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限制性酶切位点多态性在家族性高胆固醇血症(FH)基因诊断中的应用研究: 1998年; 利用长链ＰＣＲ技术从人白细胞基因组ＤＮＡ中分离到一个长为５．０ｋｂ的ＰＣＲ产物片段，限制性内切酶酶切证实该片段是ＬＤＬ受体基因外显子１５－内含子１５－外显子１６片段。利用该片段中存在的ＰｖｕⅡ酶切位点多态性，对一个家族性高胆固醇血症家族进行基因连锁分析，证明该技术可以快速。; 周天鸿李月琴刘飞鹏朱嘉明梁志成; 关键词：高胆固醇血症基因诊断

MCMV不同途径感染免疫缺损性小鼠体内效应的研究被引量：1: 2003年; 通过血管注射、腹下注射、唾液腺注射等3种不同途径将野生型小鼠巨细胞病毒(murinecytomegalovirus,MCMV)感染免疫缺损型小鼠CM17SCID(severecombinedimmunodeficiency,严重免疫缺损综合症),在感染后不同的时间内分别取唾液腺、脾、肝、肺和肾脏测定其病毒滴度,以及测定感染后SCID小鼠的死亡率.同时通过唾液腺注射RvM43突变株,测定病毒在唾液腺中的滴度.结果显示:经尾部血管途径注射的体内唾液腺、肺、脾、肝和肾脏的病毒滴度高峰期和SCID小鼠死亡时间均显著性早于经腹下注射、唾液腺注射途径.除唾液腺器官外,经唾液腺注射途径肺、脾、肝和肾脏的病毒的出现时间晚于经尾部血管和腹下注射途径.经唾液腺注射后,唾液腺中突变型RvM43在各时间点的病毒滴度及高峰出现时间与野生型相同.由此可知,从唾液腺感染小鼠后MCMV病毒在唾液腺中的生长不受M43基因突变的影响,小鼠巨细胞病毒不同途径感染免疫缺损型小鼠CM17SCID的体内生物学效应有差异.因此有必要通过不同途径感染宿主来研究MCMV基因的体内功能.; 朱嘉明周天鸿; 关键词：MCMV 巨细胞病毒疱疹病毒

抗菌肽A-蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与初步分泌表达被引量：9: 1999年; 采用ＥｃｏＲ Ⅰ和ＢａｍＨ Ⅰ接头将化学合成的大小为４５对碱基的ＣＡ（１－７）Ｍ（５－１２）杂合肽基因克隆到Ｅ．ｃｏｌｉ分泌表达载体ｐＩＮ－ Ⅲ· ＯｍｐＡ２上的ＥｃｏＲⅠ－ＢａｍＨⅠ位点之间，并对其在Ｌｐｐ启动子和Ｌａｃ启动子／操纵子调控下的分泌表达进行初步研究重组子的地高辛（Ｄｉｇ）核酸探针杂交和酶切分析结果表明杂合肽基因克隆成功；; 李燕红刘飞鹏朱嘉明周天鸿李月琴; 关键词：蜂毒素大肠杆菌分泌表达载体

真核细胞转录系统启动T7启动子起始的研究被引量：4: 2000年; 利用氯霉素乙酰转移酶基因 (CAT)和人低密度脂蛋白受体基因 (LDLR)作为报道基因 ,根据α -鹅膏蕈碱 (α -amanitin)对真核生物RNA聚合酶的选择性抑制 ,分析T7噬菌体启动子为哺乳类动物细胞启动外源基因表达的机制结果表明 :真核生物RNA聚合酶Ⅱ可启动T7启动子的转录 ;同时应用DNA -蛋白质凝胶泳动技术 ,发现人工合成的T7启动子能与核蛋白质结合。; 周天鸿李月琴朱嘉明云泓若肖小敏; 关键词：T7启动子真核细胞

BRCA1基因结构及其在乳腺癌中的表达被引量：2: 1997年; 利用ＭＰＣＲ技术从乳腺组织分离到抑癌基因ＢＲＣＡ１的ｃＤＮＡ片段，将此９１４ｂｐ的片段克隆进质粒ｐＵＣ１１８，并经全序列测定证实。序列分析表明，ＢＲＣＡＩｃＤＮＡ编码的肽链ＮＮ２－末端有一锌指结构，抑癌基因ＢＲＣＡＩ的产物可能是ＤＮＡ结合蛋白，ｃＤＮＡ序列存在两个变异位点：一个是第４０９位的Ｃ→Ａ（Ａｓｐ→Ｇｌｕ）：另一个是第８７９位的Ａ→Ｔ（ＭＩａ同义突变）。以该片段为探针，检测６例乳腺癌组织中ＢＲＣＡＩｍＩＭＡ表达，一例表达明显下降，一例没检测到表达的ｍＩＭＡ产物。; 周天鸿李月琴刘飞鹏朱嘉明朱嘉明; 关键词：乳腺癌基因表达

