王艳丽
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 实验性单侧前牙反修复体对大鼠髁突软骨中肿瘤坏死因子-α表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨实验性单侧前牙反修复体致大鼠颞下颌关节骨关节病样变过程中髁突软骨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达变化。方法:60只6周龄SD雌性大鼠随机分为3个实验组和3个对照组,每组10只。在实验组大鼠左侧上、下切牙粘接金属不良修复体,使其呈反关系。分别于2、4、8周后取颞下颌关节,苏木精-伊红染色观察其组织形态学变化,免疫组织化学染色及实时定量PCR检测TNF-α的表达情况。结果:8周实验组髁突软骨时出现典型退行性变。TNF-α主要表达于髁突软骨肥大层,4周实验组TNF-α的蛋白(P<0.01)及基因(P<0.05)表达较对照组显著增多,8周实验组TNF-α的蛋白(P<0.01)及基因(P<0.05)表达较对照组显著减少,而2周实验组与同龄对照组之间无差异(均P>0.05)。结论:TNF-α参与了髁突软骨骨关节病样变的病理性改建活动。
- 王鑫王艳丽郭敏鹿蕾张婧王美青
- 关键词：颞下颌关节
- 超顺磁性纳米铁标记大鼠骨髓基质干细胞的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究超顺磁性纳米铁粒子(superparamagnetic iron nanoparticle,SPIO)标记骨髓基质干细胞(bone mar-row stem cells,BMSCs)对其存活、增殖能力的影响,确定最佳标记浓度。方法分离、纯化4周龄SD大鼠的BM-SCs,分别用15、25、50 mg/L浓度的SPIO标记1×106个BMSCs分别作为实验组1、实验组2、实验组3,未做标记的BMSCs为对照组。用普鲁士蓝染色法和透射电镜鉴定SPIO-BMSCs的效率,台蓝染色法观察SPIO-BMSCs的存活,MTT比色法检测SPIO-BMSCs增殖活性。结果普鲁士蓝染色显示,随SPIO浓度的升高,标记的细胞染色程度逐渐加深。透射电镜检查显示细胞内含致密铁颗粒。实验组1的细胞增殖性与对照组差异无统计学意义(P>0.05),实验组2和实验组3与对照组相比,死亡细胞增多,细胞增殖性受到明显抑制(P<0.05)。结论培养基SPIO浓度在15 mg/L时,SPIO对BMSCs标记效率较高,且不影响其存活、增殖。
- 张旭鹿蕾张勉张婧王艳丽王美青
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 慢病毒介导绿色荧光蛋白基因转染大鼠软骨细胞表达研究被引量：4
- 2013年
- 目的:慢病毒载体是一种逆转录病毒载体,可将目的基因稳定整合入宿主基因组、感染非分裂期细胞,现已成为基因工程中转移目的基因的理想载体。软骨细胞可定向成软骨,是软骨基因工程中理想的靶细胞。本文以绿色荧光蛋白(green fluorescentprotein,GFP)基因作为报告基因,探讨慢病毒介导的GFP基因转染大鼠膝关节软骨细胞的最适病毒感染复数(multiplicity ofinfection,MOI)、转染效率,以及转染GFP后是否对关节软骨细胞增殖代谢活动产生影响,为下一步实验提供理论基础。方法:常规大鼠膝关节软骨细胞原代、传代培养,应用携带GFP基因的慢病毒载体转染软骨细胞。在软骨细胞培养状态最佳时,以不同MOI值(分别设定为10,20,50,100)进行慢病毒转染实验,96 h后在荧光显微镜下观察GFP在软骨细胞中的表达情况,确定最佳MOI值,流式细胞术检测慢病毒转染效率,MTT法绘制生长曲线比较携带GFP基因的慢病毒对软骨细胞增殖能力的影响,以评价GFP慢病毒载体系统转染大鼠膝关节软骨细胞的高效性和稳定性。结果:置荧光显微镜下,转染96 h后,部分软骨细胞可见绿色荧光。其中当MOI=50时,慢病毒转染软骨细胞效率最高,且对软骨细胞生长状态无显著性影响,GFP阳性细胞率(转染效率)为90.1%,MTT法测生长曲线结果显示,与未转染GFP基因的对照组相比,慢病毒转染组对软骨细胞增殖活性没有显著影响(P>0.05)。结论:慢病毒介导的GFP基因转染大鼠膝关节软骨细胞的最适MOI值为50,携带GFP基因的慢病毒能高效转染大鼠膝关节软骨细胞并稳定表达,同时不影响其生物学特性,为将来应用慢病毒载体对大鼠软骨细胞进行基因改造提供了理论基础,也可作为可靠的转基因研究示踪方法,为进一步研究关节软骨疾病的治疗提供了有力依据。
- 王艳丽张旭戴娟王鑫郭敏王美青
- 关键词：骨关节炎软骨细胞慢病毒绿色荧光蛋白
- 实验性单侧前牙反修复体对大鼠髁突软骨中甲状旁腺激素相关蛋白和PTH/PTHrP受体-1表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨实验性单侧前牙反修复体对大鼠髁突软骨中甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)及PTH/PTHrP受体-1(PTH1R)表达的影响。方法在6周龄SD大鼠左侧上、下切牙粘接金属不良修复体,使其呈反关系,2、4、8周后取颞下颌关节(TMJ),苏木精-伊红(HE)染色观察组织形态学变化,免疫组织化学染色及实时定量聚合酶链反应检测PTHrP、PTH1R的表达情况。结果 8周时,实验组髁突软骨出现明显退行性变,PTHrP阳性细胞较对照组显著增多(P<0.01),PTH1R阳性细胞明显减少(P<0.01);实验组髁突软骨PTHrP mRNA的表达显著高于对照组(P<0.01),而PTH1R mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论髁突软骨PTHrP的高表达因PTH1R的低表达不能有效发挥作用,可能是髁突软骨骨关节病样变的重要分子机制之一。
- 郭敏张婧鹿蕾王艳丽张勉王美青
- 关键词：骨关节病软骨甲状旁腺激素相关蛋白PTH
- 同种异体BMMSCs对去势山羊体内BMMSCs生物学行为影响的研究
- 2013年
- 目的：观察去势山羊接受静脉注射同源异体骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells，BMMSCs）后，其体内BMMSCs增殖及分化功能的改变。方法：取3—6岁关中雌性山羊15只，随机分为双侧卵巢切除组（OVX）、双侧卵巢切除24h后静脉注射同源异体BMMSCs组（OVX＋injection）和假手术对照（sham）组（n=5），并进行相应处理。1年后分离各组山羊的BMMSCs，MTT法检测其增殖能力；成骨、成脂诱导培养后，采用茜素红染色和油红O染色观察其多向分化能力。结果：去势1年后，OVX组与Sham组相比，BMMSCs的增殖能力和成骨分化能力均明显下降，而成脂分化能力明显增强（P〈0．05）；OVX＋injection组BMMSCs的增殖和成骨分化能力均较OVX组明显提高，而成脂分化能力明显下降（P〈0．05）。结论：静脉注射同种异体BMMSCS可逆转去势后BMMSCs的功能异常。
- 杜建宇廖立时炳正王艳丽张立超安玉林金岩李德超
- 关键词：卵巢切除山羊细胞移植
