李运生
- 作品数:168 被引量:148H指数:6
- 供职机构:安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 拟胚体对成体细胞参与胚胎嵌合的影响
- 2008年
- 试验尝试构建成体细胞同小鼠早期胚胎的嵌合共生胚胎。取成年人皮肤组织的成纤维细胞,慢病毒转染皮肤成纤维细胞标记EGFP荧光蛋白,同小鼠早期8-细胞胚胎进行嵌合。结果显示慢病毒高效标记人皮肤成纤维细胞表达EGFP荧光蛋白,通过皮肤成纤维细胞与小鼠胚胎干细胞形成的拟胚体环境作用后,皮肤成纤维细胞成功与小鼠胚胎形成嵌合胚,嵌合囊胚形成率为38.08%,表达EGFP荧光蛋白的皮肤成纤维细胞能够嵌合到小鼠胚胎的不同部位。嵌合胚在胚胎干细胞分离培养环境下进行培养,嵌合到小鼠内细胞团的皮肤成纤维细胞参与小鼠内细胞团的组成,参与小鼠内细胞团组成的胚胎占嵌合胚比率为1.74%。小鼠胚胎干细胞拟胚体环境作用可以成功介导人皮肤成纤维细胞同小鼠早期胚胎形成嵌合共生体系。
- 曹鸿国李运生曲秀霞邓宏魁
- 关键词:拟胚体成纤维细胞胚胎嵌合
- 免疫去势和未去势猪睾丸上生长激素释放肽的定位及其基因表达
- 2010年
- 目的:探讨生长激素释放肽在猪睾丸中的定位及其基因表达,以及免疫去势对猪睾丸中生长激素释放肽表达的影响。方法:14头9周龄公猪随机分为免疫去势组和对照组(未去势组),25周龄时屠宰,取血清和睾丸组织,放射免疫法检测血清睾酮的水平,免疫组织化学PV-9000两步法确定生长激素释放肽在睾丸中的细胞定位,实时荧光定量PCR法分析睾丸中生长激素释放肽mRNA的变化。结果:免疫去势组猪血清睾酮水平显著地低于未去势组;免疫组织化学显示表达生长激素释放肽的细胞为精原细胞、初级精母细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞,且免疫去势猪阳性细胞数显著多于未去势猪。另外,猪睾丸中有生长激素释放肽mRNA,但免疫去势组与未去势组间差异无统计学意义。结论:猪睾丸中广泛存在生长激素释放肽及其mRNA,免疫去势导致生长激素释放肽的表达增多。
- 方富贵王琳王索路蒲勇章孝荣李运生张运海陶勇刘亚曹鸿国
- 关键词:免疫去势公猪睾丸生长激素释放肽实时荧光定量PCR
- 小鼠脂肪干细胞自发转化的鉴定方法
- 本发明公开了小鼠脂肪干细胞自发转化的鉴定方法,将小鼠脂肪干细胞在体外连续传代,然后包括形态学的变化、增殖速度的激增、异常染色体的出现和比例的增加、DNA含量的降低以及表面分子的变化五个步骤。其中形态学和增殖速度的观察与检...
- 张运海魏超李运生章孝荣方富贵张鹏飞李侠姜少帅韩菲宋丹丹刘通
- 文献传递
- 牛iPS细胞无限定因子慢病毒诱导
- 为了诱导形成牛iPS细胞用于深入研究和应用,试验直接采用慢病毒作为诱导材料感染牛胎儿成纤维细胞,并对诱导形成的细胞集落进行检测分析.结果显示,慢病毒介导的EGFP在牛胎儿成纤维细胞中稳定和高效表达,在含有LIF和bFGF...
