彭艳
- 作品数：11 被引量：33H指数：3
- 供职机构：药物有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA类药物在疾病治疗中的研究进展被引量：2
- 2004年
- RNA类小分子可作为治疗性药物应用于各类疾病的治疗。这类小分子主要包括基因表达抑制剂、基因修复剂、蛋白拮抗剂及RNA疫苗,目前已有多种反义RNA和核酶作为基因表达抑制剂正在进行各期临床试验,它们主要用于心血管疾病、肿瘤、药物代谢性疾病、病毒性肝炎和艾滋病等疾病的治疗。蛋白拮抗剂aptamers已作为治疗老年性黄斑和血栓药物进入临床Ⅱ,Ⅲ期试验。RNA疫苗作为免疫调节剂治疗前列腺癌和肾癌的临床试验也在进行中。
- 彭艳洪海燕焦炳华倪健
- 关键词：反义RNA
- 肝癌转移相关蛋白及其兔单克隆抗体的筛选和鉴定
- 肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,每年全世界死于肝癌的患者约达125万人,中国是肝癌高发区,占世界上肝癌总死亡人数的53﹪.因此寻找肝癌不同发展阶段的特异...
- 彭艳
- 关键词：肝细胞肝癌蛋白质组
- 文献传递
- 可溶性肿瘤坏死因子受体2的表达及其活性研究
- 目的:(1)在毕赤酵母细胞中表达sTNFR2;(2)在Hela细胞中表sTNFR2;(3)分析sTNFR2中和TNFα对L929细胞毒性的作用;(4)分析重组sTNFR2对LPS诱导表达mTNFα的THP-1细胞 的[C...
- 彭艳
- 关键词：可溶性肿瘤坏死因子受体2毕赤酵母细胞转染
- 文献传递
- 不同转移潜能肝癌细胞株的差异蛋白质组的二维液相色谱分析被引量：10
- 2007年
- 目的:对不同转移潜能肝癌细胞株MHCC97- H(高转移)和MHCC97-L(低转移)差异表达的蛋白质进行二维液相色谱分离和MALDI-TOF质谱鉴定.方法:将肝癌细胞株MHCC97-H和MHCC97- L细胞裂解样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离,然后每个PI组分再按疏水性经二维反相无孔硅胶HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶图,再利用DeltaVue软件比较升高或降低的差异蛋白.收集差异蛋白峰进行胰酶酶解,然后进行MALDI-TOF质谱鉴定.结果:2D图谱显示共有72个差异蛋白条带,共鉴定出了9个差异蛋白.分别为M2型丙酮酸激酶、ATP合成酶α亚单位、热休克蛋白60、Toll样受体9、含黄素单加氧酶、钙网硬蛋白前体、锰超氧化物岐化酶、nm23-H1、G-蛋白偶连受体激酶5;其中4个蛋白在高转移细胞株MHCC97-H中表达升高,5个蛋白在低转移细胞株MHCC97-L表达升高.结论:这些差异蛋白可能在肝癌的转移中起关键作用.
- 彭艳张霞王葵蒋平焦炳华倪健
- 关键词：蛋白质组色谱分离MALDI-TOF质谱
- 抗人F1-F0 ATP合成酶beta亚基单抗的制备及其抗肿瘤活性研究被引量：8
- 2008年
- 目的:制备鼠抗人F1-F0ATP合成酶beta亚基(hATP5B)单抗,并对其特异性和抗肿瘤活性进行研究。方法:以原核表达人hATP5B免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,筛选分泌抗hATP5B单抗的杂交瘤细胞株。采用Protein A亲和层析法纯化抗体腹水,SDS-PAGE检测纯化产物纯度。利用Western blot、细胞免疫荧光对其特异性进行鉴定,并通过抑制乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr表面ATP生成,细胞毒性实验进行抗肿瘤活性研究。结果:获得一株稳定表达抗hATP5B单抗的杂交瘤细胞株Mab3B8,Western blot和细胞免疫荧光结果表明,该抗体与乳腺癌MCF-7及其耐药细胞MCF-7/Adr细胞天然抗原结合;可明显抑制MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞膜表面ATP合成;与化疗药物多柔比星(曾用名:阿霉素)联合作用,可降低化疗药物多柔比星对肿瘤细胞的IC50。结论:成功建立了一株可特异性识别天然hATP5B的单抗,有阻断肿瘤细胞膜表面ATP合成活性并可明显增强MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞对多柔比星敏感性的作用。此项研究对膜表达F1-F0ATP合成酶功能探讨及肿瘤治疗研究都具有重要意义。
- 张霞彭艳俞丽丽陈建鹤王怡波林建波倪健殷明
- 关键词：多柔比星肿瘤耐药
- p53截短突变群的建立及其在HeLa细胞的表达
- 2002年
