彭良俊
- 作品数：13 被引量：25H指数：3
- 供职机构：武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
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- 辛酸钠对人免疫球蛋白中病毒的灭活效果被引量：8
- 2012年
- 目的研究辛酸钠对人免疫球蛋白中脂质包膜病毒和非脂质包膜病毒的灭活效果。方法人免疫球蛋白样品中加入≥6 LgTCID50/0.1 ml的脂质包膜病毒伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、辛德毕斯病毒、HIV-1111B株或非脂质包膜病毒猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV),于(30±1)℃水浴条件下作用不同时间后,测定残余病毒滴度,并经传代培养验证辛酸钠灭活病毒的效果。检测灭活处理后人免疫球蛋白的理化及生物学特性,并经SDS-PAGE和双向电泳法分析灭活处理后蛋白的结构。结果辛酸钠能有效灭活人免疫球蛋白中的脂质包膜病毒,目的蛋白的回收率达97%以上,而对无包膜病毒的灭活作用不明显;辛酸钠处理未影响人免疫球蛋白的理化和生物学特性及蛋白的结构。结论辛酸钠对脂质包膜病毒具有较好的灭活效果,可确保人免疫球蛋白生产工艺的安全性。
- 邹莉邹炜彭良俊李策生邢延涛段凯彭焱吴凡方舸
- 关键词：辛酸钠免疫球蛋白类病毒灭活生物活性
- 人巨细胞病毒抗体检测方法的应用研究
- 2014年
- 目的确定用于筛选人巨细胞病毒(HCMV)IgG阳性血浆的ELISA试剂和用于HCMV免疫球蛋白成品检定的中和试验方法。方法比较目前国内外现有的人巨细胞病毒IgG抗体检测方法(3家ELISA试剂和3种病毒中和试验)的相关性。结果德国赛润和意大利德塞的ELISA试剂与成都蓉生微量中和试验及台湾宝血的蚀斑减少中和试验的相关性很好(r2>99%)。结论从成本和使用便利性考虑,建议使用意大利德赛的ELISA试剂盒用于原料血浆的筛选,使用成都蓉生的微量中和试验作为成品效价检定的方法。
- 彭良俊周志军李策生
- 关键词：巨细胞病毒抗体ELISA
- 发色底物法快速测定α1-抗胰蛋白酶活性的方法
- 目的：应用发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶(α1-Arnitrypsin，α1-AT)生物活性，研究正常人混合血浆为参考标准的血浆(108人份)稀释度范围和测定的影响因素。
方法：采用酶标仪测定抗胰蛋白酶与过量的...
- 周雁翔张爱华张智李策生彭良俊邹汉武
- 关键词：发色底物法Α1-抗胰蛋白酶胰蛋白酶活性测定
- 文献传递
- 人巨细胞病毒特异性免疫球蛋白原料血浆的筛选被引量：2
- 2009年
- 用北京贝尔公司的人巨细胞病毒（HCMV）IgG检测试剂盒检测5-6月入库的武汉生物制品研究所（WIBP）下属四个浆站共7433份普通血浆,HCMV-IgG阳性率为36%-55%。建立内部参考品Pc1、Pc2、Pc3、Pc4,用德国赛润公司的HCMV-IgG定量检测试剂盒对内部参考品进行标定,效价分别为648、962、1757、2940PEI-U/ml。以A450值〉Pc1为标准确定HCMV-IgG阳性的献血员名单,按照检疫期的要求,利用浆站管理系统软件查找献血员前3个月的血浆编号,统计建档。逐批检测符合检疫期的建档血浆,以A450值〉Pc2为标准收集阳性血浆,以A450值〉Pc3为标准投料,进行人巨细胞免疫球蛋白（HCMV-IG）的低温乙醇纯化。通过成品的中和试验结果决定收浆方案是否可行。
- 彭良俊林连珍高菲方亮李策生周志军
- 关键词：效价
- 微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法检测α_1-蛋白酶抑制剂活性被引量：3
- 2011年
- 目的建立微量滴定板上的弹性蛋白酶动态显色法(以下简称微量滴定板法),用于α1-蛋白酶抑制剂(α1-Pro-teinase inhibitor,α1-PI)的活性检测。方法以微量滴定板为载体,将不同量的α1-PI样品与定量的弹性蛋白酶混合,通过适宜的显色底物对剩余的弹性蛋白酶活性进行测定。用酶标仪测定405 nm处A值的变化,分析试验的有效性,并计算α1-PI样品的活性。优化微量滴定板法的实验条件。用BCS凝集分析仪检测α1-PI的活性,确认样品的工作浓度。采用两种方法检测19份样品的α1-PI活性,分析二者的相关性。结果微量滴定板法的最优实验条件为:样品加样体积50μl,标准曲线范围为(2～14)μg/ml;弹性蛋白酶稀释度为1∶1 400,体积100μl;孵育时间15 min;底物稀释度为1∶10,体积50μl;连续监测A405值10 min。微量滴定板法和BCS法检测19份样品的相关系数大于0.99。结论微量滴定板法检测α1-PI活性的时间更短,同一样品不同稀释度之间检测结果的变异率更低,且检测结果与BCS法相关性良好,可替代全自动的BCS法,降低检测成本。
