李思源
- 作品数：8 被引量：47H指数：4
- 供职机构：宁波大学更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项长江学者和创新团队发展计划浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一种鰤鱼诺卡氏菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种鰤鱼诺卡氏菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法，该试检测剂盒包括SYBR<I>PremixExTaq</I><Sup>TM</Sup><Image file="924295DEST_PATH_IMAGE0...
- 王国良刘璐李思源
- 文献传递
- 养殖鱼类诺卡氏菌病的危害及防治被引量：5
- 2010年
- 随着渔业资源的不断衰退，鱼类养殖规模的不断扩大，近年来，虹鳟、牙鲆、大黄鱼、乌鳢、黑鲷、东方魨等名贵鱼类养殖在我国得到了较快的发展，获得可观的经济效益。但随着养殖业集约化程度的提高，养殖过程中的疾病也日趋严重，“诺卡氏菌病”就是近几年在我国流行起来的一种新型传染病。
- 李思源王国良徐益军
- 关键词：养殖鱼类诺卡氏菌病渔业资源养殖规模鱼类养殖
- 三种致病弧菌感染对大黄鱼非特异性免疫功能的影响被引量：4
- 2012年
- 溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolytic-us)是引起大黄鱼(Pseudosciaena crocea)溃疡病的3种主要致病菌.将试验大黄鱼随机分成4组,分别腹腔注射哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌和灭菌生理盐水,在感染后的不同时间采样,通过白细胞数量、白细胞分类计数、NBT阳性细胞数量以及溶菌酶活力的变化趋势来探讨3种致病弧菌感染对大黄鱼非特异性免疫功能的影响.结果表明,大黄鱼各项血液指标的变化主要发生在感染后的1～7 d.在人工感染的初期,各实验组大黄鱼外周血的白细胞数量、NBT阳性细胞数量呈现先增加后降低的趋势,淋巴细胞、嗜中性粒细胞百分比显著降低(p<0.05),单核细胞百分比显著提高(p<0.05);随着时间的延长,白细胞数量开始下降;淋巴细胞、嗜中性粒细胞百分比有所上升,7 d以后各类血细胞数量变化不显著.其中哈氏弧菌感染组在白细胞数量、NBT阳性细胞数量等多个指标上的变化最为明显.血清中溶菌酶活性显著高于脾组织,鱼体受感染后两者溶菌酶活性均较对照组有显著提高,不同致病菌与大黄鱼非特异性免疫功能之间呈现一定的时效差异.研究认为反映鱼体受感染后从应激反应发生至非特异性免疫功能的发挥主要发生在病原菌感染前期,不同致病菌与大黄鱼非特异性免疫功能之间呈现一定的时效差异.
- 李思源葛明峰胡亚萍蔡林婷王国良
- 关键词：海洋生物学大黄鱼溶菌酶
- 3种致病弧菌感染对大黄鱼血液生化指标的影响被引量：12
- 2013年
- 溶藻弧菌Vibrio alginolyticus、哈维弧菌Vibrio harveyi、副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus是引起大黄鱼溃疡病的3种主要致病菌。本研究将试验大黄鱼随机分成4组,分别腹腔注射0.2ml的哈维弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌和灭菌生理盐水,在感染20d中的不同时间采样,通过检测血清糖类、脂类及蛋白质代谢产物含量,血清蛋白质含量及酶活性,血清电解质含量等有关血液生化指标来比较3种致病弧菌对大黄鱼血液生化指标的影响。结果表明,大黄鱼血液生化指标的变化主要发生在感染后的1～4d,主要表现为总蛋白、白蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、K、Fe显著升高(P<0.05),尿素氮、肌酐、血糖、胆固醇、Na、Cl显著降低(P<0.05),甘油三酯、P、Ca、Mg无显著变化(P>0.05),说明致病菌感染对大黄鱼组织器官的生理机能和代谢水平均产生了影响。反映鱼体受感染后从应激反应发生至生化指标变化主要出现在致病菌感染前期,提示血清生化指标的检测可以作为大黄鱼"溃疡病"早期感染的监测指标。
