李坤
- 作品数：40 被引量：261H指数：8
- 供职机构：山东省医学科学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省医学科学院科研基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程环境科学与工程生物学更多>>
- 骨桥蛋白及其整合素β3受体在肺动脉高压大鼠心肌中的表达及意义
- 2014年
- 目的观察骨桥蛋白及其整合素β3受体在肺动脉高压大鼠心肌中的表达变化及其与右心室重塑的关系,为研究其在心血管病理生理机制中的作用奠定基础。方法 60只SD大鼠分为5组,对照组和4个肺动脉高压实验组(PAH组),实验组大鼠通过皮下注射野百合碱建立肺动脉高压模型,在注射后第1,2,3,4周的4个时间取材,命名为PAH1、PAH2、PAH3和PAH4组。测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数;采用免疫组化、Western blot和RT-PCR法测定不同时间点各组大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体mRNA的表达水平。结果与对照组大鼠相比,肺动脉各高压组右心室心肌OPN与整合素β3表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),并随着肺动脉高压产生的时间延长而增高。相关性分析显示右心室肥厚指数与右心室心肌0PN mRNA表达水平呈明显正相关性(r=0.828,P<0.01),同时与右心室心肌整合素β3 mRNA也呈明显正相关(r=0.822,P<0.01)。结论大鼠肺动脉高压及右室肥大形成过程中,右心室心肌OPN及其受体整合素β3基因表达增高,可能在右心室心肌重塑中起重要的作用。
- 庞启明李坤
- 关键词：骨桥蛋白整合素Β3
- 卵巢癌中HPV_(16/18)感染与ILT4表达的相关性研究被引量：5
- 2014年
- 目的探讨卵巢癌中HPV16/18感染与ILT4表达的相关性,为临床治疗提供参考依据。方法调查2009年8月-2013年8月共计218例患者,采用原位杂交的方法检测50例卵巢上皮良性肿瘤、58例交界性肿瘤以及60例卵巢癌患者的HPV16/18病毒及ILT4,选取正常卵巢组织患者50例为正常组;首先对比分析了正常组、卵巢上皮良性肿瘤、交界性肿瘤及卵巢癌中的HPV16/18病毒感染率及ILT4水平,探讨卵巢癌中HPV16/18感染及ITL4与卵巢癌不同病理特征间的关系,对卵巢癌中的HPV16/18感染与ILT4表达之间的相关性进行分析。结果卵巢癌组中的HPV16/18感染显著高于正常对照组及卵巢上皮良性肿瘤(P<0.01),但与交界性肿瘤相比,ILT4在卵巢良性肿瘤与正常对照组相比,差异均无统计学意义,其余各种间相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌中HPV16/18感染与ILT4表达具有较好的正相关,ILT4可能协同HPV16/18参与卵巢癌的发生与发展过程之中。
- 李坤潘云燕杨香山牛洪欣延俊元
- 关键词：卵巢癌HPV16
- 高低剂量X射线照射正常人淋巴母细胞基因表达转录谱的研究被引量：1
- 2012年
- 目的比较高低剂量X射线照射对基因表达影响的差异性，探讨不同剂量辐射生物效应的作用机制。方法采用包含有45033个基因的NimbleGen12X135K芯片分析0．1和5Gy照射正常人淋巴母细胞AHH-1培养6h后基因表达谱的改变，以差异为2倍以上且两组实验结果一致的标准确定为有效差异表达基因。用real-timePCR和Westernblot方法验证了共同表达基因PERP的表达。结果0．1Gy照射后，有760个基因表达上调，1222个基因表达下调；5Gy照射后，上调和下调基因分别是457和744个。在两个剂量照射条件下共同表达上调的基因有55个，同时下调的基因有339个。低剂量组差异表达基因主要参与细胞信号转导、DNA损伤反应等过程，高剂量组主要参与凋亡、细胞增殖分化等过程。real-timePCR和Westernblot方法验证了PERP的表达与芯片结果相-致，均表达下调。结论高低剂量照射后基因表达改变存在质和量的差异，可更好地阐释高低剂量电离辐射生物学效应的作用机制。
- 李坤刘伟侯殿俊乔建伟马娅贾喜明李洁清
- 关键词：电离辐射基因芯片
- 子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义被引量：7
- 2014年