- 周志军林连珍方亮周雁翔李策生彭良俊
- 关键词：Α1抗胰蛋白酶胰弹性蛋白酶滴定分析法BCS
- 血浆分离组分Ⅰ+Ⅲ提取人免疫球蛋白方法初探
- 2016年
- 目的为提高人免疫球蛋白收率,纯化血浆分离组分Ⅰ+Ⅲ并回收高纯度的人免疫球蛋白,进行方法学初步研究。方法用辛酸沉淀结合PALL公司提供的S Hypercel阳离子柱、Hypercel STAR AX阴离子柱两步离子交换层析法进行纯化。结果通过对数据分析得出,Ig G单体二聚体达到99%以上,Ig G纯度达到97%以上,收率达到80%以上。结论该方法能够很好纯化血浆分离组分Ⅰ+Ⅲ,回收高纯度的人免疫球蛋白。
- 方斌彭良俊韩韧董天保王月左林张云杨丹丹杨波
- 关键词：人免疫球蛋白
- 低pH孵放病毒灭活效果回顾性验证评价被引量：8
- 2016年
- 目的回顾和评价连续2次低pH病毒灭活工艺验证效果,为静注人免疫球蛋白制品病毒灭活工艺提供进一步技术支持。方法将一定量指示病毒加入IVIG中,在pH4.1±0.3,24±1℃条件下孵放24 d,并在灭活过程中的不同时间节点取样进行残余病毒滴度检测。结果低pH孵放法可有效灭活VSV、Sindbis、HIV指示病毒,3种指示病毒滴度下降均大于4个Logs,符合国药监注[2002]160号文件要求。结论低pH孵放病毒灭活工艺能有效地增加静注人免疫球蛋白的安全性。
- 梁婧张潇文李策生彭良俊王威刘思扬郑宵蓓刘春杰张智
- 关键词：静注人免疫球蛋白病毒灭活
- 低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀中α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化被引量：1
- 2011年
- 目的采用低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀(FractionⅣ,FⅣ)中提取α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度的α1-AT制剂。方法 FⅣ沉淀经过滤、ConA Sepharose 4B亲和层析、DEAE Sepharose Fast Flow一步离子交换层析提纯α1-AT,采用SDS-PAGE及区带扫描法分析纯化α1-AT的纯度;紫外分光光度计测定纯化α1-AT蛋白的浓度及回收率;Western blot检测其反应原性;胰蛋白酶抑制实验(TICT)检测纯化α1-AT的活性。结果纯化α1-AT的纯度为97.3%;纯化过程中α1-AT蛋白的平均回收率为20.4%;纯化的α1-AT能与抗人α1-AT抗体特异性结合;平均比活为0.833 PU/mg。结论 从FⅣ中成功纯化获得了纯度较高、具有生物学活性的α1-AT制剂。
- 周雁翔端义坤李策生彭良俊张爱华邹汉武
- 关键词：Α1抗胰蛋白酶层析活性
- 一种球蛋白溶液的病毒灭活方法
- 本发明提供了一种球蛋白溶液的病毒灭活方法，本发明通过对病毒灭活时的各种条件如温度、pH值、辛酸盐浓度、蛋白质浓度、孵放时间进行了大量的研究，提供了具有实用价值的辛酸钠灭活病毒时的各种参数的最佳配比。实验证明，本发明提供的...
- 邹莉李策生彭良俊叶巨兵张智彭焱缪燕敏方舸纽泽春
- 动态浊度法定量检测静脉注射用人免疫球蛋白中细菌内毒素含量被引量：1
- 2010年
- 用鲎试剂动态浊度法定量检测静脉注射用人免疫球蛋白中细菌内毒素含量并与家兔法检测热原的结果进行对比。根据《中华人民共和国》2005年版三部附录中的细菌内毒素动态浊度法制定内毒素限值,用ATi320-06型动态试管仪和该仪器配置的中文软件"生物探针-2002"分析检测结果。静脉注射用人免疫球蛋白经稀释消除了干扰因素,动态浊度法能定量检测出内毒素含量。实验满足2005年版中国药典要求:标准曲线相关系数的绝对值︱r︱≥0.980,回收率:50%≤R≤200%,变异系数符合鲎试剂厂家的建议值CV%<10%。检测结果准确、灵敏、稳定、重现性好,与家兔法检测结果相一致。鲎试剂动态浊度法能定量检测静脉注射用人免疫球蛋白中细菌内毒素含量。
- 项庆军彭良俊李策生张智罗红
- 关键词：动态浊度法静脉注射用人免疫球蛋白细菌内毒素
