目的 探讨影响酶联免疫斑点 (ELISPOT)实验特异性及敏感性的因素 ,优化酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的实验条件。方法 HLA A2阳性正常人的外周血单个核细胞在体外经流感病毒抗原肽诱导 1周后 ,观察不同实验条件对酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的影响。结果 CTL诱导时 ,效应细胞先分离出CD8+ T细胞组获得的Flu抗原特异的细胞频数要高于CTL诱导后再分离出CD8+ T细胞组 (P <0 .0 5 ) ;自体DC(树突状细胞 )作APC(抗原提呈细胞 )比自体CD8- PBMC作APC ,CTL的诱导效率高且特异 (P <0 .0 5 ) ;使用细胞因子组合 (IL 7+IL 2 +IL 6 )优于单纯使用IL 2。CTL行ELISPOT检测时 ,T2 2细胞较T2 1细胞具有更强抗原提呈功能 ,增加Flu抗原特异的CD8+ T细胞频数 (P <0 .0 5 )。结论 优化了酶联免疫斑点法检测抗原特异的CTL免疫应答的试验条件 。
- 商小英庞学雯张华刚陈慰峰
- 关键词：酶联免疫斑点法抗原免疫应答
- 对肝癌患者组织中自然呈递的MAGE-3表位进行鉴定和定量分析被引量：3
- 2005年
- 目的尝试利用质谱技术对肝癌细胞表面自然呈递的MAGE3表位进行检测和分析。方法肝癌细胞和肝细胞取自同1名男性肝癌患者,弱酸洗涤法分离肝癌细胞和癌旁无瘤肝细胞表面所有肽段;利用表位预测法挑选出HLAA2限制的MAGE3理论侯选肽;检测MAGE3mRNA的表达;肽混合物进行高压液相纯化分离和差异比较;筛选出含有肿瘤特异肽的组分进行串联质谱检定和定量分析;最后检测患者体内是否有针对该表位的T细胞反应。结果MAGE3在肝癌细胞样品中表达阳性,在肝细胞中阴性;随后从肝癌细胞样品中检测出自然呈递的MAGE3271279表位抗原肽FLWGPRALV(3839拷贝/细胞),并从患者外周血中检测出针对该表位的特异性T细胞反应。结论本实验从肿瘤组织中检测出自然呈递的MAGE3271279表位,并揭示了该表位的潜在应用价值,同时也初步展示了质谱在肿瘤相关表位检测中快捷、准确的特点,而这些特点对于肿瘤相关表位的鉴定和肽疫苗的设计是非常重要的。
- 周迈彭吉润张华刚钟朝辉郭晏同冷希圣
- 关键词：肝癌肿瘤组织肽疫苗
- 肝癌患者CD8+T淋巴细胞对NY-ESO-1和MAGE-A3抗原肽的免疫应答
- 迄今为止,人们已经发现大量的癌／睾丸抗原(Cancer／testis antigen,CT抗原),包括MAGE、BAGE、 GAGE、LAGE及NY-ESO-1等一系列抗原家族。它们仅在癌组织和睾丸、胎盘中表达,而正常组...
- 陈红松张华刚彭吉润商晓英梅铭惠冷希圣魏来陈慰峰
- 文献传递
- NY-ESO-1和MAGE-A3抗原肽诱导肝癌患者的免疫应答研究被引量：7
- 2006年
- 目的利用合成的HLA-A02限制性NY-ESO-1p157-165或MAGE-A3p271-279抗原肽,体外通过抗原递呈细胞诱导HCC患者外周血T淋巴细胞,从而成功诱导出特异性CD8+T淋巴细胞免疫应答。方法通过SSP方法筛选20例HLA-A*02的HCC患者的HLA亚型;通过逆转录多聚酶链反应和测序分析NY-ESO-1和MAGE-A3在肝癌组织中的表达以及多肽表位密集区的核苷酸变异状况;体外用细胞因子培养HCC患者外周血来源的树突状细胞(DC);人工合成HLA-A*02限制性NY-ESO-1p157-165或MAGE-A3p271-279多肽,直接或用去除CD8+T淋巴细胞的PBMC或DC递呈,体外同T淋巴细胞孵育16d后,利用Elispot、细胞内细胞因子染色和四聚体实验检测T细胞免疫应答。结果20例HLA-A*02患者中,NY-ESO-1mRNA阳性患者为11例,MAGE-A3mRNA阳性患者12例。中国HCC患者表达的NY-ESO-1和MAGE-A3序列高度保守。经多肽直接或用去除CD8+T淋巴细胞的PBMC或DC递呈,体外活化外周血T淋巴细胞,4例(36.4%)NY-ESO-1阳性HCC患者以及4例(33.3%)MAGE-A3患者产生针对多肽特异性的CD8+T细胞免疫应答。不同HLA-A*02亚型HCC患者可产生针对NY-ESO-1p157-165或MAGE-A3p271-279抗原肽的免疫应答。结论NY-ESO-1p157-165或MAGE-A3p271-279抗原肽可以诱导出针对抗原肽的特异性CD8+T淋巴细胞免疫应答。提示HLA-A*02限制性的NY-ESO-1p157-165或MAGE-A3p271-279抗原肽可以作为有潜力的肝癌免疫治疗疫苗。
- 陈红松张华刚梅铭惠费然丛旭覃理灵魏来陈慰峰
- 关键词：MAGE-A3免疫应答
