查智辉
- 作品数:10 被引量:11H指数:1
- 供职机构:浙江海洋学院海洋与渔业研究所更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省科技厅项目浙江省大学生科技创新项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 溶藻弧菌诱导对三疣梭子蟹血淋巴非特异性免疫水平的影响被引量:8
- 2011年
- 以平均体质量为(162±26)g雌性三疣梭子蟹为试验对象,注射组从游泳足第一关节基膜注射200μL浓度为2.4×107 CFU/mL的溶藻弧菌菌悬液,对照组注射等量无菌生理盐水。各组在注射0、24、48、72、96 h后随机取9只三疣梭子蟹,从游泳足基膜部位抽取血淋巴,测定血淋巴的血细胞总数、大颗粒细胞比例、血清蛋白、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、一氧化氮和诱导型一氧化氮合成酶等非特异性免疫指标。结果表明,遭受低剂量的溶藻弧菌侵袭后,三疣梭子蟹血细胞总数迅速降低(P<0.05),与对照组相比降低36%,而大颗粒细胞比例则先上升(P<0.05),72 h后恢复至正常水平;血清蛋白含量则无明显变化;血清中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性也迅速增加,并分别在24、72 h达到峰值(P<0.01,P<0.05),在96 h后两种酶的活性均恢复至对照组水平;血清中一氧化氮含量及诱导型一氧化氮合成酶活性则稳步增加,并在96 h达到峰值(P<0.01)。研究证实低剂量的溶藻弧菌能刺激三疣梭子蟹调动血细胞、酸、碱性磷酸酶、一氧化氮合成酶系统进行免疫防御,但是各非特异性免疫指标大多具有明显的时间效应,响应速度有较大差异。
- 谢建军许文军施慧查智辉
- 关键词:三疣梭子蟹溶藻弧菌血淋巴酸性磷酸酶一氧化氮一氧化氮合成酶
- 白斑综合征病毒(WSSV)和血卵涡鞕虫多重PCR检测方法的建立被引量:1
- 2010年
- 根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)和血卵涡鞕虫在GenBank中已发表的基因序列分别设计2对引物,建立了一种同时检测WSSV和血卵涡鞕虫的多重PCR方法,即通过一次PCR反应,同时扩增WSSV和血卵涡鞕虫2种病原的核酸。应用该方法分别对已知WSSV和血卵涡鞕虫阳性的样品进行PCR扩增,分别扩增出了2条特异性带———467 bp(WSSV)和168 bp(血卵涡鞕虫),与实验设计相符,且与常规PCR检测结果一致。特异性实验结果也表明,该方法对WSSV和血卵涡鞕虫的检测均具很好的特异性,而对三疣梭子蟹其它常见病原、梭子蟹DNA样本的PCR扩增结果均为阴性。10份临床样品检测结果表明该检测结果与常规PCR检测结果符合率达到100%,说明所建立的多重PCR方法可以用于三疣梭子蟹2种病原的快速检测和鉴别诊断,对养殖三疣梭子蟹的疾病及时防控具有重要意义。
- 施慧许文军谢建军查智辉徐汉祥史海东
- 关键词:三疣梭子蟹多重PCR对虾白斑综合征病毒
- 血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与初步应用被引量:1
- 2011年
- 用血卵涡鞭虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,经常规融合、间接ELISA方法筛选,将所得阳性克隆再经3次亚克隆后,共获得3株针对血卵涡鞭虫的单克隆抗体(2B2、3G4、4G7),单克隆抗体亚类鉴定表明,三者为IgG类抗体。用筛选的杂交瘤细胞株制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为5.12×10-4和8.00×10-4。进一步利用单克隆抗体建立间接荧光抗体方法对单抗特异性进行鉴定,阳性虫体被染上黄绿色荧光,而正常梭子蟹血淋巴则未被染色。用单克隆抗体和多克隆兔抗血清以羊抗鼠HRP-IgG为酶标抗体,建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELISA方法,该方法对血卵涡鞭虫阳性标本检测符合率为100%。结果表明,制备的单克隆抗体效价高、特异性好,可用于血卵涡鞭虫的早期临床诊断。
- 查智辉施慧许文军谢建军孙忠
- 关键词:三疣梭子蟹血卵涡鞭虫单克隆抗体双抗体夹心ELISA法
- 溶藻弧菌诱导对三疣梭子蟹血淋巴非特异性免疫水平的影响
- 以平均体重为(162±26)g雌性三疣梭子蟹为试验对象,注射组从游泳足第一关节基膜注射200 μ L浓度为2.4×107 cells/mL的溶藻弧菌菌悬液,对照组注射等量无菌生理盐水.各组在注射0、2...
