杨文天
- 作品数：19 被引量：30H指数：3
- 供职机构：华西医科大学更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三种利什曼原虫和我国新疆皮肤利什曼原虫kDNA分子杂交实验研究被引量：1
- 1997年
- 本研究自新疆克拉玛依地区皮肤利什曼病（CL）患者的皮肤病变组织内抽提微量的利什曼原虫kDNA，采用引物13A、13B进行PCR扩增，获120bP扩增区带（CL－PCR－AP），并转移到尼龙膜上，分别与地高辛（Digoxigenin－11－dUTP）标记的L．tropica、L．infantum、L．gerbillikDNA探针进行Southern印迹杂交。结果：病变组织内利什曼原虫kDNA的PCR扩增区带仅与LtropicakDNA探针有明显的杂交信号，而与L.infantum、L.gerbillikDNA探针杂交则呈阴性反应。结论：LtropicakDNA与新疆克拉玛依地区CL患者的CL－PCR－AP之间存在同源关系。
- 陈建平胡孝素郑学礼马莹杨文天
- 关键词：利什曼原虫分子杂交
- 杜氏利什曼原虫特异性kDNA片段扩增及用于内脏利什曼病诊断的研究被引量：6
- 1993年
- 本文报道了用杜氏利什曼原虫特异的一对寡核苷酸引物Ⅰ和Ⅱ进行PCR,扩增微环kDNA分子上一种特异性kDNA片段,进行杜氏利什曼原虫虫种鉴定和病原体检测。敏感性分析表明用此法能够检测到的最低模板DNA需要量为1fg,检测健康犬全血稀释的利什曼原虫前鞭毛体,最低可达2个/ml。扩增六种不同的利什曼原虫kDNA样品,在L.donovani四川人株、四川犬株和L.infantum出现阳性产物,其长度和设计扩增长度一致,扩增产物和地高辛标记的重组质粒探针pLK2斑点杂交结果表明为利什曼原虫kDNA序列。应用此对引物,检测8份内脏利什曼病患者骨髓样品和4份血清样品,经琼脂糖凝胶电泳,Southern杂交证实,分别有7例和2例阳性,显示出可喜的应用前景。
- 杨文天胡孝素
- 关键词：内脏利什曼病聚合酶链反应
- 用单克隆抗体夹心ELISA法检测棘球蚴病患者血清内CAg被引量：1
- 1993年
- 棘球蚴病人体内存在循环抗原(Circulating anti-gen,CAg)和循环免疫复合物(Circulating immunocom-plex,CIC)已被证实,它们和棘球蚴的生活状态有密切关系。检测CAg和CIC对于棘球蚴病的临床早期诊断、疗效考核、判断愈后及流行病学调查均具有重要意义。我们于1990年建立了一株杂交瘤细胞株13F5,持续分泌抗棘球蚴囊液重复抗原表位的单克隆抗体,以此为基础,作者建立了单克隆抗体夹心ELISA,用于棘球蚴病人血清内CAg的检测。
- 杨文天曹和洵李英杰
- 关键词：循环抗原ELISA棘球蚴病
- 内脏利什曼病患者骨髓及血内病原体特异性kDNA片段PCR扩增用于诊断的研究被引量：5
- 1997年
- 目的 :建立简易、准确的诊断内脏利什曼病和病原体鉴定技术。方法 :采用作者设计的杜氏利什曼原虫 ( L.d.)种特异引物 和 ,经 PCR扩增样品内病原体 k DNA2 97bp片段 ,检测 2 2例确诊内脏利什曼病 ( VL )患者骨髓、血、血清共 55份样品和 4例临床疑诊为黑热病患者的骨髓 (共 2 6例 ,59份样品 )。结果 :( 1) PCR法与骨髓涂片镜检符合率为 96.2 % ( 2 5/2 6) ;( 2 ) PCR法检测骨髓、血及血清的总阳性率为 95.4 % ( 2 1/2 2 ) ;( 3) PCR法检测 2 2例骨髓、 16例血样品及 17例血清样品 ,阳性率分别为 91% ( 2 0 /2 2 )、 68.8% ( 11/16)及 2 9.4 % ( 5/17)。 15例骨髓对照样品得自 9例白血病患者及 6例健康人。血及血清对照样品各得自 5例健康人。全部对照未见扩增产物 ,均为阴性。结论 :采用引物 和 进行 PCR扩增检测血内 k DNA特异片段诊断内脏利什曼病有较好前景。
- 胡孝素杨文天马莹陈建平何生全许庭玺谢孝全
- 关键词：内脏利什曼病骨髓病原
- 细粒棘球蚴(包虫)抗原4及抗原5的研究进展被引量：1
- 1989年
- 包虫病(Hydatidosis)的高特异性、高敏感性诊断方法的建立是包虫病免疫学研究的一个重要课题,了解细粒棘球蚴抗原的精细化学性质和生化性状,寻找特异性抗原组分是解决此问题的关键。本文就国内外对细粒棘球蚴主要抗原组分抗原4(antigen 4,Ag4)和抗原5(antigen5,Ag5)的研究现状作一综述。包虫病的血清学诊断通常采用包虫囊液作为抗原来源。由于其为多种组分的混合物,含有蛋白质、碳水化合物、虫体终代谢产物及其宿主组织成份,而且,不同宿主及同一宿主不同寄生部位的细粒棘球蚴,其囊液的抗原性相差很大(称为粗抗原),它和其它蠕虫病血清学交叉反应严重,敏感性也较低,严重限制了包虫病免疫诊断用抗原的标准化和临床诊断标准的统一,因此,
