王菱
- 作品数：9 被引量：40H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家教育部博士点基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氯沙坦通过ERK1／2丝裂原活化蛋白激酶途径抑制高糖诱导的小鼠系膜细胞结缔组织生长因子表达被引量：1
- 2009年
- 糖尿病肾病（DN）是糖尿病严重的慢性并发症之一，其主要病理特征是由细胞外基质（ECM）增多引起的肾小球硬化。血管紧张素（Ang）受体拮抗剂氯沙坦可有效地延缓肾小球硬化，被用于DN的治疗。高糖可诱导肾脏系膜细胞结缔组织生长因子fCTGF）的表达，从而促进ECM积聚和组织器官的纤维化。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）作为真核细胞胞质内的信号转导终末通路，与DN的发病密切相关。本研究观察高糖是否通过ERK1／2MAPK途径调节小鼠系膜细胞CTGF的表达，以及氯沙坦对CTGF的作用是否也与ERK1／2MAPK通路相关。
- 王菱陶立坚彭张哲宁旺斌
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶ERK1/2肾脏系膜细胞高糖诱导氯沙坦小鼠
- 洛沙坦对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1影响的研究
- 2008年
- 【目的】探讨洛沙坦对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1的影响。【方法】采用链脲霉素诱导的糖尿病肾病大鼠模型,予洛沙坦治疗16周后,测血肌酐、尿素氮,肾组织HE、Masson染色,计算肾小球硬化指数,Western Blot方法测定肾脏Ⅳ型胶原、MMP-9、TIMP-1蛋白表达量。【结果】模型组肾组织Ⅳ型胶原、TIMP-1蛋白表达均高于正常组(P<0.01),模型组MMP-9蛋白表达低于正常组(P<0.01);洛沙坦组血尿素氮、肾小球硬化指数及肾组织Ⅳ型胶原、TIMP-1蛋白表达均低于模型组(P<0.01;P<0.05),洛沙坦组MMP-9蛋白表达高于模型组(P<0.01)。【结论】洛沙坦可能通过抑制TIMP-1,增加MMP-9的表达,减少Ⅳ型胶原积聚,减轻肾小球硬化。
- 许军英陶立坚王菱宁旺斌
- 氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应的作用被引量：2
- 2009年
- 目的探讨血管紧张素Ⅰ型受体阻断剂氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠肾小管上皮细胞氧化应激反应及转化生长因子B1（TGF-β1）产生的影响。方法以大鼠肾小管上皮细胞株（NRK-52E）为研究对象，分别给予氯沙坦（10^-5mol／L）和（或）NADPH氧化酶抑制剂联二亚苯碘锚（DPI，10^-5mol／L）预处理1h后再加入AngⅡ（10^-7mol／L）刺激24h，同时设立空白培养基作为对照组。实时定量PCR和Western印迹法分别检测4组细胞NADPH氧化酶p22phox、p47phox、Nox-4 mRNA和蛋白水平及TGF-β mRNA水平。用2，7-二氯荧光素双乙酸盐（H2DCF-DA）作为荧光探针，采用荧光分光光度仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。应用比色法测定细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）水平。结果AngⅡ（10^-7mol／L）刺激细胞15min后开始产生大量的ROS，至60min达平台期。单纯AngⅡ刺激1h后，NRK-52E细胞上清液中SOD水平显著低于对照组（27．31μU／L比48．29μU／L，P〈0．01）；经氯沙坦预处理。1h后再加入AngⅡ刺激1h细胞上清液中SOD水平升高至36．37μU／L，与AngⅡ组差异有统计学意义（P〈0．01）。单纯AngⅡ刺激NRK-52E细胞24h可显著上调NADPH氧化酶p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA和蛋白水平，其mRNA水平分别为对照组的5．57倍、5．55倍和9．41倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的4．53倍、4．17倍和6．50倍（均P〈0．01）。经氯沙坦干预后，p22phox、p47phox和Nox-4 mRNA水平分别为对照组的2．71倍、2．18倍和5．23倍（均P〈0．01），蛋白水平分别为对照组的3．20倍、2．30倍和4．30倍（均P〈0．01）。AngⅡ刺激细胞24h后TGF-β1 mRNA表达也显著增多，为对照组的4．36倍（P〈0．01），氯沙坦处理细胞后TGF-β1 mRNA水平为对照组的1．57倍。结论氯沙坦通过抑制NADPH氧化酶的表达和增加SOD的表达减少ROS的产生，并能通过减少ROS产生，�
- 彭张哲陶立坚王菱宁旺斌谢艳云王纳遂李冰心唐怡庭
