杨洁
- 作品数：13 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 抗Ⅰ型糖尿病融合基因HSP65-6×P277在烟草中的表达被引量：1
- 2012年
- 为了研究抗Ⅰ型糖尿病融合蛋白质基因HSP65-6×P277在植物中的表达,构建了含有融合基因HSP65-6×P277的植物表达载体pCAMBIA2301-HSP65-6×P277,通过农杆菌介导法将重组载体转入烟草,利用卡那霉素作为植物筛选标记,获得含有抗Ⅰ型糖尿病基因的16株转基因烟草植株。通过PCR、半定量RT-PCR及SDS-PAGE蛋白质电泳等方法检测,初步验证在抗性烟草植株中融合基因HSP65-6×P277在mRNA和蛋白质水平上进行了表达。
- 郑卿郭书巧杨洁吴洁刘景晶倪万潮
- 关键词：烟草植物疫苗
- 霍乱毒素B亚单位与胰岛素B链结构类似多肽融合蛋白的制备
- 2012年
- 为了在大肠杆菌中表达霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)与胰岛素B链(9-23)肽段结构类似多肽(Ins B(9-23))的融合蛋白,使用基因工程方法构建了CTB与Ins B(9-23)的融合基因CTB-Ins B-X若干,并将融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌株经乳糖诱导后,其表达产物经过12%SDS-PAGE分析表明该菌株可以包含体形式表达融合蛋白,并制备得到纯度较高的重组蛋白。该重组蛋白的包含体经过变性、复性后,可以在体外自组装成五聚体结构。GM1-ELISA分析结果表明,重组蛋白在体外可以与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异性结合,表明该融合蛋白保持了CTB形成五聚体的生物活性。
- 杨洁王华倩熊祺琰黄文睿李泰明吴洁曹荣月刘景晶
- 关键词：霍乱毒素B亚单位包含体神经节苷脂GM1
- 嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的构建及表达
- 2013年
- 目的 构建嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,并研究该嵌合抗原受体在T细胞中的表达.方法 利用常规分子克隆技术将编码Igκ信号肽、抗G250单链抗体及信号结构CD8-28BBZ的编码序列拼接起来,并将得到的融合基因片段插入慢病毒表达载体pLVX-IRES-ZsGreen中,采用酶切及测序鉴定.慢病毒感染T细胞后,通过荧光显微镜、Western blot、流式细胞术检测G250-CD8-28BBZ在T细胞中的表达.结果 双酶切及测序结果显示重组质粒pLVX-G250-CD8-28BBZ构建正确;慢病毒感染后的T细胞能发出绿色荧光;T细胞表达的G250-CD8-28BBZ分子大小正确;慢病毒感染2周后,G250-CD8-28BBZ在T细胞中的阳性表达率为45.2%.结论 成功构建了嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,该嵌合抗原受体能够在T细胞内高效稳定表达.
- 张青李彩红杨洁李慧忠裴冬生郑骏年
- 关键词：肿瘤免疫治疗G250慢病毒
- 热休克蛋白65与βhCG多表位融合蛋白疫苗的抗黑色素瘤研究被引量：2
- 2015年
- 选取HSP65-X10-βhCGCTP37融合蛋白作为免疫原,观察其对小鼠黑色素瘤B16-F10的体内抑制作用,以及对荷瘤小鼠生存期的影响,并对其抗肿瘤的作用机理进行初步探讨。以制备的HSP65-X10-βhCGCTP37蛋白免疫C57BL/6J小鼠,2 w免疫1次,共4次。第4次免疫后的第2 w,进行肿瘤攻击实验。HSP65-X10-βhCGCTP37激发的免疫应答对于小鼠黑色素瘤的攻击起到了有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,实验组小鼠的平均肿瘤重量显著降低(P<0.05);并有效延长了荷瘤鼠的生存期;小鼠的黑色素移植瘤的肿瘤病理切片结果显示,疫苗对肿瘤细胞的体内生长有明显的抑制作用,核分裂减少,淋巴细胞浸润增加,有灶性坏死。HSP65-X10-βhCGCTP37蛋白疫苗能有效地抑制小鼠黑色素瘤的生长。
- 杨洁程乾陆峥李曼曼袁玉婷曹荣月
- 关键词：热休克蛋白65蛋白疫苗黑色素瘤
- 一种具有抗血小板聚集活性的提取物
- 本发明属于中药技术领域，本发明涉及一种具有抗血小板聚集活性提取物及其制备方法。其制备方法为以麦冬药材为原料，用有机溶剂提取，大孔树脂分离，乙醇洗脱，干燥而得。本发明的提取方法简单、易行，适于工业化生产。得到的提取物具有较...
