李逸文
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 树突状细胞与自然杀伤细胞共同作用对人黑色素瘤A375细胞端粒酶反转录酶mRNA的间接影响
- 2014年
- 目的 观察树突状细胞（DC）与自然杀伤（NK）细胞体外共同作用对人黑色素瘤A375细胞人端粒酶反转录酶（hTERT） mRNA的影响.方法 从健康人外周血中获得DC、NK细胞,在transwell培养体系中用DC、NK细胞单独或共同作用的微环境作用A375细胞,采用反转录PCR检测A375细胞hTERT mRNA表达的变化.结果 transwell下室的DC与NK细胞单独或共同作用均能间接抑制上室A375细胞hTERT mRNA的表达,DC联合NK细胞的抑制作用更强,且对A375细胞hTERTmRNA的抑制具有时间依赖性.结论 DC、NK细胞能间接抑制人恶性黑色素瘤A375细胞hTERTmRNA的表达,DC和NK共同作用有更强的抑制作用.
- 韩毅王迪曲迪李逸文温良鹤崔凤孟秋徐玉清
- 关键词：树突细胞自然杀伤细胞端粒酶反转录酶黑色素瘤
- PI3K/Akt通路在EGFR/KRAS不同遗传背景NSCLC细胞对TRAIL敏感性中的作用被引量：5
- 2016年
- [目的]探讨PI3K/Akt通路在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导携带EGFR/KRAS不同基因表型的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞凋亡中的作用。[方法 ]CCK8法检测TRAIL对A549和PC9细胞活性的影响;Western blot检测TRAIL作用后Akt、p-Akt蛋白表达的变化。使用PI3K特异性抑制剂LY294002处理细胞,CCK8法检测对TRAIL抗细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测对TRAIL诱导细胞凋亡和细胞周期影响。[结果]当TRAIL浓度<100 ng/ml时,A549和PC9细胞的存活率与对照组无明显差异。当TRAIL浓度分别为100 ng/ml[(64.29±11.39)%vs(100±12.07)%,t=6.900,P=0.020]、[(74.57±9.70)%vs(100±11.20)%,t=4.786,P=0.041]和500ng/ml[(48.85±10.92)%vs(100±12.07)%,t=13.390,P=0.006][(46.34±8.99)%vs(100±11.20)%,t=18.419,P=0.003]时,A549和PC9细胞存活率明显低于对照组。TRAIL以时间依赖的方式上调A549和PC9细胞内的p-Akt的水平。使用LY294002抑制PI3K/Akt通路活性能够明显增加TRAIL抑制A549细胞[(40.74±2.53)%vs(64.29±9.30)%,t=6.092,P=0.026]和PC9细胞[(42.38±3.40)%)vs(74.57±7.92)%,t=12.689,P=0.006]增殖的能力,诱导更多的A549细胞[(44.98±8.99)%vs(23.07±2.92)%,t=7.836,P=0.016)]和PC9细胞[(46.32±7.42)%vs(3.44±1.46)%,t=40.727,P=0.001)]凋亡,并使细胞周期更多地阻滞在G0/G1期[(73.60±3.43)%vs(60.20±5.48)%;(70.51±3.86)%vs(42.37±4.55)%](P均<0.05)。[结论]TRAIL引起的PI3K/Akt通路活化,可拮抗TRAIL的诱导凋亡作用。抑制PI3K/Akt活性可明显增强EGFR-TKI敏感的和EGFR-TKI不敏感的NSCLC细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性。
- 邓立力邓洪滨韩红霞李逸文
- 关键词：PI3K/AKTTRAIL
- 抑制Akt磷酸化对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导表皮生长因子受体/KRAS野生型非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的影响被引量：6
- 2016年
- 目的 探讨抑制Akt磷酸化对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）引发的表皮生长因子受体（EGFR）/KRAS野生型非小细胞肺癌（NSCLC） H1299细胞凋亡的影响.方法 采用Annexin V-FITC/碘化丙啶（PI）法分析TRAIL对H1299细胞凋亡的作用;Western blot检测TRAIL作用后细胞Akt、p-Akt蛋白的表达.使用PI3K特异性抑制剂LY294002处理H1299细胞,用Annexin V-FITC/PI法分析其对TRAIL诱导细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞Akt、p-Akt蛋白表达的变化.结果 H1299细胞对TRAIL引起的凋亡呈现耐受.当TRAIL质量浓度为100 ng/ ml时,实验组细胞凋亡率高于对照组[（15.06±1.29）％比（3.56±0.50）％,t=66.953,P=0.000].当TRAIL质量浓度增加到500 ng/ ml时,与100 ng/ ml TRAIL处理组相比,差异无统计学意义[（18.65±2.09）％比（15.06±1.29）％,t=2.423,P=0.136].TRAIL以时间依赖的方式上调H1299细胞的p-Akt表达水平.用LY294002预处理细胞后,TRAIL激发的Akt磷酸化被抑制到基线水平,同时细胞凋亡率明显高于仅TRAIL处理组[（41.65±4.62）％比（15.82±0.61）％,t=39.028,P=0.001].结论 TRAIL引发的Akt磷酸化激活可抵抗TRAIL引起的凋亡反应.抑制Akt磷酸化可明显增强EGFR/KRAS野生型NSCLC细胞对TRAIL引起的凋亡反应的敏感性.
