曹贵方 作品数:220 被引量:357 H指数:7 供职机构: 内蒙古农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 内蒙古自治区自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
CRISPR/Cas9基因编辑技术在家畜中的应用研究进展 被引量:2 2021年 美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration,FDA)于2020年12月14日批准了名为GalSafe转基因猪上市。它是首个既可以有效减轻异种器官移植中的急性免疫排斥,又可以生产肉类过敏者可安全食用的转基因家畜。随着基因编辑技术不断发展,转基因动物走入市场已势不可挡,尤其近年来,规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9,CRISPR/Cas9)系统成为基因编辑技术的一种重要的方法。CRISPR/Cas9基因编辑系统由于结构简单、效率高、应用范围广和成本低等优点被广泛应用于作物育种、家畜遗传改良、人类疾病治疗等方面。论文主要对CRISPR/Cas9基因编辑系统在家畜应用上取得的研究进展进行综述,并对未来发展前景进行展望。 王彤 高元鹏 韩静 张景程 李喜和 何婷依 曹贵方关键词:转基因动物 家畜 Ghrelin在蒙古绵羊卯泡颗粒细胞及其拟黄体化过程中的表达 Ghrelin是1999年由日本科学家Kojima从大鼠胃中分离出来,是生长激素促分泌素受体(GHS-R)的天然配体,被认为是一种脑肠肽。目前,Ghrelin蛋白在绵羊卵泡颗粒细胞中表达已被充分肯定,但是Ghrelin ... 宋艳华 杜晨光 王秀梅 郭宏儒 赵鹏伟 李淑凤 钱英红 曹贵方关键词:绵羊 GHRELIN 颗粒细胞 实时荧光定量RT-PCR 细胞培养 文献传递 人β-防御素3在体外对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响 被引量:1 2014年 为了更充分地阐明人β-防御素3(HBD3)对淋巴细胞增殖反应的影响,试验先用CCK-8对不同浓度的刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖反应进行检测,进而筛选出最适ConA浓度,然后再用CCK-8检测不同浓度(1,10,100,500,1 000 ng/mL)的HBD3协同最适ConA浓度诱导淋巴细胞增殖反应。结果表明:ConA的最适浓度为2μg/mL;浓度为1,10,100 ng/mL的HBD3可以显著促进2μg/mL ConA诱导的淋巴细胞增殖反应,但是伴随着HBD3浓度的不断升高这一作用逐渐降低,当浓度为500 ng/mL和1 000 ng/mL时表现出一定程度的抑制作用。说明HBD3在一定浓度范围内对ConA诱导的淋巴细胞增殖反应具有促进作用,而超出这一浓度范围就会出现抑制作用。 孟庆刚 李琦 赵鹏伟 温世勇 菅瑞珍 曹贵方关键词:CCK 体外 荷斯坦奶牛乳腺β-防御素的差异表达 被引量:1 2012年 本研究为证明荷斯坦奶牛乳腺β-防御素的表达,扩增出6种β-防御素序列进行氨基酸分析,结果发现,扩增的6个保守的半胱氨酸,其核酸序列与NCBI数据库序列进行BLAST比对,结果LAP、BNBD4同源性100%,BNBD5为99.6%,EBD为99.5%,BNBD7、TAP为98.5%;实时荧光定量PCR检测6种防御素的mRNA水平的表达,它们之间的表达量都有显著性差异(BNBD4与BNBD5除外),其中LAP表达量最多,BNBD7,EBD,BNBD5,BNBD4次之,TAP的表达量最低。 