- 曹鸿国孙雪萍殷慧群张运海刘亚李运生陶勇章孝荣
- 关键词:成纤维细胞逆转录病毒
- 文献传递
- 不同因素对安徽白山羊超数排卵的影响被引量:2
- 2014年
- 为获得更多安徽白山羊受精卵,以开展转基因育种工作,研究了不同孕酮阴道栓来源、季节以及供体妊娠状态对安徽白山羊超数排卵效果的影响。结果表明:使用国产孕酮阴道栓(CIDR)对供体母羊进行同步发情处理,头均排卵数和回收受精卵数分别为15.0±7.62和14.6±7.88枚,受精率为97.3%,而应用进口孕酮阴道栓对供体山羊进行同步发情处理,头均排卵数和回收受精卵数分别为11.0±5.38和10.8±5.16枚,受精率为98.2%,两组间差异不显著(P>0.05);安徽白山羊在春、秋、冬3个季节超数排卵,头均回收卵子数分别为13.71±6.28、16.54±7.43和13.95±6.15枚,季节间差异不显著(P>0.05);妊娠母羊和未妊母羊头均排卵数分别为14和15.2枚,两者差异不显著(P>0.05),但妊娠组回收卵子的受精率显著低于空怀组(P<0.05)。
- 刘亚莉李运生章美林陈真詹年章孝荣刘亚张运海杨宏星吴蓉花方富贵曹鸿国
- 关键词:山羊超数排卵CIDR妊娠
- 胆固醇和磷脂酰胆碱对山羊精液冷冻保存效果的影响
- 2022年
- 为探究胆固醇(CHL)和磷脂酰胆碱(PC)对山羊精液冷冻保存效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同浓度的CHL(1.0、2.5、5.0、10.0 g/L)、PC(10、15、20、25 g/L),以15%卵黄(EY)作为对照。通过测定冷冻解冻后精子的活力、顶体完整率、精子运动参数、质膜完整率、精子磷脂和胆固醇含量来判断保存效果。结果表明,精液冷冻显著降低山羊精子磷脂和胆固醇含量,分别添加5 g/L CHL和10 g/L PC,精子冷冻解冻后,在活力、顶体完整率、质膜完整率和运动参数与对照组差异不显著。进一步将CHL和PC混合添加发现,4 g/L CHL+16 g/L PC解冻后精子活力、曲线速率、平均路径速度和顶体完整率均显著高于对照组(P<0.05),且可以改善冷冻后精子磷脂和胆固醇含量。运用4 g/L CHL+16 g/L PC冷冻保存精子进行山羊人工授精,其受胎率和产仔率与EY组差异不显著,冷冻稀释液中添加4 g/L CHL+16 g/L PC显著提高山羊精液冷冻保存效果。
- 胡家达吴海智薛昌安顾紫薇王若茜潘江山高永恒刘亚方富贵张运海丁建平李运生
- 关键词:山羊精液冷冻保存胆固醇磷脂酰胆碱
- 安徽白山羊新品系种质特性与遗传多样性分析被引量:3
- 2012年
- 探讨了安徽白山羊新品系的种质特性和遗传多样性,为开展遗传资源保护和品种选育提供依据。本研究测定了安徽白山羊新品系、安徽白山羊、波尔山羊、萨能奶山羊4个种群的生长发育性状、血常规和血液生化指标并做差异分析,运用4个微卫星标记分析群体遗传结构、遗传分化和近交程度。结果表明:(1)新品系的体重、体长、体高、胸围显著高于安徽白山羊(P<0.05),体高和胸围与波尔山羊已无显著差异(P>0.05);(2)新品系的红细胞压积(HCT)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、白细胞总数(WBC)、血小板总数(PLT)、淀粉酶(AMS)、谷丙转氨酶(GPT)、血清钾(K)等血液指标均与其他3个种群存在不同程度的差异;(3)4个微卫星位点均呈高度多态(PIC值在0.833 6~0.917 8之间),新品系种群内近交程度较大(Fis值为0.247),新品系和萨能奶山羊遗传距离最近(0.347 8),其次是波尔山羊(0.576 5),最后是安徽白山羊(0.809 4)。结论提示,新品系肉用性能优良,适应性良好,种群内遗传分化程度较高,在进行品种选育时要防止群体内过度近交。
- 张晓东凌英会韩春杨张子军孙志辉任春环刘亚张运海李运生殷宗俊陈宏权丁建平章孝荣
- 关键词:生长性状血液指标微卫星标记
- 动物细胞内核蛋白提取方法
- 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体,介导重组核蛋白在细胞核内表达,待重组核蛋白在细胞内表达稳定后,使用操作液处理细胞,收集细胞,超声波破...
- 曹鸿国章孝荣杨盼蒲勇张运海刘亚陶勇方富贵李运生任春环张子军丁建平刘洪瑜
- 用于分离小鼠脂肪干细胞的消化液
- 本发明公开了一种用于分离小鼠脂肪干细胞的消化液。所述消化液的组成成分为10%的胎牛血清,0.09%的胶原酶I,余量为DMEM/F12。本发明的成分简单,来源方便,成本低;能够有效的从小鼠的脂肪组织中分离出脂肪干细胞;能够...
- 魏超张运海刘星李运生章孝荣陈建文周娜汝桂涛张宇陶佳吴蓉花
- 文献传递
- 一种促进猪体细胞克隆胚胎体外发育的培养液
- 本发明提供了一种促进猪体细胞克隆胚胎体外发育的培养液,所述培养液中含有表观遗传修饰剂EPZ00477。EPZ004777能够特异性改变克隆胚胎早期发育过程中组蛋白H3K79的甲基化修饰水平,改善卵母细胞对体细胞核重编程的...
- 张运海张宇陶佳吴蓉花刘星李运生章孝荣
- 文献传递