- 邓立力邓洪滨韩红霞李逸文郭扬
- 关键词：AKT肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞凋亡
- 树突状细胞和自然杀伤细胞与肿瘤细胞端粒酶的研究进展
- 2010年
- 树突状细胞（DC）将人端粒酶逆转录酶（hTERT）提呈给T淋巴细胞，可激发特异性的细胞毒性T细胞和CD4＋T细胞反应。自然杀伤（NK）细胞与肿瘤细胞端粒酶的相关研究较少，而DC和NK细胞共同作用可以增加抗肿瘤活性，有可能与端粒酶共同参与抗肿瘤免疫反应。
- 李逸文徐玉清王文秀
- 关键词：树突细胞杀伤细胞端粒末端转移酶
- 加热处理后人黑色素瘤A375细胞对NK和DC细胞免疫活性的影响
- 2014年
- 目的:研究经加热处理的人黑色素瘤细胞A375对外周血单个核细胞来源的自然杀伤(NK)细胞及树突状细胞(DC)免疫活性的影响并探讨其作用机制。方法:体外培养人外周血单个核细胞来源的NK和DC细胞,并使其与43℃水浴加热后的A375细胞共孵育24 h。应用CCK-8法测定加热和非加热组效靶比(NK∶DC∶A375)分别为1∶2∶1、3∶6∶1、6∶12∶1时NK/DC细胞的杀伤率;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上述各效靶比组NK细胞培养液中γ-干扰素(γ-INF)的释放情况。结果:在每个效靶比,与非加热组比较,加热组NK/DC的杀伤率均明显提高(P<0.05),且其杀伤率随NK/DC细胞的浓度升高而升高(<0.05)。在加热组和非加热组,含有DC较不含DC组杀伤率均明显提高(P<0.05)。加热组NK细胞γ-INF释放均较非加热组明显增加(P<0.05)。结论:经加热处理后的黑色素瘤细胞A375能够刺激NK细胞分泌更多的γ-INF,明显提高NK细胞的杀伤活性,且DC在其中起着重要作用。
- 曲迪徐玉清韩毅崔凤李逸文
- 关键词：树突细胞黑色素瘤免疫活性
- TRAIL联合舒尼替尼对EGFR-TKIs抵抗的A549细胞株的抗肿瘤作用被引量：3
- 2015年
- [目的]探讨TRAIL与舒尼替尼(sunitinib)体外不同用药方式下对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)抵抗的NSCLC A549细胞的抗肿瘤活性及其机制。[方法]实验分为对照组、TRAIL组、舒尼替尼组、TRAIL联合舒尼替尼组(T+S)、TRAIL序贯舒尼替尼组(T→S)和舒尼替尼序贯TRAIL组(S→T)。CCK8法检测TRAIL和舒尼替尼对A549细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测TRAIL和舒尼替尼作用后细胞周期变化及诱导的细胞凋亡;Western blot检测TRAIL和舒尼替尼作用后Akt、p-Akt蛋白表达的变化。[结果]T+S组及T→S组的抗增殖作用及诱导细胞凋亡的能力明显优于TRAIL组、舒尼替尼组及S→T组(P均<0.05)。细胞周期显示,TRAIL和舒尼替尼均能使细胞周期阻滞于G0/G1期,T+S组、T→S组对G0/G1期的阻滞作用明显增强。Western blot结果显示,TRAIL单独作用于A549细胞能明显上调p-Akt的表达,而舒尼替尼能下调p-Akt的表达;T+S组、T→S组、S→T组p-Akt的表达明显减少。[结论]舒尼替尼通过抑制TRAIL诱导的PI3K/Akt通路活化,增加TRAIL诱导的A549细胞凋亡。此外,两药物对A549细胞周期的特异性阻滞作用,也是诱导凋亡增加的原因之一。
- 邓立力邓洪滨王文秀韩红霞李逸文路丹黄雪香高迪王迪
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体舒尼替尼凋亡
- 细胞因子诱导的凋亡抑制因子1靶向miRNA预测及其在乳腺癌耐药细胞株中的表达被引量：3
- 2016年
- 目的：预测并筛选与细胞因子诱导的凋亡抑制因子1（CIAPIN1）基因3′非翻译区（3′UTR）高度匹配的目标miRNA，并初步探讨乳腺癌亲本细胞株及耐药细胞株中CIAPIN1蛋白及目标miRNA表达间的靶向关系。方法应用TargetScan、PicTarmi、miRanda数据库预测CIAPIN1基因3′UTR可能存在的种子结合位点miRNA，并根据文献筛选出目的miRNA。 Western blot法检测易成瘤的乳腺癌细胞株MCF-7、三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231、人表皮生长因子2（HER2）高表达的乳腺癌细胞株MDA-MB-453及相对应的3种耐紫杉醇的乳腺癌细胞株MCF-7／Tax、MDA-MB-231／Tax、MDA-MB-453／Tax中CIAPIN1蛋白的表达情况。实时定量聚合酶链反应（PCR）法检测乳腺癌亲本细胞及其耐药细胞中目的miRNA的表达情况。结果预测并筛选出目标miRNA，分别为miRNA143、miRNA571、miRNA647。Western blot法检测示，与乳腺癌亲本细胞相比，其耐药细胞中CIAPIN1蛋白相对高表达，差异有统计学意义[MCF-7／Tax比MCF-7、MDA-MB-231／Tax比MDA-MB-231、MDA-MB-453／Tax比MDA-MB-453的表达量（相对于内参GAPDH）分别为：0.80比0.21、0.70比0.31、1.00比0.35，均P＜0.05]。 PCR法检测示，与乳腺癌亲本细胞相比，耐药细胞中miRNA143、miRNA571、miRNA647相对低表达，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论预测并筛选出的与 CIAPIN1基因3′UTR 区存在种子结合位点的 miRNA 有miRNA143、miRNA571、miRNA647，各miRNA在耐药细胞株中低表达，而CIAPIN1蛋白相对高表达，提示这些miRNA可能通过靶向调控CIAPIN1基因参与了乳腺癌的多药耐药过程。
- 路丹王文秀曲迪孙文吉郭晓菲李逸文
- 关键词：多药耐药性微RNA
