王清华
- 作品数：40 被引量：297H指数：7
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 中国西藏小反刍兽疫病毒China/Tib/Gei/07-30磷蛋白基因的分子特征及其编码蛋白特性分析被引量：4
- 2011年
- 对我国西藏小反刍兽疫病毒野生株China/Tib/Gej/07-30进行磷蛋白基因序列测定,并进行分子生物学特征分析。首先应用逆转录聚合酶链式反应扩增出病毒磷蛋白基因片段,对聚合酶链式反应产物进行直接测序,然后对测定的核苷酸和推测的氨基酸序列进行比较分析。小反刍兽疫病毒China/Tib/Gej/07-30磷蛋白基因由1 655个核苷酸组成,编码2个相互交叠的开放阅读框(ORF)。第一个ORF长度为1 530个核苷酸,编码的P蛋白长度为509个氨基酸。第二个ORF长度为534个核苷酸,编码的C蛋白长度为177个氨基酸。第一个ORF通过基因编辑在751位插入1个G核苷酸,转录生成第二个mRNA,长度为897个核苷酸,编码的V蛋白长度为298个氨基酸。小反刍兽疫病毒China/Tib/Gej/07-30的P蛋白与其他分离株氨基酸序列同源性为86.1%～97.3%,C蛋白氨基酸序列相似性为84.3%～94.9%,V蛋白为82.9%～96.3%。China/Tib/Gej/07-30的P蛋白第315～387位氨基酸是一段高度保守的七肽重复序列。
- 包静月赵文姬李林王志亮吴国珍吴晓东刘春菊王清华王君玮刘雨田李金明王英丽
- 关键词：小反刍兽疫病毒磷蛋白C蛋白
- 一种鉴别小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株的方法
- 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株，其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA，将其加入到含有上述引物和探...
- 李林吴晓东王志亮刘春菊王清华
- 文献传递
- 我国首例非洲猪瘟的确诊被引量：177
- 2018年
- 2018年8月1日,辽宁省报告沈阳市一养猪户饲养的猪陆续发生不明原因死亡,病死猪剖检发现脾脏异常肿大,疑似非洲猪瘟病毒感染。国家外来动物疫病研究中心采集病料进行了检测,确诊为非洲猪瘟病毒核酸阳性,序列分析发现,其B646L/p72基因序列417个碱基与俄罗斯毒株100%匹配,与俄罗斯和东欧目前流行的格鲁吉亚毒株(Georgia 2007)属于同一进化分支。这是我国发现的首例非洲猪瘟。疫情来源有待进一步调查。
- 王清华任炜杰包静月戈胜强李金明李林樊晓旭刘春菊王华张永强徐天刚段亚良顾贵波周晨阳吴晓东
- 关键词：非洲猪瘟非洲猪瘟病毒荧光定量PCR
- 尼帕病毒病及其病原的研究进展被引量：9
- 2006年
- 概述了尼帕病毒病在国外的流行状况、尼帕病毒(Nipah virus,NiV)的变异及我国的研究现状,着重阐述了近年来在其基础病毒学、诊断技术及防治方面的研究进展,主要包括病毒蛋白的功能及其相互作用、受体的发现、动物模型、荧光PCR及ELISA诊断技术、抑制NiV感染及治疗等方面的研究成果,为该病的深入研究提供了参考。
- 郭丽霞陈继明曲光刚王志亮王清华李金明
- 关键词：尼帕病毒人畜共患传染病
- 猪链球菌2型四川分离株毒力基因的检测及其序列分析被引量：2
- 2009年
- 根据猪链球菌2型的MRP、EPF和SLY基因设计合成了四对引物,对我们分离鉴定的2005四川分离株进行毒力因子检测,并对阳性产物测序比较。结果以分离株为模板,获得了与预期结果一致的867bp(MRP)、572bp(EF)的2个片段,以及SLY的长度为1502bp目的片段(外引物)和1443bp的目的片段(内引物)。说明分离株SSsc0501为MRP+EF+SLY+,属于具有3种主要毒力因子的强毒株。经对PCR阳性产物测序及序列分析,结果其与P1/7株的核苷酸序列完全一致,与1933株的同源性达99.7%,仅在128位、217位、744位、1380位、1386位的5个核苷酸发生突变。在氨基酸水平上SSsc0501株与1933株的同源性达99.6%,有2个氨基酸发生替代。
- 赵永刚王君玮王志亮赵云玲王清华张维陈义平刘华雷王华王伟伟田晓灵
- 关键词：猪链球菌2型毒力基因
- 鉴别小反刍兽疫病毒野生毒株与疫苗株的引物组及其应用
- 本发明公开了一种小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株鉴别诊断试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒，包括两对引物，即与小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1疫苗株基因组（GenBank Accession Number X74443...
