施正政
- 作品数：10 被引量：23H指数：2
- 供职机构：浙江医科大学肿瘤研究所更多>>
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- DNA低甲基化不是化学致癌启动过程的必经途径
- 1991年
- 曾有一种观点认为化学致癌启动过程的外造传机制中DNA去甲基化是很重要的。根据有:一些化学致癌物可抑制DNA甲基化酶活性(体外),可引起细胞DNA甲基化水平降低:DNA低甲基化与基因表达改变有关。但证据尚不充分。 本文通过HPLC直接测量致癌物处理细胞DNA中的5-甲胞嘧啶含量及用限制性内切酶分析DNA中-CCGG-序列的甲基化状态观察DNA的甲基化水平。为了把研究对象严格局限于新合成DNA中,在后一方法中,被研究的细胞DNA在收获前24h用3~H-TdR标记,分析电泳谱中的放射活性分布。
- 余应年施正政潘孔伤陈星名
- 关键词：化学致癌甲基化状态甲基化水平甲基化酶去甲基化
- 细胞DNA低甲基化是否为化学致癌启动过程的必经途径?被引量：3
- 1989年
- 利用限制性内切酶分析技术研究化学致癌物对人羊膜FL细胞新合成DNA甲基化水平的影响,发现弱遗传毒性致癌物5-杂氮胞苷和L-乙硫氨酸可抑制HpaⅡ识别位点的甲基化,但是强诱变剂/致癌剂MNNG和黄曲霉素B_1对同一顺序DNA的甲基化却没有作用。所以抑制哺乳类DNA的胞嘧啶甲基化是部分而非全部致癌剂的特殊致癌启动机制。
- 施正政余应年陈星若
- 关键词：DNA甲基化化学致癌
- 人大肠肿瘤的DNA甲基化水平
- 1993年
- 通过高效液相色谱技术,分析15例人大肠肿瘤(腺癌与腺瘤)的肿瘤组织及其自身正常肠粘膜的DNA总体5-甲基胞嘧啶(mC)含量,发现5例腺癌DNA的甲基化水平低于其正常粘膜DNA,1例腺癌高于正常粘膜,另外9例(8例腺癌和1例腺瘤)则与正常粘膜相近似。对其中的10例腺癌进行mC精确定量和分组分析,证明癌DNA与正常DNA并没有甲基化水平的统计学差异,但是癌DNA mC含量的个体差异显著比正常粘膜DNA的小。作者推测可能是肿瘤中DNA甲基化水平的趋同化现象造成了过去所谓的DNA“低”或“高”甲基化。
- 施正政郑树陈丽荣鱼达
- 关键词：大肠肿瘤DNA
- 5-杂氮胞苷和甲基硝基亚硝胍处理细胞DNA中5-甲基胞嘧啶含量的HPLC分析被引量：1
- 1991年
- 应用高效液相色谱技术对5-azaCR及MNNG处理的FL、Wish及Vero-E6细胞的DNA中5—甲基胞嘧啶(~mC)含量进行直接测量。结果表明5—aza CR(2×10^(-6)mol/L)处理细胞DNA的~mC含量较对照细胞为低(P<0.01),但在MNNG处理的FL细胞(5×10^(-6)及1×10^(-5)mol/LMNNG)及Wish和Vero-E6细胞(2及3.3×10^(-5)mol/L MNNG)中,DNA的~mC含量与对照并无差异(P>0.05)。这与用HpaⅡ限制性片段长度放射活性分析法检测新复制DNA甲基化状态的结果一致。认为文献中关于细胞DNA低甲基化是化学致癌启动过程普遍规律的结论是由于实验设计的内在缺陷所致。
- 施正政余应年陈星若
- 关键词：脱氧核糖核酸致癌物
- 减式杂交筛检大肠癌负相关基因的研究被引量：17
- 1997年
- 目的在分子水平寻找与人大肠癌的发生发展相关的新的因素。方法采用减式杂交技术筛选大肠癌下调基因。结果共获得４６个在正常肠粘膜中表达、而在大肠癌中低表达或不表达的克隆。其中２个（ＳＮＣ６和ＳＮＣ１９）已被ＮＣＢＩ作为新基因录入，编号分别为Ｕ１７７１４（ＳＮＣ６）和Ｕ２０４２８（ＳＮＣ１９）。其中ＳＮＣ６已完成全序列测定，为２９３２ｂｐ，推测其为编码２７１个氨基酸的蛋白，分子量为３００００。与蛋白数据库比较，最高同源性仅３０％，染色体定位于２２ｑ１３。ＲＮＡｄｏｔｂｌｏｔ显示：ＳＮＣ６的表达在大肠癌中低于在相应的正常肠粘膜中，在乳癌中亦有此现象。ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ发现其在肝、肺、前列腺、睾丸、卵巢及Ｋ５６２细胞中的表达高于其它组织。结论ＳＮＣ６可作为新的大肠癌负相关基因加以研究、利用。
