田德斌
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒结构蛋白的反向遗传研究
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是世界养猪业的主要威胁之一。PRRSV的靶细胞是作为免疫系统主要成员的肺泡巨噬细胞(Porcine Alveolar Macrophage,PAM),因此感染猪多呈免疫抑制,对多病原混...
- 袁世山韦祖樟谭菲菲田德斌李燕华丛雁方余丹丹孙利厂庄金山孙志
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5a/ORF5重叠区的分离被引量：4
- 2012年
- 以两个不同基因型的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染性克隆为平台进行反向遗传操作,利用SOE-PCR将I型PRRSV的ORF2～5a替换进II型PRRSV的相应区域,旨在将I型PRRSV的5a从ORF5中独立出来进而研究5a蛋白的功能,同时探讨两型PRRSV的结构蛋白结构与功能关系。研究结果表明,I型PRRSV的ORF2～5a序列能稳定存在于嵌合病毒基因组内,表达的相应蛋白能在II型PRRSV中发挥同样功能。本研究首次将PRRSV的ORF5a序列从ORF5中独立出来,为进一步研究5a蛋白的结构与功能提供了理论依据和基础材料。
- 刘闰夏蔺涛田德斌韦祖樟孙利厂陆嘉琦袁世山童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合
- 产单核细胞李斯特菌plcB基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2007年
- 目的克隆并原核表达产单核细胞李斯特菌plcB基因。方法利用PCR技术从产单核细胞李斯特菌基因组中扩增不含编码信号肽的plcB基因。采用T-A克隆构建pGEM-T-plcB重组质粒,BamHI、XhoI双酶切pGEM-T-plcB获得plcB片段后再插入pGEX-6p-1原核表达载体,获得pGEX-6p-1-plcB重组表达质粒并在表达宿主菌BL21中诱导表达。对表达产物进行纯化和SDS-PAGE、Western-blotting、磷脂酶活性实验分析。结果克隆的plcB基因长834bp,与GenBank上公布的序列完全相同;表达的与GST标签蛋白融合的广谱磷脂酶C蛋白(GST-PC-PLC)具有磷脂酶生物活性和免疫原性。结论成功构建产单核细胞李斯特菌plcB基因的原核表达质粒,并在大肠杆菌中得到有效表达,这为进一步研究PC-PLC蛋白的致病与免疫机理奠定了基础。
- 田德斌袁舟殷月兰黄金林董慧焦新安
- 关键词：产单核细胞李斯特菌原核表达
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入细胞过程研究进展被引量：2
- 2011年
- 作为动脉炎病毒科成员之一的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),是一种严重危害世界养猪业的传染病病原。PRRSV如何侵入宿主细胞是病毒学的一个基本但却一直悬而未决的问题,明确该过程对优化设计PRRSV疫苗有重要指导意义。本文拟就PRRSV入侵细胞过程的国内外研究进展作一概述,重点展示细胞受体和病毒结合蛋白的研究动态。
- 田德斌袁世山
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA依赖性RNA聚合酶中SDD功能区的突变分析被引量：1
- 2011年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV亚基因组的转录和基因组的复制由病毒复制酶引导.病毒首先合成两个多聚蛋白,随后多聚蛋白被加工分解成若干较小的非结构蛋白(nsps),从而产生了复制酶.病毒复制酶所在的nsp9含有特异性的功能性序列模体,在正链RNA病毒的RNA依赖性RNA聚合酶RdRp中共同含有这些保守的序列模体.为了验证PRRSV所特有的SDD模体是否能够替换为其他RNA病毒相应所含有的保守模体,以及SDD的每一个氨基酸对于RdRp催化活性的影响,将其分别替换为多种不同的氨基酸.研究发现,只有将nsp9中SDD替换为GDD,即丝氨酸替换为甘氨酸S3050G时,才能拯救出病毒,并且传代后此病毒在遗传上是稳定的.改变SDD中的任何一个天门冬氨酸都对病毒是致死性的,突变后破坏了聚合酶的活性和RdRp的翻译功能,但却没有使RdRp失去复制功能.所以研究认为,SDD模体是PRRSV的RdRp所特有和保守的,不能被替换为除GDD外的其他RNA病毒所含有的保守模体,套式病毒与其他正链RNA病毒在进化上具有一定的联系.研究表明,SDD模体的两个天门冬氨酸对于PRRSV亚基因组的转录是不可缺少的;从进化上看,SDD模体可能是正链RNA病毒GDD模体的一种变异形式.
- 周艳郑海红高飞田德斌袁世山
- 关键词：RNA猪繁殖与呼吸综合征病毒进化
- 产单核细胞李氏杆菌突变株的感染动力学研究被引量：4
- 2007年
- 以BALB/c小鼠为实验动物模型,对actA基因和plcB基因双缺失的产单核细胞李氏杆菌(LM)yzuLM1-2菌株进行感染动力学研究。分别用减毒突变株yzuLM1-2和野生型菌株yzuLM4给BALB/c小鼠静脉注射或灌服,并对脏器中LM的分布动态进行测定。结果显示,在显著高于野生型菌株感染剂量的条件下注射或灌服接种后,减毒突变株组小鼠肝和脾中的LM数量迅速下降,被清除的速度显著快于野生型菌株组。溶血素(LLO)抗体的测定结果显示,减毒突变株菌能和野生型菌同样激发较高水平的抗体。小鼠免疫保护试验结果显示,减毒突变株免疫组对同种血清型LM的攻击具有较好的免疫保护力,可达100%。结果表明,yzuLM1-2突变株侵袭力下降,致病力降低,能激发较高水平的抗体产生,可以作为预防动物李氏杆菌病的候选疫苗菌株,并为用作运送外源保护性抗原的载体提供了材料。
- 殷月兰张晨菊田德斌潘志明焦新安
- 关键词：突变株免疫应答动力学
- 结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6基因重组产单核细胞李斯特菌的构建被引量：2
- 2009年
- 对编码结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段进行了扩增,并将其克隆入穿梭载体pKSV7,利用基因同源重组技术构建了表达结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的重组产单核细胞李斯特菌(LM)。结果表明,外源基因成功整合入LM基因组并获得转录;Western-blot分析结果显示,重组菌携带的外源基因在动物体内能够表达;溶血试验与细胞感染试验表明,较之野生型李斯特菌,外源基因的插入破坏了重组菌LM(pKSV7-H85-6B)的溶血活性,显著降低了对细胞的侵袭能力。证实,携带结核分枝杆菌保护性抗原Ag85B和ESAT-6的重组李斯特菌对结核病新型疫苗的研究具有潜在应用价值。
- 董慧焦新安殷月兰田德斌潘志明刘松婷方丽君
- 关键词：结核分枝杆菌产单核细胞李斯特菌同源重组
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒结构蛋白的反向遗传研究
- @@猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是世界养猪业的主要威胁之一。PRRSV的靶细胞是作为免疫系统主要成员的肺泡巨噬细胞(Porcine Alveolar Macrophage，PAM)，因此感染猪多呈免疫抑制，对多病...
- 袁世山孙志韦祖樟谭菲菲田德斌李燕华丛雁方余丹丹孙利厂庄金山
- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒结构蛋白免疫系统
- 文献传递
