桂静
- 作品数：32 被引量：133H指数：8
- 供职机构：深圳市慢性病防治中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项深圳市科技计划项目(医疗卫生类)更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 荧光染色法与萋-尼氏抗酸染色法检测痰液中抗酸杆菌的对比观察
- 目的评价荧光染色法在痰涂片抗酸杆菌镜检中的临床价值。方法收集330例结核病门诊就诊病人的痰液,用荧光染色法与萋-尼氏抗酸染色法检测痰液中抗酸杆菌,比较两种方法的阳性检出率及阳性分级标准差异。结果荧光染色法阳性检出率为21...
- 桂静王峰
- 关键词：荧光染色法抗酸杆菌
- 文献传递
- 深圳地区结核分枝杆菌耐药分离株分子特征与表型特征相关性研究被引量：8
- 2010年
- 目的 研究深圳地区2007-2008年分离的结核分枝杆菌耐药株分子特征与表型特征的相关性.方法 参照WHO/IUATLD标准,使用L-J药敏培养基,1%比例法药敏试验筛选针对异烟肼、利福平、链霉素、氧氟沙星、卡那霉素5种药物耐药或敏感的临床分离株,通过PCR扩增经筛选菌株的rpoB、katG、rpsL、rrs1、gyrAB、rrs2基因的相关序列,运用DNAStar和BLASTN进行序列分析,应用二倍稀释法测定其表型最低抑菌浓度（MIC）值.结果 筛得实验菌株123株,其中耐药株73株,全敏感株50株.异烟肼耐药株katG基因突变率为84.6%,突变位点全部为S315T或S315N.利福平耐药株rpoB基因突变率为93.6%,突变位点主要集中在S531L（30/44,68.2%）和H526D（9/44,20.5%）或H526R（1/44,2.3%）.链霉素耐药株以rpsl基因突变为主,突变位点为K43R（19/27,70.4%）和K88Q（6/27,22.2%）;rrs1基因突变较少见,仅491C→T（2/27,7.4%）及513A→C（1/27,3.7%）;2个基因突变率合计为65.9%.氧氟沙星耐药株突变率为100%,以gyrA基因突变为主,突变位点包括D94A（2/11,18.2%）、S91P（4/11,36.4%）和A90V（3/11,27.3%）,3个突变位点总突变率为81.8%（9/11）;S95T存在于所有氧氟沙星耐药株及部分全敏感株gyrA基因中;gyrB未发现突变.卡那霉索耐药株rrs2基因突变率为61.1%;突变位点为1400 A→C（9/11,81.8%）和1483 G→T（2/11,18.2%）.其他突变位点在全敏感株中未发现.临床耐药株同一耐药组别所包含耐药类型不同,相关耐药基因的突变位点相同,其MIC值基本一致;相关耐药基因突变位点不同,其MIC值存在明显差异.结论 结核分枝杆菌耐药基因突变存在一定的地域特性,表型特征因耐药基因突变位点不同存在耐药程度差异.
- 桂静王峰李金莉罗道泉姚立泰
- 关键词：结核分枝杆菌耐药聚合酶链反应分子特征
- PCR熔解曲线法筛查结核分枝杆菌链霉素和乙胺丁醇耐药性被引量：4
- 2012年
- 目的利用PCR熔解曲线法快速筛查结核分枝杆菌（MTB）对链霉素、乙胺丁醇耐药性，并与药敏试验结果比较，评价其应用价值。方法收集深圳市2007-2009年331株MTB临床分离株，应用PCR熔解曲线法检测embB基因306、378-380、406和497、rpsL基因43、88及r阳基因513-517、905-908位点耐药突变，并与药敏试验结果比较。结果以药敏试验结果为标准，PCR熔解曲线法检测MTB链霉素耐药突变的敏感性为78．6％、特异性为90．1％、准确性为86．7％；检测MTB乙胺丁醇耐药突变的敏感性为83．0％、特异性为93．3％、准确性为91．8％。PCR熔解曲线法与药敏试验检测结果具有很好的一致性。结论PCR熔解曲线法能够快速、特异地检测MTB对链霉素、乙胺丁醇耐药突变，可用于临床筛查。
- 王峰胡思玉桂静崔运勇刘小立李庆阁
- 关键词：结核分枝杆菌耐药性链霉素乙胺丁醇
- 脓肿分枝杆菌复合群亚种鉴定的方法学研究被引量：4
- 2014年
