王金祥 作品数:66 被引量:87 H指数:5 供职机构: 成都军区昆明总医院 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 语言文字 更多>>
体细胞重编程为干细胞的方法研究与进展 2013年 背景:克隆人类胚胎会引起伦理问题,这使科学家寻找替代的方法来逆向分化细胞为多能/全能干细胞,这个过程称为重编程。重编程的新方法是研究者关注的焦点。目的:探讨重编程技术的研究现状,并对体细胞重编程为干细胞的各种方法做一综述。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中1983年1月至2006年12月关于重编程的文章,在标题和摘要中以"重编程,方法,体细胞,干细胞,分化"或"reprogramming,method,somatic cell,stem cell,differentiation"为检索词进行检索。选择文章内容与重编程有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。最终选择17篇文献进行综述。结果与结论:一个多能干细胞重编程状态是细胞结构逐步重构,染色质表观遗传改变,转录表达和转录后调控的结果。靶细胞的重塑要求重编程有一个稳定的状态,最终可以被重新定向到特定的分化程序。有充分的证据表明,细胞鉴定可以被体外操作影响,重编程细胞的命运需要进一步体内检测。 阮光萍 王金祥 杨晓燕 宋巧巧 姚翔 庞荣清 潘兴华关键词:干细胞 多能干细胞 胚胎干细胞 重编程 体细胞 鸡卵清提取液促进C57小鼠骨髓间充质干细胞增殖 目的 研究鸡卵清提取液是否有促间充质干细胞增殖的作用.方法 分离培养C57小鼠骨髓间充质干细胞,并用细胞增殖检测试剂盒检测培养基、PBS、HBSS和鸡卵清提取液不同终浓度、不同培养时间对细胞增殖的作用.结果 鸡卵清提取液... 阮光萍 刘菊芬 王金祥 何洁 杨建勇 潘兴华关键词:C57小鼠 骨髓间充质干细胞 增殖 树鼩脐带间充质干细胞分离、培养及成骨成脂分化的鉴定 被引量:4 2017年 背景:脐带间充质干细胞是组织工程研究中的理想种子细胞。目的:分离、培养及鉴定树鼩脐带间充质干细胞,建立标准化的树鼩脐带间充质干细胞株。方法:采用剖腹产分离树鼩脐带,用组织块贴壁法培养脐带间充质干细胞,用流式标记法检测脐带间充质干细胞表面标志,用成骨、成脂诱导培养基诱导脐带间充质干细胞向成骨细胞和脂肪细胞分化。结果与结论:(1)细胞鉴定:培养的脐带间充质干细胞CD90和CD105的阳性表达率分别为99.9%和99.8%,造血干细胞标志物CD34的表达率为0.0%,内皮细胞标志物CD31的表达率为0.7%,符合脐带间充质干细胞表面标志特征。(2)细胞形态:诱导后的脐带间充质干细胞茜素红染色观察到钙结节,油红O染色观察到脂滴。(3)结果证实,实验成功分离培养了具备成骨成脂分化能力的树鼩脐带间充质干细胞。 阮光萍 朱路 刘菊芬 李自安 王金祥 庞荣清 潘兴华关键词:干细胞 树鼩科 脐带间充质干细胞 树鼩 CD抗原 表面标志物 人脐带间充质干细胞的标准化制备与鉴定 目的:针对临床治疗需要,标准化体外脐带间充质干细胞培养的技术方法.
方法:规范了脐带组织块贴壁法的标准化技术操作,材料的选取,取无菌条件下的剖腹产婴儿脐带,剪成1mm3的组织块,加入含10%胎牛血清的DMEM/... 赵晶 何洁 王金祥 蔡学敏 庞荣清 潘兴华关键词:脐带间充质干细胞 体外培养 冻存脐带间充质干细胞的临床前制备 目的:将冻存脐带间充质干细胞制备成一种复苏后直接用于临床的制剂并进行质量检定.
