熊瑛
- 作品数:10 被引量:25H指数:3
- 供职机构:南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省科技厅科技支撑计划项目江西省卫生厅科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 乙肝患者HBV感染相关特异性miRNA筛选及其功能研究
- 2018年
- 目的寻找乙型肝炎病毒特异性的miRNA,并在体内验证找到的miRNA的功能,从而为阻断乙肝进一步发展提供新方法。方法利用miRNA芯片分析3对正常肝脏组织与慢性乙型肝炎组织的miRNA,寻找两者之间差异表达的miRNA。用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR,RT-PCR)在更多的组织标本中验证差异表达,确定有意义的miRNA。在鼠病毒性肝炎模型中通过静脉注射有意义的miRNA或anti-miRNA进行干预,同时刺激向肝癌方向转变,观察其病毒复制情况。结果与正常肝脏组织相比,慢性HBV病毒感染组织中表达上调的miRNA有8个,表达下调的miRNA有16个。miR-143在肝癌组织中的表达降低(P=0.0029);miR-520d-5p在肝癌组织中的表达提高(P=0.0320)。结论 miRNA在乙型肝炎的发生、发展中起重要作用,其功能的失调可能导致其最后发展成为肝硬化甚至肝癌,并且可以影响乙型肝炎治疗效果。
- 葛文涛熊瑛王华忠
- 关键词:乙型肝炎病毒MIRNAHBV感染
- 人剪切修复基因XPD对肝癌细胞生长的抑制作用被引量:7
- 2009年
- 目的探讨野生型人剪切修复基因着色性干皮病基因D(xeroderma pigmentosum D,XPD)对肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响,并探讨其机制。方法用脂质体转染法瞬时转染SMMC-7721细胞,转染重组质粒XPD-N2和空载质粒N2,并用未转染的与XPD-N2、N2具有相同遗传背景和代数的SMMC-7721细胞作为空白对照。荧光显微镜观察绿色荧光蛋白报告基因表达情况,流式细胞仪检测细胞周期,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测细胞中XPD、c-myc、cdc25A、cdK2表达量变化,MTT法观察细胞增殖的活力。结果提取出的重组质粒pEGFP-N2-XPD用酶切鉴定,与Genebank上的相符。在荧光显微镜下,可以在SMMC-7721-pEGFP-N2、SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞中观察到绿色荧光蛋白的表达,质粒的转染效率为30%左右。流式细胞仪结果显示,pEGFP-N2-XPD重组质粒转染入细胞后,肝癌细胞进入S期发生阻滞,停滞在G1期。RT-PCR、Western blot检测发现SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞与SMMC-7721-pEGFP-N2和SMMC-7721两对照组相比,其XPD表达明显增高(P<0.05)。c-myc、cdc25A、cdK2相对表达量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与两对照组相比,SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞增殖率明显减弱(P<0.05)。结论野生型XPD基因可以在转录和翻译水平抑制SMMC-7721细胞内c-myc、cdc25A、cdK2的表达。而且野生型XPD基因通过抑制cdK2的表达作用于S期DNA损伤检控点,从而抑制SMMC-7721细胞增殖。
- 黄神安徐江晶张吉翔熊瑛尹东李军
- 关键词:肝癌XPDC-MYCCDC25ACDK2
- DNA修复转录因子TFIIH与毛发硫营养障碍的研究新进展
- 2013年
- 毛发硫营养障碍(TTD,trichothiodystrophy)是一种少见的常染色体遗传疾病,其特征为脆发及其他不同系统症状相关。半数TTD病患会因为核苷酸剪切修复障碍而出现光过敏现象,它是由于DNA修复转录因子TFIIH中编码XPB、XPD以及p8/TTDA(于2004年发现并命名)三个亚基基因突变而导致的。所以,研究TFIIH亚基突变有助于让我们了解毛发硫营养障碍。
- 熊瑛雷玲张吉翔
- 关键词:突变
- 原癌基因pim-3的克隆及其对肝癌细胞凋亡的影响被引量:10
- 2006年
- 目的:克隆大鼠原癌基因pim-3并构建真核表达重组质粒pEGFP-N2/pim-3,观察他在真核细胞SMMC-7721中的表达情况以及对细胞凋亡的影响.方法:利用TRIzol从液氮保存的大鼠骨骼肌组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获取pim-3 cDNA,并构建重组质粒pEGFP-N2/pim-3,转化用CaCl2法制备的大肠杆菌JM-109菌株,酶切以及测序鉴定.将重组质粒通过脂质体介导转染肝癌SMMC-7721细胞后利用倒置荧光显微镜观察基因表达情况,并利用流式细胞术及MTT比色实验对转染细胞的生物学行为进行检测.结果:将RT-PCR产物全部用于低熔点琼脂糖凝胶电泳、回收,在DL 2000 Marker 1000 bp附近可见清晰条带,与实验设计符合;阳性克隆质粒的酶切电泳和测序结果表明,大鼠pim-3 cDNA的克隆和重组质粒pEGFP-N2/pim-3的构建成功;重组质粒pEGFP-N2/pim-3转染组凋亡细胞占3.5%,质粒pEGFP-N2转染组凋亡细胞占10.7%,而仅加入转染液的空白组凋亡细胞占11.0%,重组质粒转染组与两对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);倒置荧光显微镜可以观察到pim-3在SMMC-772 1细胞中的正常表达;MTT比色实验显示原癌基因pim-3能够明显抑制细胞凋亡.结论:真核表达重组质粒pEGFP-N2/pim-3构建成功;原癌基因pim-3能明显抑制肝癌细胞凋亡.