抗菌肽与碱性成纤维细胞生长因子基因的融合及其在酵母中的表达被引量：28: 1998年; 从重组质粒ｒＢＳ上切下柞蚕抗菌肽Ｄ基因片段，切去终止密码后连接到重组穿梭质粒ｐＶＴ－ＧＦ上碱性成纤维细胞生长因子ｃＤＮＡ的５′端，使密码框正确排列，构建成融合基因重组质粒ｐＶＴ－ＣＤＧＦ，转化到酵母中进行表达。转化子酵母蛋白粗提物用Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２Ｄ３１作指示菌进行抑菌圈测试，初步检出具有抑菌活性，用ＥＬＩＳＡ检测证明其具有碱性成纤维细胞生长因子的抗原性。; 吴映雅刘飞鹏周天鸿周天鸿李月琴; 关键词：抗菌肽穿梭质粒融合基因 FGF 酵母

天蚕抗菌肽A与蜂毒素杂合肽基因的合成及在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：21: 2002年; 根据天蚕抗菌肽A(cecropinA ,CA)N端第 1～ 7个氨基酸残基、蜂毒素 (melittin ,M )N端第 5～ 12个氨基酸残基 ,以大肠杆菌偏爱的密码子设计合成了杂合肽CA(1～ 7) -M(5～ 12 )基因 ,同载体 pGEMEX - 1连接后转化大肠杆菌JM 10 9,经打点杂交筛选和序列测定 ,获得一个与设计一致的克隆。将此克隆中的质粒亚克隆至JM10 3(DE3) ,经IPTG诱导、BrCN切割和抑菌圈试验表明 ,克隆的杂合肽基因在JM 10 9(DE3)中获得了表达。; 朱嘉明刘飞鹏李月琴钟振宇张娜; 关键词：蜂毒素基因克隆

合成血清胸腺因子基因在大肠杆菌中的克隆和表达: 1996年; 将合成血清胸腺因子（ＳＴＦ）基因插入表达型大肠杆菌质粒ｐＷＲ５９０对大肠杆菌Ｃ６００进行转化，用同位素探针杂交捡出阳性克隆，以合成ＳＴＦ多肽的抗体用ＥＬＩＳＡ方法及放射免疫分析证明克隆株能表达出ＳＴＦ多肽。; 温晋朱建安周天鸿朱嘉明刘飞鹏周金鑫; 关键词：基因克隆基因表达

T7启动子具有真核生物聚合酶Ⅱ顺式作用因子的功能被引量：6: 2000年; 根据ａ－鹅膏蕈碱（ａ－ａｍａｎｉｔｉｎ）对真核生物ＲＮＡ聚合酶的选择性抑制，以氯霉素乙酰转移酶基因（ＣＡＴ）作为报道基因进行体内表达实验，证明Ｔ７噬菌体启动子可为真核生物ＲＮＡ聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性ＤＮＡ－蛋白质凝胶泳动技术，分别以ＴＡＴＡ框、ＣＡＡＴ框、ＧＣ框和八核苷酸序列（ｏｃｔａｍｅｒ）为竞争性寡核苷酸分子，发现人工合成的Ｔ７启动子可能与ＴＦⅡＤ起始转录因子结合，形成ＤＮＡ－核蛋白质结合物。将ＴＡＴＡ框和八核苷酸序列分别接入Ｔ７启动子上游，ＣＡＴ实验显示八核苷酸序列可以增强ＲＮＡ聚合酶Ⅱ对Ｔ７启动子的转录起始作用。实验结果表明Ｔ７启动子可作为ＲＮＡ聚合酶Ⅱ的顺式作用因子。; 李月琴朱嘉明李弘剑谢卫兵周天鸿王彤歌; 关键词：T7启动子转录起始

蛙皮素-蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与诱导表达被引量：11: 2001年; A hybrid peptide gene was designed and synthesized. Its encoding peptide is constructed from residues 3～14 of magainin and residues 1～13 of melittin. The MA E gene was cloned into plasmids pUC18 and pBV220. By DNA sequencing, the whole sequences of this gene is confirmed to be correct. The recombinant plasmid pBMA\|E was expressed in \%E.coli\% DH5α. A gene product band can be seen with Tricine\|SDS\|PAGE. The MA E hybrid peptide was purified by immobilized metal affinity chromatography. Bioactivity assay was carried out in liquid turbidity method. The bactericide value to \%E.coli\% K 12 D 31 is 0.182.; 黄音刘飞鹏周天鸿朱嘉明; 关键词：抗菌肽大肠杆菌抗菌活性克隆

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朱嘉明

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