- 关键词：洛沙坦NADPH氧化酶转化生长因子Β1
- 氯沙坦通过ERK1/2 MAPK途径抑制高糖诱导小鼠系膜细胞CTGF表达被引量：7
- 2009年
- 目的:研究高糖环境下,氯沙坦对CTGF的影响以及其作用机制。方法:体外培养小鼠系膜细胞株(MMCs),用高糖(25mmol/L葡萄糖)刺激细胞分别作用24h、48h、72h,用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达。再将细胞分为低糖组(5.6mmol/L葡萄糖),山梨醇组(5.6mmol/L葡萄糖+19.4mmol/L山梨醇),高糖组(25mmol/L葡萄糖),氯沙坦组(25mmol/L葡萄糖+10-5mol/L氯沙坦)以及ERK抑制剂组(25mmol/L葡萄糖+25μmol/LPD98059),48h后采用Western blot方法检测磷酸化ERK1/2的表达,72h后采用Real-timePCR方法及Westernblot分别检测CTGFmRNA表达量以及蛋白的表达。结果:高糖刺激小鼠系膜细胞后,ERK1/2磷酸化的蛋白表达逐渐增高,呈现一定时间依赖性。与低糖组相比,高糖组磷酸化ERK1/2、CTGF的蛋白表达明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组磷酸化ERK1/2的蛋白表达以及CTGF的蛋白均明显下降有统计学意义(P<0.05)。与低糖组相比,高糖组CTGF mRNA表达量明显增加(P<0.01),而与高糖组相比,氯沙坦组以及ERK抑制剂组CTGF mRNA表达量明显下降,且有统计学意义(P<0.01)。结论:氯沙坦可抑制高糖对CTGF的诱导作用,其机制可能与抑制ERK1/2MAPK途径有关。
- 王菱陶立坚彭张哲宁旺斌
- 关键词：氯沙坦CTGFERK1/2系膜细胞
- 动态观察依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1,CTGF,Smad7和α-SMA的影响被引量：13
- 2009年
- 目的:动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Smad7和平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达的影响,探讨依那普利对肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:雄性SD大鼠64只,采用单侧输尿管梗阻模型,将实验大鼠分为假手术组(16只)、模型组(24只)和治疗组(24只),治疗组从造模前24h开始以依那普利10mg/(kg.d)灌胃。分别于造模后3,7,14,21d取梗阻侧肾组织进行HE染色,观察肾脏组织病理结构变化,并进行肾间质损伤指数评分;应用real-timePCR法检测肾组织TGF-β1和CTGFmRNA的表达,应用Western免疫印迹检测肾组织α-SMA,Smad7和CTGF蛋白的表达。结果:随着梗阻时间的延长,单侧输尿管梗阻模型鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加。TGF-β1和CTGFmRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达逐渐增加,Smad7蛋白表达逐渐减少。依那普利治疗后,肾间质损伤指数下降,TGF-β1和CTGFmRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达较模型组降低,Smad7蛋白表达较模型组增加,依那普利对各时间点TGF-β1mRNA的表达均有明显的下调作用,对CTGFmRNA,α-SMA,CTGF和Smad7蛋白对以单侧输尿管梗阻术后3,7,14d作用最明显。结论:依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化,以单侧输尿管梗阻后14d内效果最好,这一作用可能与抑制肾组织TGF-β1,CTGF和α-SMA的表达,增加肾组织Smad7的表达有关。
- 王琳娜宁旺斌陶立坚王菱彭张哲
- 关键词：单侧输尿管梗阻Α-平滑肌动蛋白SMAD7
- 依那普利对大鼠早期肾间质纤维化的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察依那普利对早期肾间质纤维化形成大鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻模型组和依那普利治疗组(每组20只),治疗组于手术后第4天开始以依那普利灌胃,术后第14天取各组大鼠肾组织分别行HE染色和Masson染色,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原、III型胶原在肾组织的蛋白表达。应用Real-time PCR方法检测肾组织中Ⅰ型胶原、III型胶原、血小板源生长因子(platelet drived growth factor,PDGF)-B、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、结缔组织生长因子(cen-nective tissue growth factor,CTGF)mRNA的水平。应用Western免疫印迹方法检测PDGF-B蛋白的表达。结果:依那普利治疗组大鼠肾脏的肾间质损伤指数、肾间质胶原评分、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原,以及细胞因子PDGF-B,TGF-β1,CTGF的表达均比模型组明显下降(均P<0.05)。结论:依那普利可通过下调细胞因子PDGF-B,TGF-β1,CTGF的表达而起到治疗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用。