- 目的 研究脓肿分枝杆菌复合群亚种鉴定的有效方法.方法 将19株克拉霉素敏感的脓肿分枝杆菌临床分离株扩增hsp65和rpoB基因相关序列,分别用Mega软件和PhyML软件单独及联合对其构建系统进化树以鉴定其亚种,对鉴定结果不一致的菌株进行16S-23S间隔序列测序加以判定.扩增分析rrl和erm（41）基因特征,采用微量肉汤稀释法对菌株进行克拉霉素诱导耐药检测,分析各亚种的基因表型模式.结果 19株脓肿分枝杆菌复合群中,hsp65和rpoB基因鉴定结果一致的有Mycobacterium massiliense（M.massiliense）亚种10株、Mycobacterium abscessus（M.abscessus）亚种4株和Mycobacterium bolletii（M.bolletii亚种1株,其余4株采用hsp65基因分类为M.massiliense,采用rpoB基因分类为M.abscessus,最终采用间隔序列测序鉴定为M.massiliense.rrl基因分析19株均未发现与克拉霉素耐药相关的突变.erm（41）基因分析结果表明,M.abscessus的-35位启动子序列与M.bolletii和M.massiliense不同,第28位碱基存在多态性（T28或C28）,M.bolletii和M.massiliense的-35位启动子序列及第28位碱基分子特征一致.14株M.massiliense菌株均存在erm（41）基因276 bp长片段和2 bp短片段缺失,4株M.abscessus和1株M.bolletii均携带完整的erm （41）基因.克拉霉素诱导耐药试验结果显示,3株携带T28的M.abscessus（菌株号：CI02、CI04和CI12）和1株M.bolletii均可诱导产生克拉霉素高水平耐药,其余14株M.massiliense和1株携带C28多态性的M.abscessus（菌株号：CI17）对克拉霉素始终保持敏感.暂未发现-35位启动子序列差异与克拉霉素诱导耐药相关.结论 hsp65基因适用于脓肿分枝杆菌复合群亚种分子鉴定,且脓肿分枝杆菌复合群的erm（41）基因分子特征及相关克拉霉素诱导耐药表型特征均有亚种特异性,hsp65基因和erm（41）基因检测可用于脓肿分枝杆菌复合群亚种鉴定.
- 桂静李金莉洪创跃王峰
- 关键词：分枝杆菌属热休克蛋白质类克拉霉素诱导耐药
- 实时聚合酶链反应熔解曲线法快速检测耐多药结核分枝杆菌被引量：9
- 2011年
- 目的应用实时PCR熔解曲线法快速检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性，并与比例法检测结果进行比较。方法收集深圳市2007--2009年耐药监测项目、全国耐药基线调查项目和深圳市慢性病防治中心门诊患者临床分离株311株，采用实时PCR熔解曲线法检On,0rpoB基因耐药突变热点区、ahpC启动子区（硝～30及-15～-3位点）、inhA启动子区（-7～-8位点）、inhA94和katG315位耐药突变，并与耐药基因测序及表型药敏试验结果进行比较。以比例法药敏试验结果作为MTB药敏试验的金标准，评价实时PCR熔解曲线法的敏感度、特异度与金标准的符合率。结果实时PCR熔解曲线法2～3h即可完成检测，扩增和结果判定在1个反应管内完成。检测利福平耐药的敏感度为97．8％，特异度为97．1％，准确性为97．4％；检测异烟肼耐药的敏感度为86．6％，特异度为98．7％，准确性为92．6％。对耐多药MTB的检测敏感度为88．6％，特异度为100．O％，重复性为100．0％。结论实时PCR熔解曲线法检测MTB对利福平和异烟肼耐药性，与比例法检测结果比较具有很好的一致性，且具有快速、准确的优点，有较好的临床应用价值。
- 王峰崔运勇胡思玉桂静杨慧李庆阁刘小立
- 关键词：利福平异烟肼聚合酶链反应
- 脓肿分枝杆菌诱导巨噬细胞产生TNF-α和IL-8的相关分子机制被引量：2
- 2018年
- 目的探索脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种诱导THP-1巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素8(IL-8)的相关分子机制。方法将脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种感染THP-1巨噬细胞,ELISA检测THP-1巨噬细胞被感染6、18、24、48、72 h内分泌TNF-α和IL-8情况,及分别抑制TLR2受体、MAPKs中3种信号分子(JNK信号蛋白、ERK信号蛋白和P38 MAPK)和NF-κB后,THP-1巨噬细胞被感染48 h后分泌TNF-α和IL-8情况。结果脓肿亚种和马赛亚种致TNF-α和IL-8分泌呈时间依赖性,在作用THP-1巨噬细胞48 h后致TNF-α和IL-8分泌达高峰,脓肿亚种所致TNF-α分泌量高于马赛亚种,差异有统计学意义(P <0.01);分别抑制相应信号分子后,脓肿亚种和马赛亚种所致的TNF-α和IL-8分泌水平均出现明显抑制,与感染阳性对照差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种均可经TLR2信号途径、MAPKs信号途径和NF-κB信号途径诱导TNF-α和IL-8的分泌,脓肿亚种对TNF-α的诱导作用较强于马赛亚种。
