李金磊
- 作品数：26 被引量：43H指数：4
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省杰出人才创新基金河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪细小病毒感染PK-15细胞抗病毒相关因子转录变化的分析被引量：11
- 2011年
- 为了解猪细小病毒(PPV)感染后引起干扰素及其相关细胞因子的反应,探讨宿主—病毒之间的作用关系,作者运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染PK-15细胞引起的病毒DNA量的变化和细胞因子IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、MX1、iNOS、2-5AS、RNase L和IRF-3的转录水平。结果显示,PPV感染PK-15细胞12h病毒开始大量迅速增殖,48h达到最高峰;PPV感染后可引起PK-15细胞中IFN-β、IFN-γ、IFNAR-1、IFNAR-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、Mx1、iNOS、2-5AS、RNase L和IRF-3的转录量显著增加,其中Mx1基因在24h转录量达到8 423倍。猪细小病毒感染可引起PK-15细胞抗病毒相关因子转录增加。
- 李厚伟魏战勇尹海燕陈红英李金磊韩志涛崔保安
- 关键词：猪细小病毒细胞因子PK-15细胞转录时相
- 河南省规模化养殖场大肠杆菌耐药性分析
- 目的：对河南省四个地市分离出的344株动物源性大肠杆菌耐药性进行分析，初步了解猪源和鸡源大肠杆菌耐药程度，为今后抗生素的应用提供一定指导。方法：采用MH肉汤微量稀释法测定分离菌株对12种抗菌药物的敏感性。结果：从350批...
- 郭芙蓉周红霞高延玲李金磊董鹏狄元冉刘宏伟班付国张发旺
- 关键词：动物源大肠杆菌耐药性分析抗菌药物
- 一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置
- 本实用新型公开了一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，包括箱体，其中，所述箱体上设有活动门、卤素灯开关、紫外灯管开关和总电源开关，所述箱体内顶部设有卤素灯，箱体两侧内壁上分别设置有至少一个紫外灯管。本...
- 班付国高延玲张发旺周红霞刘宏伟赵全成梁军张影曲登峰王世山朱松波高小玲雷东风彭峰陈阳黄京燕马俊焦玉萍李金磊董鹏常守海姚德新
- 文献传递
- 实时定量PCR对猪细小病毒自然感染猪体内病毒分布情况的探讨
- 【目的】探讨猪自然感染猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)后病毒在体内的分布情况,分析病毒对猪器官组织的嗜性,揭示猪细小病毒致病机制。【方法】利用已建立的猪细小病毒SYBRGreenⅠ实时定量PCR...
- 李金磊魏战勇韩志涛耿静微陈红英崔保安
- 关键词：猪细小病毒猪圆环病毒2型实时定量PCR
- 文献传递
- 猪流感病毒毒株感染对猪外周血淋巴细胞炎性因子转录时相的影响被引量：1
- 2014年
- 试验用猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV）（毒株）体外感染猪外周血淋巴细胞（Peripheral blood mononuclear cell，PBMC），利用real—timePCR方法对病毒感染不同时间细胞中的病毒量和炎性细胞因子mRNA表达量进行检测。结果显示，感染后1h就可检测到病毒，但病毒量相对较小；在24h时病毒开始大量增殖；在72h病毒量达到最高峰，为1h时20倍以上。IL-1βmRNA的表达量在48h增加到最高；IL-6mRNA的表达量在感染后1h内显著增加；IL-8mRNA的表达量在12h时达到最大量；IL-12P35mRNA的表达量在72h迅速上升，为对照的56．1倍；IL-12P40mRNA的表达量在1～2h表达量较高；IL-13在72h达到最大值，为对照的30．7倍；IL-17mR—NA的表达量在72h达到最大值，为对照的4．9倍；IL-18mRNA的表达量在12h达到对照的1．9倍。结果表明，SIV感染PBMC后，随着病毒的大量复制，多种炎性细胞因子表达量显著增加。
- 张云张龙现王亚宾李金磊陈雅君崔保安胡慧
- 关键词：猪流感病毒转录时相
- 猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5
- 2011年
- 为了建立猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法,利用RT-PCR技术扩增出猪传染性胃肠炎病毒N基因中324 bp的片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,纯化的质粒作为模板进行SYBR Green I荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪传染性胃肠炎病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达5×101拷贝数.μL-1,与猪伪狂犬病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒均不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床TGEVN基因的检测.