- 谢建军许文军施慧查智辉
- 关键词:三疣梭子蟹溶藻弧菌血淋巴酸性磷酸酶一氧化氮一氧化氮合成酶
- 三疣梭子蟹血卵涡鞭虫单克隆抗体研制及其初步应用
- 血卵涡鞭虫是近年引起三疣梭子蟹、拟穴青蟹等经济甲壳类死亡的重要病原,其宿主范围分布广、致病性强,死亡率极高,给浙江沿海三疣梭子蟹、拟穴青蟹的大规模养殖造成了重大的经济损失。通过临床取样,大部分病蟹肌肉白浊、蟹盖内充满大量...
- 查智辉
- 关键词:三疣梭子蟹血卵涡鞭虫双抗体夹心ELISA法
- 文献传递
- 南美白对虾苗种白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下及造血组织坏死病病毒(IHHNV)携带情况调查
- 养殖过程中病毒病的频发是导致对虾养殖失败的最重要原因之一,本文对2009~2010年间对浙江省鄞州、慈溪、象山、舟山、三门等地近22家对虾苗种生产场的对虾苗种携带虾白斑合征病毒(White spot syndrome v...
- 施慧许文军谢建军查智辉徐汉祥史海东
- 关键词:白斑综合征病毒
- 血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与鉴定
- 目的 制备抗血卵涡鞭虫的单克隆抗体(McAb)并研究其初步应用.方法 用血卵涡鞭虫可溶性抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,经常规融合,以间接ELISA方法筛选出分泌高滴度、高特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并使用所得单...
- 查智辉施慧谢建军许文军
- 关键词:血卵涡鞭虫可溶性抗原单克隆抗体夹心ELISA法
- 网箱养殖鮸鱼假单胞菌病病原的分离与鉴定
- 2008年4-5月,浙江舟山佛度网箱养殖鮸鱼发生疾病并造成规模死亡,主要症状表现为肝、脾、肾脏有许多大小为0.5-1mm的白色结节.从具有典型白色结节症状鮸鱼的肝、肾脏及结节部位分离到一菌株MY-1,人工感染实验表明该菌...
- 查智辉许文军施慧谢建军张静
- 关键词:鮸鱼病原假单胞菌RRNA
- 曼氏无针乌贼溃疡病病原菌哈维氏弧菌的分离与鉴定
- 2010年4月,浙江舟山某养殖场人工养殖的曼氏无针乌贼发生溃疡病并大批死亡.从患病乌贼溃疡体表分离到一株优势菌W10408.经形态学观察、生理生化特性分析和HSP60基因序列测定确定菌株W10408为哈维氏弧菌(Vibr...
- 施慧许文军谢建军查智辉徐汉祥史海东
- 关键词:曼氏无针乌贼哈维氏弧菌
- 几种常见水产药品对日本黄姑鱼幼鱼的急性毒性试验
- 在温度26.5~29.5℃、盐度25 ~ 26、pH 7.95、静水条件下,采用生物毒性试验方法用高锰酸钾、二溴海因、硫酸铜硫酸亚铁合剂(5:2)、敌百虫、阿维菌素、二氧化氯等6种水产药物对日本黄姑鱼幼鱼进行了急性毒性实...
- 查智辉许文军阮伟荣
- 关键词:二溴海因敌百虫阿维菌素急性毒性