柳倩
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国农业大学食品科学与营养工程学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 以无机培养基高效表达猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂的方法
- 本发明涉及以无机培养基高效表达猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂的方法，其为将含高拷贝重组质粒的巴斯德毕赤酵母菌株GS115160107种子液接入7L发酵罐中，以3L培养基量为发酵体系，经初始甘油消耗期、分批甘油补料期及甲醇补加诱导...
- 梅晓宏柳倩韩诗雯陈西
- 文献传递
- 源于GAP启动子的毕赤酵母组成型表达系统的研究进展被引量：6
- 2013年
- 巴斯德毕赤酵母表达系统是目前应用非常广泛的外源基因真核表达系统。与源于醇氧化酶启动子(pAOX1)的诱导型表达系统相比,源于三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(pGAP)的毕赤酵母组成型表达系统在表达外源蛋白时不需使用甲醇,表达时间短,并且在高密度发酵时采用连续发酵模式,因此成为近年研究的热点。本文分别从pGAP表达载体的构建、碳源、基因拷贝数、信号序列、高密度发酵等方面对该表达系统进行了综述,以期为其在蛋白生产中的深入研究和应用提供参考。
- 曹东艳柳倩贺晓云梅晓宏
- 关键词：巴斯德毕赤酵母GAP启动子外源蛋白组成型表达
- 重组猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂发酵条件优化被引量：3
- 2016年
- 在获得含高拷贝猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂基因的重组菌株GS115基础上,通过分析甘油加入量、甲醇添加量、山梨醇与甲醇添加比例、诱导初始p H、诱导时间、培养基类型对重组猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂(kw PMEI1)表达量的影响,优化了摇瓶发酵条件。结果表明:甘油加入量3%(v/v)、甲醇添加量1%(v/v)、山梨醇溶液(100%,w/v)和甲醇(分析纯)以体积比为1∶1的比例添加、p H5.5、在BMMY培养基中诱导表达5 d为最佳条件。该重组蛋白kw PMEI1的表达量最高可达700.302 mg/L。
- 李晓红柳倩王蓓梅晓宏
- 关键词：毕赤酵母GS115发酵条件
- 新型转基因植物及其食用安全性评价对策研究进展被引量：14
- 2013年
- 随着转基因技术的快速发展,以药用、工业用为代表的新一代转基因植物及复合性状转基因植物不断涌现。与此同时,对其进行食用安全性评价的技术体系却明显滞后。本文主要对药用、工业用及复合性状转基因植物的研究进展进行综述,并对其食用安全评价对策进行阐述和分析,以期为促进我国转基因技术的健康发展提供一定的技术支持。
- 梅晓宏许文涛贺晓云曹思硕李晓红柳倩黄昆仑
- 关键词：转基因技术转基因植物
- 用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达重组猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂被引量：3
- 2014年
- 目的构建组成型表达重组猕猴桃果胶甲酯酶抑制剂(kiwi pectin methylesterase inhibitor,kwPMEI)的毕赤酵母(P.pastoris)GS115工程菌株,探索碳源(葡萄糖、甘油、甲醇)对重组菌表达kwPMEI的影响,纯化kwPMEI并鉴定其对番茄果胶酶的抑制活性。方法应用PCR方法从P.pastoris GS115染色体中扩增了三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(pGAP),以其取代诱导型表达载体pPIC9K-kwPMEI上的醇氧化酶启动子(pAOX1),构建了组成型表达载体pGAP9K-kwPMEI,并转化至GS115中。用Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析目的蛋白表达情况,镍柱亲和层析纯化目的蛋白,并用凝胶扩散方法鉴定其抑制活性。结果重组毕赤酵母工程菌株成功组成型表达了kwPMEI,48 h即达到最大表达水平,表达量约为66 mg/L。并且以甘油为碳源时kwPMEI表达量最高。成功分离纯化了kwPMEI,并经凝胶扩散方法检测表明其具有抑制活性。结论成功构建了组成型分泌表达kwPMEI的毕赤酵母菌株,为kwPMEI在果蔬汁中的进一步应用奠定了基础。
- 曹东艳韩诗雯陈董鑫柳倩贺晓云许文涛梅晓宏
- 关键词：组成型表达碳源毕赤酵母
