张守涛
- 作品数：53 被引量：87H指数：6
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省高等教育教学改革研究项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- HIV-1 gagpol病毒样颗粒疫苗免疫小鼠的实验研究
- 2009年
- 目的:为构建含中国流行株HIV-1核心蛋白(gag、pol)基因的病毒样颗粒疫苗(VLP疫苗),并评价其诱导的体液和细胞免疫反应效果。方法:将重组质粒pcDNA3.1/gagpol稳定转染HEK293细胞,上清液经蔗糖垫层超速离心纯化后,用收获的VLP疫苗免疫小鼠,通过ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ,通过乳酸脱氢酶(LDH)实验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果:VLP疫苗免疫组小鼠血清的抗HIV-1 gp160抗体滴度和IFN-γ均升高(P<0.01),其特异性CTL活性均高于PBS对照组(P<0.01)。结论:构建的VLP疫苗免疫小鼠可以诱导特异性体液和细胞免疫应答,为进一步研制HIV治疗性疫苗奠定基础。
- 张一折唐保宏张守涛刘国祥
- 关键词：HIV-1核心蛋白免疫
- 一种抗人ACE2蛋白单克隆抗体、核酸分子及应用
- 本发明属于单克隆抗体领域，具体涉及一种抗人ACE2蛋白单克隆抗体、核酸分子及应用。本发明的抗人ACE2蛋白单克隆抗体能够通过与人ACE2分子特异结合，阻断人ACE2与SARS‑CoV‑2 RBD的结合，从而使利用ACE2...
- 张改平王爱萍丁培阳刘红亮丁梦浩张守涛陈玉梅朱习芳梁超周景明祁艳华牛艳
- 蛇毒纤溶酶Alfimeprase在大肠杆菌中的可溶表达和纯化被引量：12
- 2006年
- Alfimeprase是Fibrolase的突变体,是一种蛇毒纤溶酶,有纤溶活性而无出血性。根据Alfimeprase的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用PCR的方法合成AlfimepraseDNA序列,分别融合在NusA和MBP的C端,与分子伴侣FkpA在大肠杆菌OrigamiB(DE3)中共表达,融合蛋白NusA/Alfimeprase以部分可溶的形式存在,可溶部分占上清总蛋白的25%左右,通过镍柱亲合层析纯化和肠激酶切割得到具有纤溶活性的重组蛋白Alfimeprase。首次报道在大肠杆菌中可溶表达Alfimeprase,为以后深入研究其功能及应用奠定了基础。
- 张守涛周雁胜赖学华包星峰郭蔼光
- 关键词：蛇毒纤溶酶分子伴侣可溶性表达纯化
- 抗非洲猪瘟病毒CD2v蛋白单克隆抗体、制备方法及应用
- 本发明公开了抗非洲猪瘟病毒CD2v蛋白单克隆抗体、制备方法及应用，属于基因工程技术领域。所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述轻链可变区如SEQ ID NO：...
- 王爱萍牛艳杨伟如陈玉梅周景明张守涛刘燕凯刘红亮丁培阳祁艳华梁超朱习芳马红芳
- 文献传递
- 特异性识别SARS-CoV-2 S蛋白NTD区域的单克隆抗体及应用
- 本发明属于单克隆抗体领域，具体涉及一种特异性识别SARS‑CoV‑2S蛋白NTD区域的单克隆抗体及应用。该单克隆抗体包括氨基酸序列如SEQ ID NO：1‑3所示的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，以及氨基酸序列...
- 张改平王爱萍丁培阳刘红亮田媛媛陈玉梅张守涛梁超朱习芳周景明祁艳华张盈刘恩萍有小娟
- 一种抗PD-L1单克隆抗体以及在制备抗癌药物方面的应用
- 本发明公开了一种抗PD‑L1单克隆抗体，通过使用PD‑L1蛋白免疫小鼠，确定免疫成功后，分离出小鼠脾脏，提取总RNA，反转录为cDNA，通过PCR扩增出抗体轻、重链基因，然后构建单链抗体噬菌体库，通过筛选获得目标抗体。本...
- 张守涛郭亚楠万骐鸣
- 文献传递
- 人IGF-1在大肠杆菌中的可溶表达和纯化被引量：5
- 2010年
- 目的:在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)。方法:根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1DNA序列,构建表达载体,在大肠杆菌OrigamiB(DE3)中与硫氧还蛋白TrxA融合表达,并通过盐析和镍柱亲合层析进行纯化。结果:SDS-PAGE分析显示,重组融合蛋白以可溶形式存在,分子量约为28kDa,占上清总蛋白的50%以上。经盐析和镍柱亲合层析进行纯化,目标蛋白纯度可达到90%左右。结论:复合干扰素在大肠杆菌中的高效可溶表达。
- 张守涛梁会娟张芸
- 关键词：人胰岛素样生长因子1硫氧还蛋白可溶表达纯化
- 一种全人源化抗PD-1单克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种全人源化抗PD-1单克隆抗体，它具有序列表中序列7所示的重链氨基酸序列和序列表中序列8所示的轻链氨基酸序列。本发明的优点在于该抗体对PD-1有很高的亲和力和很低的免疫原性，在动物细胞中高效表达，可用于工业...
- 方惠敏张守涛张一折
- 文献传递
- 人基质蛋白酶2(MMP-2)类血红素结构域原核表达优化被引量：1
- 2006年
- 用构建的人基质蛋白酶-2(MMP-2)类血红素结构域原核表达载体PET25b-PEX转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌落LB液体培养基培养,异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达产生的表达蛋白,大小约29 kD,与预期大小相符。设置不同的IPTG诱导终浓度,诱导时间,诱导时菌液OD值和LB液体培养基的pH值,SDS-PAGE电泳和软件分析发现,当IPTG浓度为0.7 mmol/L,诱导4 h,诱导时菌液OD值为0.7时,实验能获得最高的PEX蛋白表达;5 L大规模培养时,LB培养基pH值为7.5时,可获得较高的重组PEX蛋白表达。
- 李彦杰王保莉张守涛郭蔼光
- 关键词：抑制血管生成
- 疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：1
- 2014年
- 目的:实现疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus Lipase,TLL)在大肠杆菌中的可溶性表达,并建立有效的纯化方法。方法:根据疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶序列和大肠杆菌密码子的偏爱性,合成了疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶DNA序列,克隆至大肠杆菌表达载体PET-32a(+)中,通过筛选得到阳性重组载体,并转化入大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并利用SDS-PAGE电泳检测重组脂肪酶表达情况,并通过Ni柱亲和层析对目的蛋白TLL进行纯化,透析脱盐后,TEV酶切重组融合蛋白,再利用亲和层析纯化得到酶切后的脂肪酶,检测其酶活。结果:得到了可溶性表达的TLL,检测酶切前后脂肪酶的比活性:酶切前达5.7×106U/mg,酶切后达8.9×105U/mg。结论:实现了疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的可溶性表达,并得到有效纯化,同时证明TEV酶切目的蛋白对其活性影响微小,为之后对其进行环化打下基础。
- 王烃郭国光时健郝兵王慧张守涛
- 关键词：大肠杆菌脂肪酶纯化环化