- 桂静王峰李金莉刘涛彭毅
- 关键词：分枝杆菌白介素8酶联免疫吸附测定
- 脓肿分枝杆菌经TLR2信号通路诱导人单核细胞株表达炎症细胞因子分析
- 2016年
- 目的了解脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种诱导人单核细胞株内TNF-α、IL-8和IL-10的表达变化及与TLR2信号途径的相关性。方法将脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种感染人单核细胞,感染复数(MOI)=3,采用荧光定量PCR检测人单核细胞被两细菌亚种感染6 h^18 h后胞内TNF-α、IL-8和IL-10的表达水平;采用AntiTLR2 Abs阻断TLR2受体,荧光定量PCR检测人单核细胞被感染6 h后胞内TNF-α、IL-8和IL-10的表达变化。结果脓肿亚种和马赛亚种作用人单核细胞6 h^18 h后,均可诱导人单核细胞内TNF-α、IL-8和IL-10的表达水平上调,以TNF-α表达水平上调明显,IL-10表达水平上调较低,差异有统计学意义(P<0.05);TLR2受体阻断后,脓肿亚种和马赛亚种感染人单核细胞上调胞内TNF-α、IL-8和IL-10表达均出现明显抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种均可经TLR2信号途径诱导人单核细胞内TNF-α、IL-8和IL-10表达水平上调,以TNF-α表达水平上调明显。
- 桂静李青李金莉洪创跃王峰
- 关键词：分枝杆菌人单核细胞TOLL受体
- 2013—2017年深圳市非结核分枝杆菌流行状况分析
- 目的分析深圳市非结核分枝杆菌(NTM)的流行状况,为NTM防控策略提供依据。方法搜集2013—2017年深圳市慢性病防治中心和各区慢性病防治院收治的9427例疑似肺结核患者,对上述患者进行痰分枝杆菌培养(BACTEC M...
- 洪创跃李金莉赵广录桂静朱玉梅杨争余卫业
- 关键词：疾病特征流行病学研究
- 文献传递
- 干扰素体外释放酶联免疫检验技术在结核病临床诊断中的应用被引量：2
- 2020年
- 目的进一步研究干扰素体外释放酶联免疫检验技术在结核病诊断中的优势,为未来进一步提高结核病检出率奠定基础。方法 138例患者,分别接受结核菌素皮肤过敏试验与干扰素体外释放酶联免疫检验。比较两种检查方法诊断结核病的灵敏度、特异度;不同结核病患者干扰素体外释放酶联免疫检验诊断准确率。结果 138例患者,病理确诊结核病42例,非结核病96例。干扰素体外释放酶联免疫检验诊断结核病的灵敏度为85.71%(36/42)、特异度为90.63%(87/96),均高于结核菌素皮肤过敏试验的66.67%(28/42)、80.21%(77/96),差异具有统计学意义(P<0.05)。肺结核患者27例,肺外结核患者15例。肺外结核患者干扰素体外释放酶联免疫检验诊断准确率为100.00%,高于肺结核患者的77.78%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论干扰素体外释放酶联免疫检验方法满足结核病临床诊断的需求,该诊断方法具有更高的阳性检出率,并且还具有操作步骤简单、结果精准等优点,能够减少误诊、漏诊等情况发生,为结核病的早期预防、早期治疗奠定基础,因此值得在临床上做进一步推广。
- 傅钰桂静李雄刘涛
- 关键词：结核病
- 深圳市结核分枝杆菌异烟肼耐药流行株的基因分析被引量：2
- 2010年
- 异烟肼（INH）和利福平（RFP）是抗结核药中的一线药物,近年来出现了大量耐药结核分枝杆菌,在中国INH-耐药率高达17.6%[1].INH耐药相关的最主要基因为katG,其次为inhA、ahpC和inhA94.为了解深圳地区INH耐药流行株的主要基因突变类型,本研究对深圳地区303株结核分枝杆菌的katG、inbA、oxyR-ahpC基因进行序列分析.
- 崔运勇王峰刘小立桂静胡思玉杨慧
- 关键词：结核分枝杆菌耐药异烟肼
