祁冰
- 作品数:6 被引量:2H指数:1
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:珠海市软科学研究计划项目广东省中医药局建设中医药强省科研课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉内皮细胞构建实验性角膜后板层
- 2013年
- 目的:探讨以异种后弹力膜/基质为载体诱导人脐静脉内皮细胞向角膜内皮细胞分化的可行性及移植术后在活体的生理功能。方法:体外分离培养脐静脉内皮细胞作为诱导移植的种子细胞;取当地质检合格的猪眼球以直径6.2 mm、厚100μm、冷冻脱水进行角膜深板层载体的制备;接种经CM-DiI荧光标记的第2~3代人脐静脉内皮细胞于载体的后弹力层面,体外培养7~10 d行细胞形态、密度、组织学和扫描电镜观察,待细胞与后弹力层面融合形成单层后,用于兔角膜移植。受眼:正常健康新西兰大白兔24只(24眼),实验组(人脐静脉内皮细胞移植组)12眼,对照组(单纯猪角膜深板层移植组)12眼,全角膜范围去除术眼内皮细胞,实施移植手术。结果:人脐静脉内皮细胞在猪后弹力膜/基质载体上贴附生长,形成紧密连接的单层,形态近似六角形,呈铺路石状分布,具有正常兔角膜内皮细胞的超微结构。术后8周实验组角膜基本透明,周边角膜略有水肿。对照组单纯猪角膜深板层移植后,移植角膜明显水肿、混浊。结论:以异种角膜后弹力膜/基质为载体培养的人脐静脉内皮细胞,行异种异体移植后,能够在活体上成活,并能维持角膜透明,具有正常角膜内皮细胞的生物学功能。深板层角膜内皮移植术是体外培养血管内皮细胞移植的一种有效术式。
- 祁冰侯光辉李柳季青山吴静周清
- 关键词:人脐静脉内皮细胞角膜内皮细胞
- 白细胞介素-1基因的多态性与白塞病易感关联性的Meta分析
- 2014年
- 背景白细胞介素-1(IL-1)α-889C/T、IL-1B-511C/T、+3962C/T和IL-1Ra-2是IL-1基因的不同位点。IL-1基因的多态性与白塞病之间的潜在相关性已经在不同的人群中进行了研究,但研究结果存在一定的争议。目的对已发表的关于IL-1基因多态性与白塞病之间关联性的文献进行二次分析,探讨儿IL-1基因多态性是否增加白塞病的易感性。方法按照检索策略检索2013年5月31日之前公开发表的关于 IL-1基因多态性与白塞病之间关联性的研究文献,检索途径包括Medline、EMBASE、CochraneLibrary、Webofknowledge、GoogleScholar、中国知网和万方数据库,发表语种限于英文和中文,研究设计包括病例对照研究。筛选出符合标准的文献,根据Newcastle-OttawaScale(NOS)量表(共9分)评价纳入文献的研究质量。分析IL-1α-889TT基因型、IL-1β-3962C等位基因、IL-1p-511T表型基因和IL-1Ra-2等位基因与白塞病易感性间的关联性,用RevMan5.0统计学软件进行统计学分析。对7篇研究中异质性低(12〈50%)的指标采用固定效应模型评价各指标的合并效应量,异质性高(12〉50%)的指标用随机效应模型评价合并效应量。结果共检索到相关文献370篇,经过阅读摘要和全文共纳入7篇符合纳入标准的研究文献,NOS量表评分均≥8分。7篇文献共包括白塞病患者499例和正常人708名,结果发现IL-1β-3962C等位基因多态性增加白塞病的风险(OR=1.41,95%CI:1.06~1.88,P=0.02),IL-1α-889TT表型基因的多态性降低白塞病的风险(OR=0.61,95%CI:0.40~0.92,P=0.02),而IL-1B-511T等位基因(OR=0.84,95%CI:0.58~1.23,P=0.38)和IL-1Ra-2等位基因(OR=1.25,95%CI:0.50~3.14,p=0.63)与白塞病之间均无明显关联。结论儿IL-1基因多态性与白塞病易感性之间可能具有一定的相关性,但还需要大样本量的临床研究进�
- 吴静崔裕波侯光辉王超张日佳祁冰
- 关键词:白塞病白细胞介素-1基因多态性META分析
- 丹参注射剂抑制早产儿视网膜病变小鼠视网膜新生血管形成的实验研究被引量:1
- 2013年
