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大绿蛙6个Sox基因的克隆及进化讨论: 2009年; Sox基因家族编码一类转录调控因子,他们参与到个体发育的许多过程,如中枢神经系统的形成、性别分化、骨和淋巴细胞的发育等。许多动物体内都检测到Sox基因,基于序列及其结构特点,Bowles等将其划分为10个族。本文采用简并PCR技术,扩增了大绿蛙Sox基因的HMG-box保守区,经SSCP及序列分析,获得6个基因并分别命名为:RlSox3a、RlSox3b、RlSox3c、RlSox11、RlSox14和RlSox21。所获序列无性别差异,经系统发生分析发现分属于大绿蛙Sox家族的B和C亚族。其中RlSox3基因出现多拷贝,为Sox基因家族进化的DDC(duplication-degeneration-complementation)模式提供了一定的分子证据。结合GenBank中已登录的31个Sox基因氨基酸序列,使用MEGA 3.0软件构建NJ(neighbor-joining)系统发生树,讨论了Sox基因的系统发生历程。; 汪宁聂刘旺; 关键词：SOX基因 SSCP

鳄龟科和平胸龟科线粒体控制区序列分析和结构比较被引量：10: 2008年; 本文参照龟类近缘种的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)控制区(control region,CR)及邻接序列,设计了二对特异引物,采用PCR和测序技术,获得了大鳄龟(Macroclemys temminckii)、小鳄龟(Chelydra serpentina)和平胸龟(Platysternon megacephalum)mtDNA CR区序列,其长度分别为1062bp、1124bp和1119bp;A+T的含量分别为68.93%、69.34%和69.44%。序列分析显示,三种龟CR区3'末端均存在丰富的微卫星序列,其中大鳄龟和小鳄龟各有一段2bp的TA序列分别重复20和15次;小鳄龟另有一段5bp的TATAT序列重复13次;平胸龟则是一段10bp的AGTATGTTAT序列重复4次和一段17bp的GTTGTTATATAACATAT序列重复13次。本文还结合GenBank中已发表的其他6种龟鳖类动物的控制区序列,探讨了龟鳖类动物微卫星序列的类型及分布,结果表明:9种龟鳖类动物都存在丰富的微卫星序列,且微卫星所在位置及序列存在很大差异。; 颜亮张雁汪宁张莉聂刘旺; 关键词：大鳄龟小鳄龟平胸龟控制区微卫星

中华大蟾蜍Mest基因的cDNA克隆和表达分析(英文): 2009年; Mest基因是一种印记基因,在人、小鼠以及其他的哺乳动物和有花植物中都有研究报道。为了更好地研究该基因的功能和进化特点,利用RACE法获得了中华大蟾蜍Mest基因(BgMest)的cDNA全长序列(1 325 bp),它包含一个完整的ORF,可编码326个氨基酸的多肽(GenBank登陆号:ABQ10905)。多肽链中包含一个典型的α/β水解酶折叠结构域,其在氨基酸水平上与热带爪蟾和一些哺乳动物分别存在86%和70%～80%的相似性。进化树分析显示Mest基因为单系起源。RT-PCR显示,BgMest基因在精巢、卵巢、肝、肾、脑、胃和肺中都有表达,并且该基因在序列、表达模式以及蛋白产物的高级结构的高度保守性都说明它在两栖类生物中是保守的。但是在对哺乳动物以及一些脊椎动物的印记基因进行进化分析时,发现它们具有不同的起源。; 王晶晶聂刘旺贾瑞汪宁; 关键词：中华大蟾蜍 RACE RT-PCR

猫上丘浅层GABA能神经元的年龄相关性变化: 2008年; 目的比较青年猫和老年猫上丘浅层(superricial Superior Colliculus,sSC)GABA能神经元及其表达的年龄相关性变化,探讨老年个体视觉功能衰退的相关神经机理。方法Nissl染色显示上丘浅层结构及神经元、免疫组织化学ABC法标记GABA免疫阳性神经元。光镜下观察,采集图像,并利用图像分析软件对带状层、浅灰质层和视层神经元及GABA免疫阳性神经元及其灰度值进行分析统计。结果GABA免疫阳性神经元、阳性纤维及其终末在青年猫及老年猫上丘浅层均有分布。与青年猫相比,老年猫上丘浅灰质层、视层神经元和GABA免疫阳性神经元密度及其GABA免疫阳性反应强度均显著下降(P<0.01)(免疫反应强度与平均灰度值成反比);带状层神经元密度也显著下降(P<0.01),但其GABA免疫阳性神经元密度无显著变化(P>0.05)。结论衰老过程中猫上丘浅层GABA能神经元的丢失和GABA表达的下降,可能是在上丘水平上导致老年个体视觉功能衰退的重要因素之一。; 徐金旺刁建刚汪宁王赦焱汤传宏华田苗; 关键词：GABA能神经元年龄相关变化视觉

S100和GFAP在猫上丘表浅层表达差异的免疫组织化学观察: 2009年; 目的比较青、老年猫上丘表浅层(superricial Superior Colliculus,sSC)星形胶质细胞中S100蛋白与胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的老年性变化,并探讨其在动物视觉功能衰退中的意义。方法采用免疫组织化学方法(SABC法)示青、老年猫上丘表浅层S100免疫阳性反应(S100-immunoreactive,S100-IR)细胞及胶质纤维酸性蛋白免疫反应阳性(GFAP-immunoreactive,GFAP-IR)细胞。光镜下观察、拍照,并利用Image-ProExpress图像分析软件对上丘表浅层各层S100和GFAP免疫反应阳性细胞密度及其灰度值进行测量。结果与青年猫相比,老年猫上丘表浅层中S100蛋白与GFAP表达均有不同程度的显著增强(P<0.01)。结论衰老进程中,上丘表浅层出现S100、GFAP表达增强,星形胶质细胞存在明显的反应性活化与增生,这对维持上丘表浅层神经元的活性和神经元之间的通讯联系,从而延缓老年性视觉功能衰退具有重要意义。; 徐金旺刁建刚汪宁汤传宏李古州华田苗; 关键词：胶质原纤维酸性蛋白星形胶质细胞

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汪宁