- 杨文天曹和洵
- 关键词：细粒棘球蚴包虫抗原包虫病
- 新疆皮肤利什曼病病原体SSUrRNA基因克隆与序列分析被引量：1
- 2000年
- [目的 ]分析新疆皮肤利什曼病病原体SSUrRNA基因序列 ,为该病原体种株鉴定分析提供实验依据。[方法 ]应用利什曼原虫特异引物R2 2 2及R333,PCR扩增SSUrRNA基因多变区的片段 ,克隆于T Easyvector,并以双脱氧链末端终止法进行序列测定 ,用DNASIS软件和GenBank微机联网检索分析所测XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因序列。[结果 ]XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因插入片段长度均为 394bp。XJCLP与L tropicaSSUrRNA基因 394bp序列存在 3个点突变 ,两者有 391个碱基相同 ,相似性为 99 2 %。XJCLP与L infantumSSUrRNA基因序列存在 3个点突变及 1个移码突变 ,两者有 390个碱基相同 ,类似性为99 0 %。L infantum与L tropica的SSUrRNA基因序列存在 1个移码突变 ,相似性为 99 7%。XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因序列一级结构与RNA二级结构均不同。经用GenBank检索本次所测XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因序列 ,该GenBank内尚无同类 394bp的SSUrRNA基因序列。[结论 ]XJCLP、L infantum及L tropica的SSUrRNA基因 394bp序列一级结构 ,二级结构存在差异。
- 郑学礼胡孝素杨文天章涛敬保迁
- 关键词：皮肤利什曼病克隆病原体
- 应用免疫金银染色法检测包虫病和恶性疟病人抗体的研究被引量：2
- 1991年
- 用免疫金银染色法检测了包虫病人和恶性疟病人血清中的特异性抗体,10份包虫病人血清均为阳性,20份恶性疟病人血清有19份为阳性。最高抗体滴度为1:1000000表明具有较高的敏感性。
- 李海燕周增桓李英杰杨文天
- 关键词：棘球蚴病免疫金银染色抗体
- 分泌抗包虫囊液抗原McAb杂交瘤细胞株的建立
- 1992年
- 应用Oriel法制备的包虫囊液抗原经腹腔注入供实验的小鼠,作为脾细胞供体。此脾细胞与不能分泌的骨髓瘤细胞株SP2/0和P3u_1相融合,以生成杂交瘤细胞株。用ELISA法从这些混合细胞培养基中筛选出上清液,用稀释法将上清液克隆,再克隆化之后,生成能分泌单克隆抗体、抗包虫囊液活性的杂交瘤,其染色体数目在80～100范围之内。单克隆抗体类及亚类13Fs和31G_(12)分别是IgG_1和IgA。DD和ELISA用于鉴定它们的敏感性和特异性。应用ELISA法比较杂交瘤和绦虫囊尾蚴液等其它寄生虫抗原制备物,包虫囊液和Pf抗原,表明单克隆抗体对包虫囊寄生虫有很高的特异性。
- 曹和洵杨文天李英杰欧阳明辉巢穗
- 关键词：包虫单克隆抗体杂交瘤ELISA
- 人体包虫病主要特异性免疫球蛋白的水平及其临床意义
- 1990年
- 本文报道了应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测包虫病人血清中抗包虫特异性免疫球蛋白(IgG和IgM)的水平并对其临床意义进行了初步探讨。48例正常人血清特异性IgG和IgM的假阳性检出串均为0％;24例囊尾蚴病人血清特异性抗包虫IgG和IgM的假阳性检出效分别为:33.4％;4.16％;42例包虫病患者血清特异性IgG和IgM的阳性检出率分别为:80.95％,66.67％;两者之差经统计学处理具有显著意义(p<0.05)。肝包虫特异性IgG的阳性检出率较肺包虫高,肺包虫特异性IgM的阳性检出率较肝包虫高。这提示患者对包虫的免疫应答和其寄生的位置有关;诱导产生的特异性免疫球蛋白主要为IgG类,特异性IgM的水平与包虫囊壁的完整与否以及检测方法的灵敏性、特异性有关。
- 曹和洵杨文天景涛周斌月
- 关键词：包虫病免疫球蛋白
- 杜氏利什曼原虫基因文库的构建及SSU rDNA基因的克隆和筛选被引量：1
- 1995年
- 采用新型载体（ＬａｍｂｄａＧＥＭＲ－１１ｖｅｃｔｏｒ系统）完成了杜氏利什曼原虫四川人分离株（简称Ｌ．ｄ．四川人株）的基因组ＤＮＡ大片段克隆。重组噬菌体总数为１．５×１０６。采用地高辛标记的Ｌ．ｄ．四川人株ＳＳＵｒＤＮＡ扩增产物探针筛选文库，获得３个含有Ｌ．ｄ．四川人株ｒＤＮＡ插入片段的重组噬菌体克隆，为今后的亚克隆和ＳＳＵｒＤＮＡ可变区及间隔区结构和功能研究打下了基础。
- 陈建平杨文天胡孝素
- 关键词：杜氏利什曼原虫SSURDNA克隆基因文库