- 目的探讨丹参注射剂对高氧诱导下的早产儿视网膜病变小鼠视网膜新生血管(Retinal neovascularization,RNV)的抑制作用。方法采用随机对照原则,将出生7日龄的C57BL/6J小鼠54只分为A(单纯对照组)、B(高氧诱导模型组)、C(丹参治疗组)3组,每组18只。B组与c组小鼠在氧气浓度为75%的环境中饲养5日,然后回到正常氧环境中与A组一同饲养。这三组小鼠分别在第12、14、17天各随机处死6只。分别采用Isolectin-B4(GREEN)染色法进行视网膜铺片术观察视网膜新生血管的形态,视网膜组织切片HE染色,观察计算突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核的数量,同时以免疫组织化学染色的方法检测视网膜组织切片各层中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果Isolectin-B4(GREEN)染色法视网膜铺片中,B组视网膜可以见到大量的新生血管形成,荧光渗漏明显,C组较之新生血管明显减少,荧光渗漏轻,A组未见新生血管和荧光渗漏;在突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核计数中见到,A组〈c组〈B组,差异具有统计学意义(P〈O.05);VEGF的表达在B组的视网膜各层均很明显,C组则主要在靠近视网膜内层的部分比较明显,但较B组明显减弱,VEGF在A组的视网膜中表达不明显。结论丹参注射液对视网膜VEGF的表达有明显抑制作用,可减少早产儿视网膜病变中新生血管的形成。
- 张日佳崔裕波张旭祁冰曾婧孟晶丁小燕陈剑
- 关键词:丹参视网膜新生血管血管内皮生长因子
- 角膜内皮细胞体外原代培养及生物学鉴定被引量:1
- 2014年
- 背景角膜盲是中国主要的致盲眼病之一。随着组织工程技术的进步和发展,组织工程移植膜的构建将为角膜病的治疗开辟新的途径,而选择和培养理想的种子细胞是工程化角膜的基础。目的采用胰蛋白酶消化法体外分离培养角膜内皮细胞(CECs)并进行常规培养,观察并鉴定细胞体外生长的生物学特性,为实验研究和工程化角膜的构建提供种子细胞。方法3月龄新西兰白兔12只,摘除新鲜眼球,光学显微镜下将兔角膜带有内皮细胞的后弹力层面完整分离,胰蛋白酶消化、纯化后得到CECs,进行体外培养。倒置显微镜下观察细胞的形态变化;锥虫蓝染色法计算培养细胞的存活率并绘制细胞生长曲线;采用CM—Dil染色法进行细胞标记传代;采用苏木精一伊红染色法观察培养细胞的形态,并用免疫组织化学染色法观察神经元烯醇化酶(NSE)抗体的表达,对细胞进行细胞表型鉴定;扫描电子显微镜下观察培养细胞的表面结构;采用免疫荧光染色法观察细胞质紧密连接蛋白1(ZO-1)的表达。结果揭取带有内皮细胞的后弹力层联合酶消化法可快速获得大量纯化的CECs,且快速贴壁生长并增生,体外培养5~7d即融合形成单层,呈铺路石样排列,培养细胞的存活率为95%;CM—Dil染色显示培养的CECs呈现红色环状的荧光颗粒,标记率达90%以上,连续传代后仍显示红色荧光。苏木精一伊红染色显示培养细胞呈多角形,核圆,细胞质中NSE呈棕黄色染色。扫描电子显微镜下可见细胞表面有丰富的微绒毛,细胞间足突相互连接,细胞体积大而扁平;荧光显微镜下可见细胞间ZO-1呈绿色荧光。结论通过完整分离角膜后弹力层联合胰蛋白酶消化法可体外培养、纯化和传代兔CECs,传2~3代的细胞具有CECs的生物学特性,有望为组织工程化角膜内皮移植膜的构建提供优质�
- 祁冰侯光辉季青山崔裕波吴静
- 关键词:角膜内皮细胞细胞标记
- 人脐带间充质干细胞向角膜内皮样细胞分化的初步实验研究
- 组织工程角膜是近来兴起的一项非常有前景的治疗手段,其可克服供体角膜的缺乏和可能发生的免疫排斥反应等由传统角膜移植术所带来的局限。组织工程角膜构建最突出的问题是种子细胞的来源。由于目前大量体外培养获取人的角膜内皮细胞仍面临...
- 祁冰
- 关键词:人脐带间充质干细胞内皮细胞诱导分化胶原酶消化法
- 文献传递
- 结膜下注射人脐带间充质干细胞治疗角膜损伤的实验研究
- 角膜盲是一种因角膜失去功能从而导致视功能丧失的眼病。角膜透明无血管,感觉神经非常丰富,任何使角膜透明性、形状、完整性发生变化的角膜疾病,都将导致视力的明显下降。由于角膜位于眼部正前方,在遭受外伤时,角膜最易受到伤害,从而...
- 祁冰
- 关键词:角膜损伤人脐带间充质干细胞临床疗效