程兰玲 曹贵方 温世勇 赵鹏伟 关洪敏 菅瑞珍关键词:Β-防御素 荷斯坦奶牛 乳腺炎 一种鉴定κ-酪蛋白基因型的引物、试剂盒及其检测方法 本发明提供了一种鉴定κ‑酪蛋白基因型的引物、试剂盒及其检测方法,属于分子生物学检测技术领域。一种鉴定κ‑酪蛋白基因型的引物,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的反... 张传强 鲁静 曹贵方 李喜和利用类弹性蛋白elp构建活性绵羊β-防御素sbd-1体外表达的方法 本发明提供了一种利用类弹性蛋白elp构建活性绵羊β‑防御素sbd‑1体外表达的方法,属分子生物学领域,是通过 RT‑PCR得到克隆了编码sbd‑1的成熟肽全基因序列,与elp相连后,克隆入原核表达载体pet‑22b中,构... 曹贵方 王鑫 智达夫 李喜和 刘默凝 李秀男 魏薇 田志鹏 龙鑫 王大清 张福全文献传递 与脂尾型绵羊的尾型性状相关的SNP标记及应用 一种与脂尾型绵羊的尾型性状相关的SNP标记及应用,属生物领域,该SNP标记位于绵羊第8号染色体第87804589碱基对,该位置碱基为T的绵羊具有短尾性状,此处碱基为G时拥有正常尾长。本发明还提供了检测SNP标记的引物及含... 曹贵方 智达夫 刘默凝 王鑫 龙鑫荷斯坦奶牛乳腺LAP基因的克隆与序列分析 2012年 为了研究奶牛乳腺防御素基因的表达调控机制,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出LAP基因的核心片段序列,并与NCBI数据库序列比对同源性;进一步扩增其DNA序列中间片段;其后运用反向PCR技术并结合半巢式PCR技术扩增其侧翼的序列。结果表明:序列与NCBI数据库中序列同源性为100%,确认为LAP基因;DNA序列扩增得到1 760 bp的中间序列,并预测了其酶切位点;得到5'侧翼序列107 bp,3'侧翼序列87 bp,经预测发现有转录因子GATA。为进一步研究防御素的防御功能、寻找防御素基因体外表达调控机制以及利用基因工程防治奶牛乳腺炎积累了基本资料。 程兰玲 曹贵方 赵鹏伟 凃勇 包图雅关键词:荷斯坦奶牛 反向PCR 防御素 抗菌肽的功能及发展前景 被引量:3 2018年 抗菌肽(Antimicrobial peptides)广泛存在于昆虫、植物、动物中,一旦有外界病原微生物入侵机体,机体自身就会做出反应,产生抵抗物质,从而抵御病原微生物对机体的进一步损伤与破坏,在免疫应答过程中发挥重要作用。该文简述了AMPs的来源、分类、功能、局限性以及发展前景,以期为其临床运用提供参考。 王鑫 曹贵方关键词:抗菌肽 抗生素 乌珠穆沁羊早期胚胎转录组测序分析 2023年 试验旨在分析乌珠穆沁羊16 d胚胎和25 d胚胎的差异表达基因,探究以乌珠穆沁羊为代表的蒙古绵羊的早期胚胎发育过程和分子机制。通过对乌珠穆沁羊16 d胚胎和25 d胚胎进行mRNA测序,共富集到7171个差异表达基因,尤其显著的差异表达基因包括参与到肌动蛋白细胞骨架调控、紧密连接、AMPK信号通路、PI3K-Akt信号通路和MAPK信号通路的基因,如ROCK1、ROCK2、TJP1、TJP3、ADIPOR2、ACACA、PDGFRβ、PDPK1等,以及参与核糖体信号通路的RPL家族和RPS家族的部分基因,参与帕金森病、氧化磷酸化等通路中的多个NDUF家族基因。在通路分析中,E16发育阶段突出了那些与神经、血管、胰岛β细胞和胰腺发育相关的通路。而使器官和身体结构更为复杂,比如调控大脑、肝脏、心脏活动的基因,在E25发育阶段被显著富集。综合来说,在16 d胚胎阶段,神经、血管以及胰岛β细胞和胰腺正在快速发生;在25 d胚胎阶段,心脏、大脑和肝脏正处于活跃的生理时期。 苏红 陈陆 李秀男 王大清 赵霏霏 张越 李勇 曹贵方关键词:乌珠穆沁羊 胚胎发育