- 邓欢刘亮明张吉翔罗杰尹东熊瑛汤蕾谢正元
- 关键词:肝癌克隆凋亡荧光显微镜流式细胞术
- 新型冠状病毒疫情下社区高血压患者管理建议被引量:1
- 2020年
- 新型冠状病毒发现至今,随着确诊病例增多以及科研数据的不断更新,笔者发现,同时合并高血压的新型冠状病毒肺炎患者,其病情转归与普通患者不同,因此更加需要对高血压人群进行科学的防治及管理.本文主要提出了高血压社区管理应注意的问题并列举了相关切实可行的管理措施.
- 熊瑛吴晨光
- 关键词:新型冠状病毒肺炎高血压
- 血清淀粉样蛋白A对胃癌的临床诊断价值被引量:5
- 2011年
- 目的探讨血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid A)对胃癌的临床诊断价值。方法研究对象为78例胃癌患者(术后复发患者32例,未复发患者46例)和59例胃溃疡患者,并将54例同期健康体检者做为对照组。采用散射速率比浊法测定SAA和超敏C反应蛋白(hsCRP),电化学发光法测定癌胚抗原(CEA)。将胃癌和胃溃疡患者外周血中的三项指标的表达水平进行对照,并结合临床病理参数以及术后随访复发、未复发患者各指标的变化进行相关性分析。结果①胃癌、胃溃疡和对照组的年龄、性别构成比无统计学差异(P>0.05);与对照组比胃癌、胃溃疡组SAA水平显著升高,且胃癌组SAA水平显著高于胃溃疡组,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组CEA水平显著高于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05)。②78例胃癌患者三项指标的不同年龄间,不同性别间均无统计学差异(P>0.05);T1至T4期SAA水平呈递增趋势,四期间呈正相关(r=0.716);TNM分期Ⅲ、Ⅳ期SAA水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P=0.027);46例淋巴结转移患者SAA水平显著高于32例未转移患者(P=0.014);hsCRP、CEA水平与肿瘤浸润深度、TNM分期、有无淋巴结转移均无显著差异。③将胃癌患者术后复发与未复发SAA、hsCRP、CEA水平比较,hsCRP水平在未复发组手术前后变化无显著性差异(P>0.05),术后复发组SAA水平在显著高于术前,而术后未复发组SAA水平显著低于术前,差异有统计学意义(P<0.05)。④在胃癌患者中SAA与hsCRP呈正相关,r=0.736,P<0.05;SAA与CEA呈正相关,r=0.468,P<0.05。结论检测血清SAA水平对胃癌侵袭、转移的评估以及术后复发及预后具有一定临床价值,有助于胃癌的诊断。
- 蔡利励谭立明沈威熊瑛敖建云郑剑锋陈玉刘宁
- 关键词:胃癌血清淀粉样蛋白A超敏C反应蛋白癌胚抗原
- 新型冠状病毒肺炎疫情下社区糖尿病患者健康管理的建议被引量:1
- 2020年
- 2019年12月,新型冠状病毒肺炎在我国武汉暴发,2020年1月20日,国家卫生健康委员会发布公告,将新型冠状病毒感染的肺炎纳入《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病,并采取甲类传染病的预防、控制措施.此特殊形势对于社区糖尿病患者健康管理提出了新的要求.为积极应对新型冠状病毒疫情,加强对社区糖尿病患者健康管理,改善医患沟通途径,笔者从社区管理入手,结合当下疫情实际,对新型冠状病毒肺炎疫情下的社区糖尿病患者健康管理提出建议,供社会同仁及相关管理部门参考.同时,笔者也将根据疫情的变化及对疾病的进一步认识及时更新该建议.
