王晓辉
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 供职机构：南京医科大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 地塞米松对布比卡因诱导小鼠神经元毒性的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨地塞米松对布比卡因诱导小鼠神经母细胞瘤株（N2a）细胞毒性的影响。方法N2a细胞悬液（10^5／ml）随机分为4组：对照组（C组）、布比卡因组（Bup组）、地塞米松组（Dex组）和地塞米松＋布比卡因组（Dex＋Bup组）。各组N2a细胞分别接种于24孔培养板（0．5ml／孔）和直径10cm的培养皿中（7ml／皿），每组24孔和4皿。C组不行干预；Bup组加入含900μmol／L布比卡因的MEM培养基500μl；Dex组加入含1μmol／L地塞米松的MEM培养基500μl；Dex＋Bup组加入含1μmol／L地塞米松的MEM培养基500μl孵育12h后加入布比卡因900μmol／L。于24孔板中孵育5h时，测定线粒体跨膜电位（△ψm）；于24孔板中孵育9h时观察细胞形态，并计算LDH释放率和细胞核固缩率；于培养皿中孵育5h时测定磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和磷酸化胞外信号调节激酶（p-ERKs）的表达。结果C组细胞多边形，胞体折光性强，突触伸展良好；Dex组细胞形态学与C组相似；Bup组细胞扁平，突触缩短或断裂，胞体折光性弱；Dex＋Bup组扁平细胞减少，突触缩短或断裂减少，胞体折光性略低。与C组比较，Bup组LDH释放率和细胞核固缩率升高，△ψm降低，p-ERKs和p-Akt表达下调，Dex＋Bup组细胞核固缩率升高，△ψm降低，p-ERK表达下调，p-AKt表达上调，Dex组p-ERKs和p-Akt表达上调（P〈0．01）。与Bup组比较，Dex＋Bup组LDH释放率和细胞核固缩率降低，△ψm增加，p—ERKs和p-Akt表达上调（P〈0．01）。结论地塞米松可减轻布比卡因诱导N2a细胞毒性，其机制可能与恢复线粒体膜电位、抑制Akt和ERKs脱磷酸化有关。
- 马蓉王晓辉彭培培刘莉丁正年
- 关键词：地塞米松布比卡因神经元毒性作用
- α-硫辛酸对神经突触生长的促进作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨α-硫辛酸（LA）对神经突触生长的影响。方法 （1）N2a细胞接受作用浓度为100、300和500μM的LA刺激,分别于刺激后24～60 h在显微镜下观察突触生长情况。未接受LA刺激的细胞作为对照组。每组4份。（2）大鼠原代海马神经元接受500μM的LA刺激,分别于刺激后24和36 h在显微镜下观察突触生长情况。未接受LA刺激的细胞作为对照组。每组4份。结果 （1）LA作用于N2a细胞24 h后,各组突触生长细胞百分比分别为：对照组（1.85±0.6）%、100μM组（5.3±4.1）%、300μM组（7.8±4.3）%、500μM组（12.5±3.3）%;与对照组比较,只有500μM LA组的突触生长细胞百分比显著增加（P〈0.01）。LA作用60 h后,各组突触生长细胞百分比分别为：对照组（12.5±3.7）%、100μM组（23.2±6.2）%、300μM组（35.0±4.9）%、500μM组（67.6±4.3）%;三个LA处理组的突触细胞百分比均比对照组显著增加（P〈0.01或P〈0.05）。（2）LA作用于大鼠原代海马神经元后24、36 h,突触长度较对照组分别增加了22.9%、30.5%（P〈0.01）。结论 LA对体外培养神经元具有显著促进神经元突触生长的生物学作用。
- 李竞进王竹瑶王晓辉刘莉丁正年
- 关键词：神经突触Α-硫辛酸
- α-硫辛酸通过激活ERK信号通路促进神经突触生长被引量：1
- 2012年
- 目的探讨α-硫辛酸(LA)促进神经突触生长的可能机制。方法将体外培养的小鼠神经母细胞瘤N2a细胞分为对照组(A组)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD98059 40μM组(B组)、LA 500μM组(C组)和PD98059 40μM+LA 500μM组(D组)。用光学显微镜观察细胞突触生长情况,Western blot法检测ERK表达水平。结果与A组相比,C组突触生长、ERK激活水平增加(P<0.01);而D组能明显抑制C组上述观察指标的增加过程(P<0.01)。结论 LA对神经细胞突触生长的促进作用可能是通过激活ERK依赖性信号通路来实现的。
- 朱维娜王晓辉丁正年刘莉李跃华
- 关键词：Α-硫辛酸
- α-硫辛酸对布比卡因所致小鼠神经细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨布比卡因(bupivacaine,Bup)的神经毒性以及α-硫辛酸(α-lipoic acid,LA)的保护作用。方法采用小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a细胞培养模型,进行下列实验:(1)观察Bup对N2a的损伤作用。将N2a细胞与不同浓度(0、300、600、900、1500、2000μmol/L)的Bup作用不同时间(12、24、36h),然后以MTT法和核固缩率分别评价细胞存活和细胞凋亡水平。每组实验重复6次。(2)LA对Bup损伤的保护作用。将细胞以不同浓度(0、100、300、500、1000、2000μmol/L)的LA预处理12h,然后均再加入Bup(900μmol/L)继续作用24h。以MTT法评价细胞存活水平。每组实验重复6次。结果(1)Bup可显著损伤N2a细胞,并具剂量和时间依赖性。Bup浓度越大、作用时间越长,其神经毒性作用越强。(2)LA对Bup的神经损伤具有显著保护作用,其保护作用与剂量有关,本实验的最大保护剂量为500μmol/L。结论Bup对N2a细胞有明显损伤作用,有剂量和时间双重依赖性,而LA可显著保护Bup所致的神经损伤。
- 王晓辉姚玉珍丁正年刘莉
- 关键词：布比卡因神经损伤Α-硫辛酸
- 地塞米松对利多卡因神经毒性的保护作用被引量：5
- 2010年
- 目的观察地塞米松(Dex)对利多卡因(Lido)诱导小鼠神经母细胞瘤细胞株(N2a)毒性的影响。方法用0、100、250、500、1000和1500μmol/LLido孵化N2a细胞9h后,将细胞分为对照(Con)组、Lido组、Dex组和Dex+Lido组,观察细胞形态学变化,并检测细胞凋亡率和细胞Akt磷酸化水平。结果 (1)与0μmol/LLido比较,100、250和500μmol/LLido未引起明显细胞形态学变化,而1000和1500μmol/LLido引起显著细胞损伤;100和250μmol/LLido未引起明显的细胞凋亡增加,而500、1000、1500μmol/LLido分别引起轻度、中度和重度细胞凋亡(P<0.01)。(2)Dex+Lido组核固缩率显著低于Lido组(P<0.01)。(3)Dex+Lido组N2a细胞中Akt磷酸化水平显著高于Lido组(P<0.01)。结论 Lido呈浓度依赖性地诱导N2a细胞损伤,Dex预处理显著减轻Lido所致的细胞损伤,其保护机制与抑制Lido诱导的Akt脱磷酸化有关。
- 解建马蓉王晓辉刘莉丁正年
- 关键词：利多卡因地塞米松神经毒性AKT
