张玮
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：成都医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人内皮高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备
- 2010年
- 目的 制备人内皮高表达脂多糖相关因子 1（EOLA1）多克隆抗体,检测EOLA1在人脐静脉内皮细胞（HUVEG）中的表达.方法 复性成功表达EOLA1的蛋白样品（样品1和2）,二辛丁酸法检测2种蛋白样品浓度,应用肽质量指纹图谱（PMF）分析法对2种样品进行验证.采用与理论肽段符合率高的EOLA1蛋白样品免疫4只小鼠,同时取4只未免疫小鼠作对照.采集各小鼠血液分离血清,应用饱和硫酸铵盐析沉淀法纯化EOLA1多克隆抗体,ELISA法分析效价（数据以吸光度值表示）.蛋白质印迹法检测EOLA1在HUVEC中的表达.结果 蛋白样品1和2的浓度分别为0.124 16、0.132 15 mg/mL.PMF分析显示,样品1的理论肽段符合率为32%,样品2的理论肽段符合率为24%.选用蛋白样品1免疫小鼠,经检测抗体效价在1∶10 000以上;应用制备的EOLA1多克隆抗体可以检测到EOLA1蛋白在HUVEC中表达.结论 应用EOLA1原核表达蛋白免疫小鼠可以制备EOLA1多克隆抗体,并可用于检测EOLA1蛋白表达.
- 刘月明刘海荣蔡震马兵刘漪沦张玮
- 关键词：内毒素类内皮细胞多克隆抗体
- EOLA1与MT2A相互作用及其上下游关系的确定被引量：1
- 2015年
- 目的研究内皮细胞高表达脂多糖相关因子1（EOLA1）与金属硫蛋白2A（MT2A）的相互作用关系,明确其相互作用位点及上下游关系。方法构建EGFP-EOLA1融合表达载体,转染HUVEC细胞,应用免疫荧光共定位成像技术观察EOLA1和MT2A在HUVEC中的共定位情况;应用截短突变和酵母双杂交确定EOLA1和MT2A的相互作用位置;应用RNAi技术建立EOLA1/MT2A上调和下调的HUVEC细胞模型,观测模型细胞EOLA1/MT2A的表达情况。结果 EOLA1和MT2A在HUVEC中存在共定位现象,共定位主要发生在核膜周围;酵母双杂交和免疫共沉淀实验结果显示,EOLA1的截短突变体1~77氨基酸（aa）片段和MT2A无结合活性,1~115aa片段及1~158aa片段和MT2A有结合活性。EOLA1上调/下调表达时MT2A同时相应上调/下调表达,MT2A的上调和下调表达对EOLA1表达无明显影响。结论 EOLA1和MT2A在HUVEC细胞内存在相互作用,相互作用位点位于EOLA1ORF的100~113功能域,EOLA1可以调控MT2A在HUVEC中的表达。
- 刘月明刘海荣杨汀陈文海张玮刘漪沦
- 关键词：内毒素蛋白质相互作用
- 人内皮细胞高表达脂多糖相关因子1多克隆抗体的制备及其初步应用
- 目的 制备人类新基因内皮细胞高表达脂多糖相关因子1(EOLAl)多克隆抗体,检测EOLA1在HUVEC细胞中的表达。 方法 纯化和复性前期成功表达EOLA1蛋白,应用指纹分析进行验证,然后免疫小鼠取血清,应用饱和硫酸铵盐...
- 刘月明刘海荣蔡震马兵刘站立刘漪沦张玮许雪峰张萍
- 术中剩余皮肤组织匀浆在网状皮移植中的应用被引量：2
- 2010年
- 烧伤临床上进行皮肤移植手术时，因为术者对创面大小估计的误差、取皮质量、移植过程中皮片裁剪等因素，创面被充分覆盖后常有剩余供皮。为了充分利用这部分皮肤，我们将其制作为混悬匀浆，与网状皮肤混合移植于创面，观察其疗效。
- 马兵许雪峰张萍彭杨刘月明李晨阳文科张红张玮刘漪沦杨书
- 关键词：组织匀浆皮移植创面