- 包静月王志亮刘春菊王清华
- 文献传递
- 表达gpt和EGFP基因重组山羊痘病毒的构建和鉴定被引量：1
- 2009年
- 在包含山羊痘病毒(Goatpox virus,GPV)疫苗株复制非必需区TK(Thymidine kinase)基因和背靠背启动子的质粒PtkPP的两个启动子下游插入EGFP(增强绿色荧光蛋白)基因,构建了质粒PtkPegfpP和PtkPPegfp,这两个重组质粒分别瞬时转染LT细胞,验证了启动子P11和P7.5能成功表达EGFP基因后,在PtkPP启动子P11的下游插入gpt(黄嘌呤鸟嘌呤磷酸转移酶)基因和EGFP基因,构建重组质粒PtkPgpt-egfpP,该重组质粒和GPV同源重组获得重组病毒rGPV-PtkPgpt-egfpP,利用MPA(霉芬酸)阻断核酸代谢途径筛选到稳定表达EGFP基因的重组GPV。为进一步开展GPV活载体疫苗的研究提供了技术平台。
- 南文金王清华吴晓东赵永刚王志亮
- 关键词：重组山羊痘病毒TK基因EGFP基因
- 西尼罗河热的流行历史、现状及防控被引量：3
- 2016年
- 通过介绍西尼罗河热的全球流行历史与现状,指出该病具有流行区域不断扩展、流行频率增加、致病性严重等特点,提出了加强对国际运输工具的杀虫消毒,以及加强口岸动物检疫、预警性监测和诊断技术储备等建议,以期为科学防控该病提供依据。
- 王淑娟宋晓晖迟田英孙成友王清华吕艳邹艳丽吴晓东王志亮
- 关键词：西尼罗河热
- 七类消毒剂对非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测结果的影响被引量：7
- 2021年
- 为评价戊二醛、酚、含碘类等常用消毒剂消毒后对非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测结果的影响,基于畜禽栏舍、运载工具、器具消毒及皮肤黏膜消毒目的,按消毒剂说明书推荐选择不同工作浓度,分别与不同滴度的非洲猪瘟病毒培养物于20℃条件下作用30 min后,采用荧光定量PCR方法检测作用后产物。结果显示,与对应的阳性对照组相比,含氯类(二氯异氰尿酸钠)、过硫酸氢钾类、二氧化氯类消毒剂,消毒后对荧光定量PCR检测结果影响最显著,检测Ct值显著上升或检测不到;戊二醛类、含碘类(主要成分聚维酮碘)消毒剂,核酸降解能力相对较弱,检测Ct值稍有上升;酚类、季铵盐类、含碘类(主要成分碘、磷酸、硫酸)类消毒剂,检测Ct值基本无变化。本研究评价了7类常用消毒剂消毒对非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测结果的影响,可为防控实践中科学、客观评价分析消毒效果提供技术参考。
- 南文龙巩明霞陆游李林王清华吴晓东陈义平
- 关键词：非洲猪瘟消毒剂荧光定量PCR消毒效果
- 非洲猪瘟诊断技术 非洲猪瘟诊断技术
- 本标准规定了ASF的临床诊断，实验室诊断样品采集及处理，以及普通PCR方法、荧光PCR方法、荧光RAA方法、高敏荧光免疫分析法、夹心ELISA抗原检测方法、间接ELISA抗体检测方法、阻断ELISA抗体检测方法、夹心EL...
- 吴晓东李林胡永新樊晓旭邹艳丽任炜杰张永强戈胜强王清华李金明包静月赵永刚徐天刚李岭刘珊蒋正军王树双马洪超王志亮
