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特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法: 本发明涉及特异性鉴别羊乳中掺加牛乳的单克隆抗体及其制备方法。市场上常出现羊乳中掺加牛乳的现象，以次充好，影响羊乳质量。本发明以脱脂牛乳为抗原，免疫BALB/c小鼠，分离脾细胞与SP2/0瘤细胞进行细胞融合，筛选出具有稳定...; 陈德坤刘鹤媛张洪杰桑锋锋周铭岳进华霍宁宁杨雯昱高洋赵燕青; 文献传递

羊口疮病毒刺激山羊淋巴细胞增殖及细胞因子产生特性的研究被引量：1: 2015年; 为研究促炎性细胞因子IL-17是否参与羊口疮炎症的发生,用羊口疮强、弱毒株分别体外刺激山羊外周血单个核淋巴细胞(PBMCs),采用real-time PCR方法检测IL-17及与Th17细胞分化并活化相关的细胞因子mRNA水平。结果表明用羊口疮病毒强毒株刺激山羊PBMCs后,IL-17转录水平升高;与Th17细胞分化并活化相关的细胞因子如TGF-β、IL-1β、IL-6和IL-23P19转录水平变化明显。证明羊口疮病毒强毒株能刺激羊PBMCs增殖,使初始T细胞分化为Th17细胞并活化分泌IL-17,从而介导炎症反应。; 杨雯昱周铭岳进华霍宁宁刘鹤媛陈德坤; 关键词：羊口疮病毒 IL-17 免疫应答炎症

羊口疮病程中Th17细胞相关细胞因子的变化: 羊接触传染性脓疱皮炎,或称羊口疮（Contagiouts Ecthyma,CE or ORF）,是目前世界上养羊生产中的常见疫病之一,在我国主要养殖地区吉林、宁夏、云南、河南、湖北、新疆和陕西等均有流行报道,山羊比绵羊更...; 杨雯昱; 关键词：羊口疮免疫病理 IL-17 TH17细胞; 文献传递

小熊猫IL-17的克隆及原核表达被引量：1: 2014年; 为制备小熊猫白介素17(IL-17)表达产物,提取活化的小熊猫外周血单个核细胞总RNA,合成cDNA,以此为模板克隆IL-17的成熟肽编码序列,将其重组到原核表达载体pET-32a,并将其转入到BL-21(DE3)中,进行序列分析。重组载体经IPTG诱导表达,表达产物经镍柱纯化。结果显示,小熊猫IL-17的CDS区由462bp组成,含23个氨基酸组成的信号肽,重组IL-17由130个氨基酸组成。SDS-PAGE显示,原核表达产物在诱导温度25℃,IPTG浓度0.5mmol/L,诱导时间20h的条件下,能够获得最佳表达。; 赵玄多徐素慧杨雯昱高洋修云芳陈玉村陈德坤; 关键词：小熊猫白介素基因克隆原核表达 IL-17

羊伪结核抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：7: 2016年; 【目的】建立羊伪结核棒状杆菌抗体的间接ELISA检测方法。【方法】分别用不同浓度的伪结核棒状杆菌菌体抗原和培养上清可溶性抗原包被酶标板,用脱脂奶粉封闭酶标板,设置封闭时间分别为1.0,1.5和2h,再用不同稀释度的血清(1∶100,1∶200,1∶400和1∶800)与之反应,以此优化间接ELISA反应条件,确定阳性结果判定的临界值。对间接ELISA方法的特异性和重复性进行考察,并在此基础上对采集的临床样本进行检测。【结果】选用伪结核棒状杆菌菌体为包被抗原,最佳包被抗原菌体密度为OD600=0.08,血清的最佳稀释度为1∶400,封闭时间为2h,阳性血清的临界值为0.329。该抗体检测方法可特异性地检测出伪结核阳性血清,羊口疮阳性血清、羊痘阳性血清、乳房炎阳性血清均呈阴性反应;组内,组间变异系数<10%。该方法对临床样本的检测结果与实际患病状况一致。【结论】成功建立了伪结核抗体间接ELISA检测方法,该方法特异性强、重复性好,可用于临床诊断和批量血清学检测。; 霍宁宁朱伟英高洋杨雯昱岳进华赵燕清陈德坤; 关键词：伪结核棒状杆菌间接酶联免疫吸附试验

山羊IFN-γ基因的克隆表达与多克隆抗体制备被引量：1: 2014年; 为获得山羊IFN-γ重组蛋白,提取山羊外周血淋巴细胞总RNA,反转录得到cDNA,以此为模板经PCR扩增获得IFN-γ的ORF区,构建重组克隆载体。经PCR扩增得到编码山羊IFN-γ成熟肽的基因序列,连入重组表达载体pET-32a,转入BL21(Codon Plus)感受态细胞中,测序并分析。重组表达载体经IPTG诱导后,对产物进行SDS-PAGE分析,并过镍柱纯化。用获得的纯化蛋白免疫家兔制备抗体。结果显示,编码山羊IFN-γ成熟肽部分的片段长432bp;SDS-PAGE分析显示,融合蛋白大小约为34.9ku,在30℃条件下,以0.3mmol/L的IPTG诱导6h,可得到大量可溶性表达的目的蛋白;间接ELISA测定制得的多克隆抗体效价为1∶106。; 安贝赵玄多杨雯昱侯伟杰高洋陈德坤; 关键词：山羊 IFN-Γ 原核表达抗体制备

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杨雯昱