- 蔡林婷李思源葛明峰胡亚萍王国良
- 关键词：大黄鱼弧菌血液生化指标脂类
- 蛳鱼诺卡氏菌SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：18
- 2012年
- 根据GenBank中蛳鱼诺卡氏菌16S-23S rRNA基因序列设计并合成一对特异性引物,经反应体系优化后建立了检测蛳鱼诺卡氏菌的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。结果显示,该方法线性关系良好,标准曲线的相关系数为0.998;溶解曲线分析显示产物为单一的特异峰;检测灵敏度可达10 6μg/μL的DNA含量,与嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、麦氏弧菌不发生交叉反应,具有良好的特异性。应用建立的方法在蛳鱼诺卡氏菌病爆发时期,对16份鱼体组织、养殖水体、饲料等样品进行了检测,结果 7份为阳性,与细菌分离、培养检查结果 100%相符。既能检测发病鱼,又能检出未发病且已感染的病鱼,对病害的早期防控体现应用价值。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量等优点,可用于蛳鱼类致病鱼诺卡氏菌的快速检测。
- 王国良刘璐李思源
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 3种致病弧菌感染对大黄鱼7种酶活性的影响被引量：3
- 2012年
- 大黄鱼溃疡病主要由3种致病弧菌引起:溶藻弧菌Vibrio alginol yticus、哈维弧菌V.harveyi和副溶血弧菌V.parahaemolyticus。为了解大黄鱼抗病原菌感染的免疫反应机理,对其疾病防御提供重要的理论基础,本实验将健康的大黄鱼随机分为3个实验组和1个对照组,分别注身射0.2 mL的哈维弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及灭菌生理盐水。在人工感染后的第0,1,2,4,7.10,13,16,20天分别采样,通过测定每组大黄鱼血清中7种免疫相关酶活性,比较这3种致病弧菌对大黄鱼影响的差异性。结果表明:在感染后的1～10d,实验组大黄鱼血清中血清溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、过氧化物酶(P0D)、髓过氧化物酶(MPO)的活性变化,总体表现为先升高、后降低再逐渐升高最后趋于一致的现象,且不同病原菌之间存在一定的时效差异。碱性磷酸酶(AKP)对入侵体内的哈氏弧菌反应转敏感,ACPPOD和MPO对溶藻弧菌反应较敏感,LSZ和PO对副溶血弧菌反应较敏感。
- 葛明峰李思源王国良
- 关键词：大黄鱼溶藻弧菌副溶血弧菌酶活性
- 一种鰤鱼诺卡氏菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种鰤鱼诺卡氏菌荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法，该试检测剂盒包括SYBRPremixExTaq<Sup>TM</Sup><Image file="201010291641.9_AB_0.GIF" he="...
- 王国良刘璐李思源
- 氟苯尼考对大黄鱼的急性毒性及体外抑菌试验被引量：7
- 2010年
- 采用倍比稀释法,研究氟苯尼考对哈氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌等8种大黄鱼(Pseudosciaena crocea)致病弧菌的体外抑菌效应;同时以棋盘微量稀释法进行五倍子、黄连、乌梅与氟苯尼考的联合用药试验,并研究了该药对养殖大黄鱼的急性毒性效应。结果表明,氟苯尼考对所选弧菌的最小抑菌浓度(MIC)在0.39～0.78μg/mL,且其MBC值与MIC值相等或为对倍关系;联合用药显示,MIC值比单独使用时略有降低,FIC指数为1.00～0.75,其中以氟苯尼考和五倍子的协同作用最为显著;氟苯尼考口服给药对大黄鱼具有较高安全性,96h LD50>1000mg/kg,对大黄鱼的安全浓度SC>100mg/kg。
- 李思源邢晨光李凯吕永林王国良
- 关键词：氟苯尼考大黄鱼体外抑菌急性毒性