- 目的探讨子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义。方法选取2013年5月~2014年5月入住山东省交通医院分娩的100例产妇的胎盘绒毛组织,随机均分为对照组和子痫前期组,每组各50例。采用RT-PCR法检测各组胎盘组织中miRNA-101的表达情况;Western blot法检测过表达和封闭miRNA-101后,各胎盘组织ERp44的表达情况;采用流式细胞仪检测滋养细胞的凋亡情况。结果与对照组相比,子痫前期组中miRNA-101的表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。在滋养细胞HTR-8/SVneo中过表达miRNA-101后,ERp44的表达显著下调(P<0.05);封闭miRNA-101后,ERp44的表达上调(P<0.05);过表达miRNA-101,细胞凋亡数量减少;封闭miRNA-101,细胞凋亡数量增加。结论子痫前期中,miRNA-101可通过调控内质网蛋白ERp44的表达来调控胎盘滋养细胞的凋亡过程。
- 常玉华李坤
- 关键词：滋养细胞子痫前期
- 丹参川芎嗪注射液对妊娠期高血压模型大鼠的疗效及胎盘细胞Cyclin B1和p21蛋白的影响被引量：13
- 2014年
- 目的探讨丹参川芎嗪注射液对妊娠期高血压大鼠模型的效果及对胎盘细胞CyclinB1、p21蛋白表达量的影响。方法将64只孕鼠随机分为4组:正常妊娠大鼠作空白对照,妊娠高血压大鼠作阴性对照,硫酸镁治疗组作阳性对照,丹参川芎嗪注射液组为实验组;每组16只。妊娠14 d时,尾静脉注射亚硝基左旋精氛酸甲酯建立妊娠期高血压模型。从妊娠第14天开始给药,空白对照组及阴性对照组均给予与药物同剂量的生理盐水;阳性对照组及实验组给予硫酸镁及丹参川芎嗪注射液治疗,3 d为一个给药疗程。通过大鼠套尾法测量血压,尾静脉取血法测定24 h尿蛋白,并观察各组妊娠大鼠所生新生鼠的身长、体重、死胎率、后肢畸形率和胎盘重量,并通过免疫蛋白印迹法测定各组大鼠胎盘细胞中CyclinB1、p21蛋白表达量。结果与空白组相比,阴性对照组孕鼠尿蛋白及血压明显增加,新生鼠的身长、体重和胎盘重量均显著降低,死胎率以及畸形率显著增高(P<0.05);与阴性对照组相比,阳性对照组和实验组孕鼠收缩压及尿蛋白浓度均显著降低,新生鼠的身长、体重和胎盘重量均显著升高,死胎率以及畸形率显著减少(P<0.05);阳性对照组及实验组各指标差异无统计学意义。与空白对照组比较,阴性对照组孕鼠CyclinB1蛋白浓度显著下降(P<0.05),p21浓度显著增高(P<0.05);与阴性对照组相比,阳性对照组和实验组孕鼠CyclinB1蛋白浓度显著升高(P<0.05),p21浓度显著降低(P<0.05);阳性对照组与实验组相比较,差异无统计学意义。结论川芎嗪注射液能够显著降低妊娠高血压孕鼠的死胎率以及畸形率,改善新生鼠状况,并且能够上调cyclinB1以及下调p21表达,这可能是川芎嗪注射液治疗效果的原因之一。
- 肖丽赵梅花刘香环李坤
- 关键词：丹参川芎嗪注射液妊娠期高血压P21蛋白
- 解整合素-金属蛋白酶12-S在孕妇早期异位妊娠诊断中的价值被引量：7
- 2014年
- 目的通过检测孕妇早期血清中解整合素-金属蛋白酶12-S(a disintegrin and metalloprotease 12,ADAM12-S)水平及变化趋势,探讨解整合素-金属蛋白酶12-S在孕妇早期异位妊娠诊断中的价值。方法选取黄冈市妇幼保健院就诊的早孕期妇女(孕5~10周)150例,其中正常妊娠102例,异位妊娠48例,留取其血清,利用时间分辨荧光免疫分析法检测血清中解整合素-金属蛋白酶12-S值。结果 102例正常妊娠组孕妇血清中ADAM12-S值随孕周呈线性稳定增长,相关系数r=0.9217(P<0.05);48例异位妊娠组孕妇血清中ADAM12-S值明显低于正常妊娠组且随孕周未呈线性稳定增长,相关系数r=0.2817;异位妊娠组各孕周的中位数倍数明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ADAM12-S在早孕正常妊娠中数值稳定,而在异常妊娠中数值低,在孕妇早期异位妊娠诊断中具有重要价值。
- 程锦梅田祥学饶永红李坤
- 关键词：解整合素-金属蛋白酶12异位妊娠
- Silver手术联合Akin截骨术治疗拇外翻老年患者的临床疗效被引量：6
- 2014年
- 目的探讨Silver手术联合Akin截骨术治疗拇外翻老年患者的临床疗效。方法选取2010年6月至2012年6月收治的拇外翻老年患者60例。给予Silver手术联合Akin截骨术治疗,术后不采用外固定,尽早下床功能锻炼。随访并观察患者外翻角(HVA)、跖间角(IMA)和近侧关节固定角(PASA)的变化,疗效客观评价采用美国足踝外科协会(AOFAS)评分系统,采用自制调查表进行满意度调查。结果平均随访21.4个月,满意率为83.33%。术前HVA(29.72±4.83),术后矫正到(10.23±3.24),具有统计学意义(t=27.35,P<0.01)。术前IMA(9.61±2.32),术后矫正到(8.42±2.41),具有统计学意义(t=3.21,P<0.05)。术前AOFAS评分(28.22±5.81),术后提高到(82.53±10.92),具有统计学意义(t=35.71,P<0.01)。术后复发1例,小腿及足背肿胀严重7例,下肢交感神经功能障碍1例,经治疗后恢复或缓解。结论 Silver手术联合Akin截骨术治疗轻中度拇外翻老年患者,矫正效果佳、复发率低,同时因不需要外固定,术后允许早期负重锻炼,可有效降低老年人围术期并发症发生率。