方法:从种子细胞库里面复苏冻存的人脐带间充质干细胞,待细胞培养至P3代时,收集人脐带间充质干细胞,按照4×107/剂的规格加入含5... 何洁 赵晶 王金祥 蔡学敏 庞荣清 潘兴华四种细胞移植重建C57BL雌鼠免疫功能的对比 2012年 背景:据报道肌肉来源的细胞能重建造血功能,还需要进一步观察其他系细胞是否也能重建造血功能。目的:对比不同细胞对C57BL雌鼠造血功能恢复的作用。方法:摘眼球取绿色荧光蛋白转基因雄鼠外周血,溶血后制成白细胞,再取脾脏、肝脏制成脾细胞和肝细胞悬液,同时制备骨髓细胞。将C57BL雌鼠半致死量射线照射后,回输4种细胞,并在移植后18,39,53d检测外周血绿色荧光蛋白阳性细胞。同时标记CD4-PE和CD8-PE,并在移植后100d杀鼠取骨髓检测Y染色体阳性率。结果与结论:移植后18,39,53d均在C57BL雌鼠外周血检测到绿色荧光蛋白阳性细胞;C57BL雌鼠外周血绿色荧光蛋白阳性细胞百分比:回输脾细胞和骨髓细胞>回输肝细胞>回输外周血白细胞。同时在回输脾细胞和骨髓细胞的C57BL雌鼠外周血中检测到绿色荧光蛋白和CD4双阳性细胞、绿色荧光蛋白和CD8双阳性细胞,而回输肝细胞和外周血白细胞的C57BL雌鼠外周血中几乎未检测到双阳性细胞。移植后100d检测到的Y染色体阳性率与外周血中绿色荧光蛋白阳性率呈正相关。结果说明绿色荧光蛋白转基因雄鼠的外周血白细胞、脾细胞、肝细胞和骨髓细胞均有重建造血功能的作用,其中脾细胞与骨髓细胞作用相似,作用大于肝细胞,肝细胞作用大于白细胞。 阮光萍 王金祥 姚翔 邓永丽 庞荣清 蔡学敏 王强 马丽花 潘兴华关键词:转基因鼠 造血功能 造血重建 脾细胞 鸡卵清提取液不同组分对293T细胞多能因子表达的影响 被引量:1 2016年 该研究发现,鸡卵细胞提取液有促进239T细胞多能因子表达增加的作用,将在细胞生物学有广泛的应用价值。将鸡卵清提取液分离为大于10 k Da和小于10 k Da的组分,用各提取液50%的终浓度培养293T细胞5 d,用流式细胞术检测多能因子的表达。结果表明,鸡卵清提取液及不同组分都有促进293T细胞多能因子表达增加的作用,而大于10 k Da的组分作用最明显,差别有统计学意义(P<0.01)。结果提示,鸡卵清提取液有促进239T细胞多能因子表达增加的作用,鸡卵清提取液中可能存在促进体细胞重编程作用的物质。 阮光萍 姚翔 刘菊芬 王金祥 庞荣清 潘兴华关键词:不同组分 重编程 流式细胞仪 脐带间充质干细胞治疗战伤的关键技术研究 2018年 由于高性能大规模杀伤武器的威力更加强大,可能在短时间内导致大批伤情复杂、伤势严重的复合伤伤员,战伤治疗的困难超乎寻常,传统救治观念正在受到挑战。脐带间充质干细胞(UCMSC)具有自我更新、快速生长、多向分化、免疫调节等生物学特点.用于战伤治疗可挽救生命和减少残缺。 郭德镔 蔡学敏 阮光萍 朱向情 何洁 赵晶 王强 王金祥 庞荣清 潘兴华关键词:脐带 间充质干细胞 战伤 脐带间充质干细胞临床研究的伦理与安全问题 被引量:5 2018年 脐带间充质干细胞(UCMSC)在临床上可用于各种涉及细胞变性、坏死或缺失的组织损伤、退变、自身免疫及炎症性疾病的治疗。由于UCMSC来源于新生儿脐带,属于废弃物,用于疾病治疗安全性较高,没有明显免疫排斥反应,伦理争论较少。 潘兴华 王颖翠 张梦园 蔡学敏 阮光萍 朱向情 何洁 赵晶 王金祥 庞荣清关键词:脐带 间充质干细胞 伦理 脐带间充质干细胞治疗技术的临床研究策略 被引量:3 2018年 脐带间充质干细胞(UCMSC)具备药品的“工厂化、规模化、标准化”生产特点,是目前“成药”性最高的成体干细胞(ASC)之一。UCMSC还有广泛的生物效应,对各种损伤、退变和炎症性疾病的疗效明确,且具有免疫原性低、异体治疗无免疫排斥反应、临床应用的安全性高、无伦理限制等临床应用优势。 张梦圆 王颖翠 何洁 赵晶 王金祥 余月明 张步振 潘兴华关键词:脐带 间充质干细胞