- 目的 :建立一组 p5 3截短突变群 ,分析缺失突变对 P5 3蛋白质功能的影响。 方法 :以野生型 p5 3基因为模板 ,采用PCR定点突变技术 ,建立一组 P5 3蛋白质 N端和 (或 ) C端缺失的截短突变群 ,构建真核表达载体 ,基因转移 He L a细胞 ,分析转移基因表达及 p5 3下游相关基因表达。 结果 :构建的 p5 3截短突变群在 He L a细胞中表达 ,并对 p5 3下游相关基因的表达模式产生一定的影响。 结论 :p5 3截短突变群可以作为一个研究 p5 3与下游基因相互作用的良好工具 ,对于研究 p5 3的功能调节机制有重要的价值。
- 娄永华彭艳焦炳华孔宪涛
- 关键词：P53基因基因点突变基因转染基因表达HELA细胞
- 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)可溶性胞外区在大肠杆菌中的高效表达
- 2001年
- 肿瘤坏死相关凋亡诱导配体 (TNF relatedapoptosis inducingligand,TRAIL) ,也称为凋亡素 2配体(Apoptosisin2Ligand ,Apo2L) ,是肿瘤坏死因子超家族成员 ,能够激发肿瘤细胞选择性地发生凋亡 ,并对正常组织细胞几乎无毒性。TRAIL通过细胞表达受体 ,即死亡受体 4和 5 (DeathReceptor 4 ,DR4andDeathReceptor5 )发挥作用 ,而大多数肿瘤细胞表面表达这 2种受体。为了深入研究TRAIL在肿瘤治疗中的价值 ,我们采用RT PCR方法克隆了TRAIL基因 ,并对其细胞外可溶性区域 (1 1 4 2 81氨基酸残基 )在大肠杆菌中进行了表达。重组的TRAIL可溶性蛋白占细菌总蛋白的 4 5 %以上 。
- 娄永华彭敏彭艳王梁华朱玉平钟山焦炳华
- 关键词：TRAIL基因克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体大肠杆菌
- 人F1F0-ATP合成酶β亚基的原核表达、纯化及抗体制备被引量：3
- 2008年
- 目的:原核表达、纯化人F1F0-ATP合成酶β亚基(hATP5B)并制备其多克隆抗体。方法:以人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)总RNA为模板,通过RT-PCR扩增hATP5B成熟肽编码序列,克隆入原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)并诱导表达,表达产物用Ni2+螯合层析纯化,纯化产物用透析复性,产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。复性产物免疫家兔,制备多克隆抗体;多抗的效价用间接ELISA法检测,并用Western blot和细胞免疫荧光分析多抗的特异性和抗原结合性。结果:测序证实获得hATP5B成熟肽编码序列。SDS-PAGE鉴定表明,表达、纯化、复性产物的相对分子质量(Mr)均约55000,与理论值相符。灰度扫描分析重组hATP5B(recombinant hATP5B,rhATP5B)的表达量占菌体蛋白总量的36.8%,纯化产物纯度达98.3%,复性产物纯度达99.2%。Western blot反应阳性。多抗的平均抗体效价为1∶640000,可特异识别HUVEC中的天然抗原。结论:原核表达的hATP5B具有良好的免疫原性,其免疫家兔后获得的多抗具有高效价和特异性。hATP5B的原核高效表达和其抗体制备为进一步研究hATP5B的功能奠定了实验基础。
- 俞丽丽张元军张霞王怡波林建波倪健彭艳
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- Envision法免疫组织化学染色研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性
- 2003年
- 目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor，VEGI)的抗肿瘤活性及其机制。方法：用重组人可溶性VEGI治疗荷S180肉瘤小鼠；第VIII因子相关抗原(FVIII RAg)标记肿瘤血管内皮细胞，用免疫组化Envision法检测瘤内微血管密度。结果：重组人可溶性VEGI显著抑制S180肉瘤生长，肿瘤微血管密度大大减低。结论：VEGI具有较强的抗肿瘤活性，其机制可能是通过抗新生血管形成介导的。
- 肖扬焦炳华朱玉平彭艳王梁华娄永华
- 关键词：ENVISION法免疫组织化学染色研究抗肿瘤活性
- 肿瘤细胞蛋白质组的二维液相色谱分离被引量：9
- 2004年
- 目的:建立一种利用二维液相色谱法分离肿瘤细胞全细胞裂解液的方法。方法:将肿瘤细胞裂解样品用初始缓冲液置换后,进行一维色谱聚焦分离,然后先对二维色谱条件进行优化和重现性分析,再将一维收集的pH值8.5-4.0之间的组分分别进行二维反相HPLC分离,利用ProteoVue软件将UV图转换成胶图。结果:一维色谱聚焦分离pH值8.5-4.0之间的组分共收集到16个,每个组分的二维UV图转换成pI／UV胶图。结论:二维液相色谱分离法是一种有效的分离肿瘤细胞裂解液的方法。
- 彭艳郑颖蒋平何玮侯彦强周聪郭春香倪健焦炳华
- 关键词：蛋白质组肿瘤细胞