- 鲍鲲李坤王增涛
- 关键词：拇外翻截骨术
- ILT4基因在卵巢癌发生发展中的作用及其功能初步研究被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨免疫球蛋白样转录子4(ILT4)在卵巢癌发生发展中的作用并初步推测其功能。方法:收集卵巢癌患者129例,并以子宫肌瘤患者100例为对照,以免疫组化和RT-PCR方法对观察对象进行病理组织中ILT4基因表达和检测,比较患者与对照组患者基因表达差异,并分析不同病理和临床特征与ILT4表达关系。结果:在卵巢癌患者中检测ILT4mRNA(1.85±1.52),ILT4蛋白(37.24±10.62),对照组中ILT4未检出,两组差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、不同病理类型间ILT4表达差异无统计学意义(P>0.05),而是否存在淋巴转移、不同高中低分化程度及不同肿瘤大小间ILT4表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ILT4高表达于卵巢癌患者,而在子宫肌瘤患者中不表达;ILT4与肿瘤大小、恶性程度及是否发生淋巴结转移密切相关,可以作为卵巢癌诊断和预后的指标。
- 李坤潘云燕延俊元杨香山牛洪欣
- 关键词：卵巢癌免疫组化
- 青藤碱对小鼠复发性自然流产妊娠结局的影响及其相关机制研究
- 2015年
- 目的研究青藤碱对复发性自然流产模型小鼠妊娠结局的影响及相关机制。方法雌性CBA/J小鼠60只,雄性DBA/2小鼠20只、Balb/c小鼠10只,按雌雄比例2∶1合笼,检出阴栓者计为妊娠第1天。分为正常组：雌性CBA/J小鼠×雄性Balb/c小鼠,正常饮食,9只孕鼠;模型组：雌性CBA/J小鼠×雄性DBA/2小鼠,正常饮食,10只孕鼠;治疗组：雌性CBA/J小鼠×雄性DBA/2小鼠,自检出阴栓日开始改用含有0.5%青藤碱的饲料,10只孕鼠。计数存活胚胎数和丢失胚胎数,并计算胚胎丢失率。使用ELISA法检测血清中细胞因子IFN-γ和IL-4的水平;real-time PCR检测IL-4、INF-γ、GATA-3、T-bet基因的表达水平;Western blot测IL-4、INF-γ、GATA-3、T-bet蛋白的表达水平。结果胚胎丢失率结果表明：与模型组比较,正常组和治疗组的胚胎丢失率显著降低（P〈0.01）。ELISA结果显示：与正常组相比较,模型组和治疗组中血清IFN-γ和IFN-γ/IL-4的水平均显著升高（P〈0.01）,IL-4水平均显著降低（P〈0.01）;与模型组相比较,治疗组中血清中IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均显著降低（P〈0.01）,而IL-4水平变化不大。Real-time PCR和Western blot的结果均显示：与正常组相比较,模型组和治疗组中IL-4、GATA-3基因的表达水平均显著降低（P〈0.01）;IFN-γ、T-bet基因的表达水平以及IFN-γ/IL-4比值、T-bet/GATA-3比值均显著升高（P〈0.01）。与模型组相比,治疗组中IFN-γ、T-bet基因的表达水平以及IFN-γ/IL-4比值、T-bet/GATA-3比值显著降低（P〈0.01）。结论青藤碱可以减少复发性自然流产的发生,其中RSA与Th1/Th2平衡漂移至Th1型有关;青藤碱治疗复发性自然流产的可能机制为降低体内Th1型细胞因子IFN-γ及转录因子T-bet的水平,从而调节Th1/Th2平衡。
- 肖丽李坤
- 关键词：青藤碱复发性自然流产INF-ΓIL-4T-BETGATA-3
- LM术中先行子宫动脉阻断对患者生育功能的影响
- 2013年
- 目的:探讨子宫肌瘤剥除(LM)术中先行子宫动脉阻断对患者的生育功能及肌瘤复发的影响。方法:将2009年11月～2010年10月行LM时先行子宫动脉阻断的子宫肌瘤患者40例为实验组,以2008年12月～2009年10月直接行LM的子宫肌瘤患者36例为对照组,比较两组患者的手术时间、术中出血量、随访期月经症状、子宫大小、雌二醇水平及肿瘤复发情况。结果:实验组的手术时间、术中出血量分别为(89.4±22.5)min、(86.0±12.7)ml,对照组的手术时间、术中出血量分别为(107.6±38.9)min、(195.3±25.5)ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组患者排卵期及黄体期的雌二醇水平均在正常值范围内;实验组的月经症状缓解率为95.0%,明显高于对照组的80.6%(P<0.01);子宫肌瘤复发率为2.5%,明显低于对照组的13.9%(P<0.01)。结论:LM术中先行子宫动脉阻断可减少术中出血量,降低手术时间,不影响子宫的生育功能,术后肌瘤复发率低。
- 潘云燕李坤
- 关键词：子宫肌瘤剥除术子宫动脉阻断生育功能复发