- 李冰心王维陈继英郑旋彭张哲王菱袁琼靖张芳昉陶立坚
- 关键词：依那普利单侧输尿管梗阻纤维化血小板源生长因子-B
- 依那普利在大鼠单侧输尿管梗阻再通模型中的抗纤维化作用被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨依那普利对大鼠单侧输尿管梗阻再通模型肾脏纤维化的影响。方法:18只SD大鼠随机分为两组:假手术组(6只)以及单侧输尿管梗阻模型组(12只)。输尿管梗阻3天后,实施梗阻再通手术,再将大鼠随机分为模型组(6只)以及依那普利组(6只),术后,依那普利组给予依那普利灌胃10mg/kg/d,假手术组以及模型组给予等量0.5%CM-CNa溶液灌胃。用药2周后,取术侧肾组织做HE染色,并采用Raford评分系统对肾间质损伤程度进行评分;用Real-timePCR方法检测I、III型胶原以及CT-GFmRNA的表达;用Westernblot方法检测CTGF蛋白水平的表达。结果:模型组大鼠肾脏损伤程度,I、III型胶原mRNA表达水平,以及CTGFmRNA和蛋白表达水平均比假手术组明显上升(P<0.01)。经依那普利治疗后,与模型组相比,以上指标均显著下降(P<0.01)。结论:依那普利能有效阻止大鼠单侧输尿管梗阻再通后肾脏纤维化的进展。依那普利抗纤维化的作用机制可能与抑制CTGF的表达有关。
- 王菱彭张哲宁旺斌朱玉娴陶立坚
- 关键词：依那普利单侧输尿管梗阻纤维化
- 氯沙坦对糖尿病肾病大鼠肾小球硬化的影响被引量：13
- 2008年
- 目的:探讨氯沙坦对糖尿病肾病大鼠细胞外基质降解作用的机制。方法:采用链脲霉素(streptozotozin,STZ)诱导的糖尿病肾病大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、模型组和氯沙坦组,16周后测血肌酐、尿素氮。对肾组织进行HE和Masson染色,计算肾小球硬化指数。Western免疫印迹测定肾脏Ⅳ型胶原和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的蛋白表达量,real time-PCR方法检测肾组织Ⅳ型胶原mRNA,转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)mRNA和CTGFmRNA的表达水平。结果:氯沙坦组血尿素氮、肾小球硬化指数及肾组织Ⅳ型胶原、CTGF蛋白表达均低于模型组(均P<0.05);Ⅳ型胶原mRNA,TGF-β1mRNA及CTGFmRNA的表达水平均低于模型组(均P<0.05)。结论:氯沙坦可能通过抑制TGF-β1和CTGF,减少Ⅳ型胶原积聚,减轻肾小球硬化。
- 许军英陶立坚王菱宁旺斌刘纪实
- 关键词：肾小球硬化氯沙坦转化生长因子-Β1结缔组织生长因子
- 卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用及其机制探讨被引量：2
- 2010年
- 目的研究血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利对博莱霉素致小鼠肺纤维化的防治作用。方法7～10周龄雄性ICR小鼠45只分3组,分别为模型组、卡托普利组与正常对照组。模型组与卡托普利组经尾静脉注射博莱霉素10mg/(kg·d)14d建立稳定的肺间质纤维化模型,卡托普利治疗组于注射博莱霉素前24h予卡托普利(12.5mg/kg·d)灌胃,并与正常ICR小鼠进行对照。第28天收获肺组织,左肺行HE和Masson染色,右肺组织应用Real-time PCR检测CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGFβ1及结缔组织生长因子CTGF mRNA表达,行Western-blot检测CTGF蛋白表达。结果卡托普利治疗组与模型组比较,小鼠肺泡炎、纤维化程度有所改善,但无统计学意义。卡托普利能显著下调模型组肺组织中升高的CollagenⅠ、TGFβ1的mRNA水平及CTGF的mRNA与蛋白水平,但Collagen Ⅲ的mRNA水平并无明显改变。结论卡托普利有减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度的趋势,提示卡托普利有一定的抗肺间质纤维化作用;抑制TGF-β1及CTGF在肺组织中的表达,可能是其作用机制之一。
- 彭张哲朱玉娴陶立坚王菱宁旺斌
- 关键词：肺纤维化卡托普利博莱霉素转化生长因子Β1结缔组织生长因子