- 严若清熊瑛
- 关键词:新型冠状病毒肺炎糖尿病
- 人剪切修复基因XPD对肝癌生长的抑制作用
- 张吉翔丁浩熊瑛
- XPD是转录因子ⅡH(TFⅡH)的一个组份。TFⅡH在真核生物的转录起始和核酸剪切修复中起重要作用。多种肿瘤的发生与核酸剪切修复途径中基因功能的缺失或下降密切相关。XPD解旋酶活性及其ATP酶活性为核酸剪切修复功能所必需...
- 关键词:
- 关键词:肝癌细胞增殖基因表达
- 艾滋病病毒1型与乙型肝炎病毒X蛋白的相关性被引量:1
- 2006年
- 最近研究显示,HIV和HBV具有部分相同生物活性,在艾滋病病程中相互协同作用。文中对HIV_1和HBx及其编码产物特点、相互作用及作用机制进行综述。
- 熊瑛张吉翔
- 关键词:HIV-1乙型肝炎病毒X蛋白FAS/FASL野生型P53活化转录因子
- 人XPD基因转染对人肝癌细胞的生物学影响
- 2013年
- 目的:XPD基因作为TFIIH因子中一员,在基因修复中发挥重大作用。本实验构建带有绿色荧光蛋白表达人野生型XPD基因重组质粒pEGFP-N2-XPD,并将其稳定转染至人肝癌细胞株Hep3B细胞,探讨XPD基因与HBx,Cdk7的相互作用,以及细胞周期和凋亡机制。方法:从人宫颈鳞癌上皮细胞株HeLa细胞克隆出人全长XPD cDNA,构建了pEGFP-N2-XPD重组体质粒,并将其稳定转染入Hep3B并筛选单克隆稳定转染重组质粒Hep3B细胞(Hep3B-pEGFP-N2/XPD)和稳定转染空载质粒Hep3B细胞(Hep3B-pEGFP-N2)。利用荧光显微镜观测绿色荧光蛋白表达,检测转染XPD基因后细胞内XPD,HBx,Cdk7的表达量变化,并检测细胞的增殖凋亡以及细胞周期变化。结果:(1)利用酶切和基因测序,成功构建了带有绿色荧光蛋白表达人野生型XPD基因重组质粒pEGFP-N2-XPD。(2)免疫荧光显微镜下,Hep3B-pEGFP-N2和Hep3BpEGFP-N2-XPD细胞中可观察到绿色荧光蛋白表达。(3)RT-PCR检测:Hep3B-pEGFP-N2/XPD细胞与Hep3B和Hep3B-pEGFP-N2,两对照组相比,HBx mRNA表达明显降低(P<0.001)XPD mRNA表达明显增高(P<0.01)Cdk7 mRNA表达明显降低(P<0.001)。(4)MTT检测示Hep3B-pEGFP-N2/XPD与两对照相比,细胞增殖率减弱(P<0.05)。TUNEL检测示Hep3B-pEGFP-N2/XPD与两对照组比较,细胞凋亡明显增加(P<0.01)。流式细胞仪检测示Hep3B-pEGFP-N2/XPD进入S期出现障碍,停滞在G0+G1期的细胞增多,细胞凋亡率逐渐增加。(5)Western blot检测Hep3B-pEGFP-N2/XPD细胞中XPD蛋白相对表达量均比两对照组高,Cdk7蛋白相对表达量均比两对照组低,差异有统计学意义(P<0.001).结论:野生型XPD基因片段成功插入pEGFP-N2空载质粒中,将其稳定转染进人肝癌细胞株Hep3B细胞中,可以在转录和蛋白水平提高细胞XPD表达、降低细胞内HBx Cdk7表达。野生型XPD基因过渡表达可能抑制HBx Cdk7表达来改变细胞周期、抑制细胞生长、促使细胞凋亡。
- 熊瑛张吉翔汤蕾
- 关键词:肝脏肿瘤XPDHBX