- 李金磊王亚宾崔保安陈丽颖张红英李珂珂魏战勇
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒N基因I荧光定量PCR
- 猪细小病毒感染Marc-145细胞后对其分泌白细胞介素6转录时相的影响被引量：4
- 2011年
- 为了更好地了解猪细小病毒(PPV)感染Marc-145后引起的细胞炎性反应,特别是白细胞介素6(IL-6)的反应,以及探讨宿主与病毒之间的作用关系,运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染Marc-145细胞后病毒DNA含量的变化和IL-6的分泌水平。结果表明,病毒感染后1 h就可以检测到病毒DNA,但病毒量相对较低,在感染48 h达到最高峰,为感染时的170倍左右。IL-6的表达量在感染后1 h、3 h、24 h显著增加,48 h下降至低于对照水平,说明猪细小病毒感染后可引起Marc-145细胞分泌IL-6的增加。
- 张彦桃梁秀丽刘芳李金磊耿静微魏战勇
- 关键词：MARC-145细胞白细胞介素6猪细小病毒转录时相
- 实时定量PCR对猪细小病毒自然感染猪体内病毒分布情况的探讨
- 目的：探讨猪自然感染猪细小病毒(Porcine Parvovirus，PPV)后病毒在体内的分布情况，分析病毒对猪器官组织的嗜性，揭示猪细小病毒致病机制。方法：利用已建立的猪细小病毒SYBR Green I实时定量PCR...
- 李金磊魏战勇韩志涛耿静微陈红英崔保安
- 关键词：猪细小病毒猪圆环病毒2型实时定量PCR
- 文献传递
- PCV2与PPV共感染猪外周血单个核细胞对其细胞凋亡相关因子表达水平的影响被引量：2
- 2013年
- 为分析猪圆环病毒2型(PCV2)与猪细小病毒(PPV)体外共感染对猪外周血单个核细胞(PBMC)细胞凋亡相关因子mRNA转录水平的影响,探讨PCV2和PPV共感染机制及宿主—病毒之间的作用关系,运用病毒滴度和相对荧光定量PCR技术,测定和分析PCV2和PPV感染PBMC后PCV2、PPV的病毒滴度含量及Bcl-2、FasL、p53、Caspase-8、PBR、TNF-α等的转录时相变化。结果表明:PCV2、PPV能够感染PBMC细胞,PCV2/PPV共感染中PCV2、PPV的含量分别在24h显著最高(P<0.001);PCV2、PPV单独感染和PCV2与PPV共感染PBMC后引起Bcl-2、FasL、p53、Caspase-8、PBR、TNF-αmRNA转录水平上升;在3h时PCV2/PPV共感染组PBR、P53mRNA转录水平显著高于PCV2、PPV单感染组(P<0.05),12h时PCV2/PPV共感染组FasLmRNA转录水平显著高于PCV2、PPV单感染组(P<0.05),24h时Bcl-2、Caspase-8mRNA转录水平显著高于PCV2、PPV单感染组(P<0.05),PCV2/PPV共感染组TNF-αmRNA转录水平显著高于PPV组(P<0.05),与PCV2组差异不显著。结论:PCV2与PPV共感染引起细胞凋亡相关因子mRNA转录水平上调,加速淋巴细胞凋亡,本试验为PCV2和PPV共感染机制研究提供了理论基础和试验依据。
- 郭东辉张莉娟李金磊寇亚楠王淑娟陈红英崔保安魏战勇
- 关键词：猪细小病毒细胞凋亡因子
- PCV-2感染对PK-15细胞抗病毒相关因子转录时相的影响被引量：2
- 2011年
- 【目的】了解猪圆环病毒2型(PCV-2)感染对PK-15细胞抗病毒相关因子转录时相的影响,探讨宿主-病毒之间的作用关系。【方法】运用荧光定量PCR技术,测定和分析PCV-2感染PK-15细胞后0(未接种病毒),1,6,12,24,48,72 h时病毒DNA含量及细胞因子IFN-βI、FN-γI、FNAR-1I、FNAR-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、MX1、NOS、RNaseL和IRF-3 mRNA转录水平的变化。【结果】PCV-2感染PK-15后1 h就可以检测到病毒DNA,在感染后24 h病毒开始大量迅速增殖,于感染72 h时达到最高峰。与0 h相比,PCV-2感染后IFN-βI、RF-3的表达量在感染12 h时显著增加,其他时间表达量下降;IFN-γ、MHC-Ⅱ的表达量在感染12 h时增加不明显,其他时间表达量下降;感染PCV-2后IFNAR-2、MHC-Ⅰ、MX1的表达量下降;RNaseL的表达量在感染12 h时显著减少,其他时间表达量增加,48 h时表达量增加显著;IFNAR-1的表达量在感染72 h时显著增加,其他时间表达量下降;未检测出NOS的表达。【结论】随着PCV-2病毒含量的增加,以上几种主要抗病毒因子的表达量不明显或有所下降,表明PCV-2感染PK-15细胞后可逃避机体的抗病毒作用机制。
- 韩志涛李金磊陈红英王淑娟耿静微翟阿官魏战勇崔保安
- 关键词：细胞因子PK-15细胞猪圆环病毒2型转录时相