- 余伯阳张剑李玲玲杨洁
- 文献传递
- 一种谷氨酸脱羧酶65相关肽融合蛋白的制备及其治疗1型糖尿病的药效研究被引量：1
- 2009年
- 使用基因工程方法构建了霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)与谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase65,GAD65)串联三肽GADⅢ(包括p217—236,p524—538,p290—306)的融合基因CTB-GADⅢ。将融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌株经乳糖诱导后,其表达产物经过15%SDS-PAGE分析表明该菌株可以以包涵体形式表达融合蛋白,Mr约为17.6k。含有CTB-GADⅢ重组蛋白的包涵体经过变性、复性、纯化后,可以得到五聚体结构的CTB-GADⅢ。神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)结合实验表明重组CTB-GADⅢ蛋白可以与GM1特异性结合,表明该融合蛋白保持了CTB形成五聚体的生物活性。使用该重组蛋白在NOD小鼠8周龄、10周龄和12周龄时滴鼻免疫小鼠共3次,可以显著降低小鼠的发病率,达到治疗1型糖尿病的作用。
- 王华倩张会勇杨洁鲁勇李泰明金亮曹荣月刘景晶
- 关键词：谷氨酸脱羧酶65霍乱毒素B亚单位治疗1型糖尿病NOD小鼠
- Rhodiolin在制备治疗人甲状腺乳头状癌药物中的应用
- 本发明涉及Rhodiolin的新用途，其公开Rhodiolin在制备治疗人甲状腺乳头状癌药物中的应用。本发明通过体内外实验证明，Rhodiolin能有效治疗人甲状腺乳头状癌，抑制肿瘤细胞增殖并诱导其发生凋亡，下调甲状腺乳...
- 刘畅薄家强王丽杨洁
- 一种免佐剂具有防治1型糖尿病作用的免疫调节剂
- 本发明提供了一种能用于预防和治疗1型糖尿病的免疫调节剂。单一抗原多肽难以在机体已经发生自免疫攻击后重建免疫耐受，阻断自免疫攻击。将三个抗原表位多肽基因(源于人谷氨酸脱羧酶65分子)依次串联后连接到霍乱毒素B亚基基因下游，...
- 刘景晶王华倩孙云霄熊琪琰杨洁金亮李建平李泰明曹荣月吴洁
- 文献传递
- 计算机辅助具有抗血小板聚集活性的四氢异喹啉类化合物的合成、药理活性以及三维构效关系研究
- 杨洁
- 关键词：抗血小板药理活性
- 胃癌组织、外周血中活性氧调节因子1表达与胃癌临床病理特征关系研究被引量：3
- 2015年
- 目的：检测活性氧调节因子1（ reactive oxygen species modulator 1，Romo1）在胃癌组织及外周血中的表达，分析其与胃癌临床病理特征的相关性及其意义。方法采用免疫组化S－P法检测40例胃癌患者癌组织及相应的癌旁组织（距癌组织边缘＞5 cm）中Romo1蛋白表达；同时用酶联免疫吸附（ ELISA）法检测40例胃癌患者及40例健康对照者外周血中Romo1蛋白浓度。结果免疫组化结果显示，胃癌组织中Romo1蛋白阳性表达率（72．5％）显著高于癌旁组织（17．5％）（P＜0．01）。胃癌患者外周血中Romo1蛋白浓度为（289．0±51．3）ng／L，显著高于对照组（75．2±18．9）ng／L（P＜0．01）。癌组织中Romo1蛋白表达及外周血中Romo1蛋白浓度均与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移相关（P＜0．05或P＜0．01），胃癌患者癌组织与外周血中Romo1蛋白表达呈正相关（r＝0．774，P＜0．01）。结论 Romo1在胃癌患者癌组织及外周血中高表达，其表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关，Romo1可能在胃癌的发生过程中起到重要作用；外周血中Romo1浓度能够可靠地反映癌组织中Romo1蛋白表达情况，可作为一种用于胃癌诊断、病情监测的新肿瘤标志物。
- 严海翠杨洁邱祥南吕游王红兵
- 关键词：胃癌