- 郑树蔡心涵曹江郑雷郑雷张颜明莫益群施正政张颜明
- 关键词：结肠肿瘤基因
- 坏变细胞的DNA对HpaⅡ限制性片段分析法测量DNA甲基化水平的干扰作用被引量：1
- 1992年
- 用~3H-TdR在不同时期标记细胞DNA,以区别在HpaⅡ限制性片段放射活性分析中的DNA系来自增殖中的或坏变中的细胞.实验证明MNNG处理后存活的细胞中并无DNA甲基化水平的变化.而经MNNG或Hanks液处理的脱落细胞DNA,在HpaⅡ水解前后其DNA片段的L_w皆明显降低,并可干扰对新复制DNA的HpaⅡ识别位点的分析.因此作者认为,在缺乏严格设计以除外上述因素的体系中,作出关于细胞DNA甲基化状态变化的结论是不可信的.
- 潘孔寒施正政余应年陈星若
- 关键词：细胞甲基化致癌物
- 化学致癌物和抗致癌物检测技术的基础和应用研究
- 1992年
- 该课题已发表论文33篇，内容有6项。
- 余应年陈星若陈金芳叶志前徐惟安蔡朱男张丽燕施正政金中初王敏
- 关键词：化学致癌物发表论文
- 一株源于NIH远交系小鼠的可移植性乳腺癌ZMBC902的建立
- 1993年
- 动物模型是实验肿瘤学研究的一种常用手段,目前国内外已建立了多种不同宿主、不同肿癌的动物模型,但较为理想的肿瘤动物模型并不多。迄今国内已建立的小鼠乳癌模型已不下十株,均由近交系小鼠如津白Ⅱ号(TAⅡ)、615系和BALB/c的自发乳腺肿瘤经同系或异系移植成,并已在肿瘤学实验研究中得到了初步应用。本文报道的小鼠可移植性乳腺癌ZMBC902源自NIH远交系小鼠。
- 沈德钧施正政郑树郑备义杨骅曹江沈希强陈万源
- 关键词：NIH近交系小鼠可移植性实验动物肿癌
- HSU17714基因反义重组质粒的构建及其对人大肠癌细胞生长的影响
- 1996年
- 我所应用减式杂交方法筛选人大肠癌负相关基因,得到一与已知基因同源性仅50％的cDNA片段,已作为新发现的基因被NCBI收录入国际基因库,我们将此cDNA片段反向克隆至非整合型哺乳动物表达载体pREP9的多克隆位点中,构建了HSU17714基因的反义RNA表达载体,并籍脂质体将之导入人结肠癌SW1116细胞中,双层软琼脂集落培养试验、流式细胞技术分析及MTT比色法等结果分别提示转染该重组体的肠癌细胞的非锚着依赖性生长能力、增殖周期活性和细胞生长速度均受到不同程度的抑制,说明外源重组体pREP9+HSU17714(AS)对肠癌SW1116细胞的生长具有抑制作用。
- 陆敏曹江郑树蔡心涵施正政郑雷
- 关键词：大肠癌癌细胞生长
- DNA甲基化与癌被引量：1
- 1990年
- 在哺乳动物DNA中,5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosin,~mC)是唯一天然存在的修饰碱基,约占全部胞嘧啶的2～5％,这些甲基化部位的绝大部分存在于CG顺序中,按如下形式对称排列:5’-~mCG-3’ 3’-G^mC-5’,但是新复制的DNA是半甲基化(hemimethyla-tion)的,新合成链无~mG。核内DNA甲基化酶(DNA methylase)识别模板链上的甲基化部位,按照原则,在新链的相应部位进行甲基化修饰,完成~mC复制。因此,DNA甲基化类型(DNA methylation pattern)
- 施正政余应年
- 关键词：病理肿瘤
