祝长青
- 作品数：66 被引量：287H指数：11
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 空肠弯曲菌hipO基因的Real-time PCR检测研究
- 目的 建立基于新型Taqman荧光探针的荧光实时(Real-time)PCR方法用于空肠弯曲菌的筛选检测与快速鉴定。空肠弯曲菌(Campylobacter jejum)是近十几年来在世界范围内广泛重视的人畜共患病原菌，可...
- 祝长青蒋原刘秀梅邵景东唐泰山郭云昌马群飞栾军杨毓环
- 关键词：空肠弯曲菌
- 硝基呋喃类药物在克氏螯虾组织中消除规律的研究被引量：33
- 2008年
- 研究硝基呋喃类药物代谢物在克氏螯虾组织中消除规律。用10μg/mL浓度的硝基呋喃类药物溶液浸泡克氏螯虾给药1h,然后在不同时间段采样,运用HPLC/MS/MS检测和分析硝基呋喃类药物代谢物在克氏螯虾肌肉、腮和肝胰腺中的消除规律。结果发现硝基呋喃类药物的代谢物在克氏螯虾腮中药物起始浓度最高,其次是肝胰腺,最后是虾肉。克氏螯虾体内4种硝基呋喃类药物代谢物,在2-4h,下降速度最快,4h以后下降速度呈减缓的趋势。在336h后,该类药物浓度降低到仪器检测低限以下。结果提示,一旦克氏螯虾被硝基呋喃类药物污染,很难在短时间内消除,增加了产品出口时的风险。
- 蒋原丁涛徐锦忠沈伟建祝长青陆承平洪颖陈国强
- 关键词：硝基呋喃类药物克氏螯虾
- 牛奶中无乳链球菌DNA提取方法的比较被引量：4
- 2015年
- 目的以牛奶中的致病性无乳链球菌作为研究对象,对9种常用的细菌核酸提取方法进行比较。方法选用紫外分光光度计法和实时荧光PCR法对各方法进行系统评估。结果超声波处理结合天根吸附柱的方法能提取到得率较高、纯度较好的DNA,结合实时荧光PCR法后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度能达到90 cfu;天根吸附柱法提取所得DNA得率稍低,结合实时荧光PCR法后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度也能达到90 cfu;溶菌酶法和超声波破碎提取法用于实时荧光PCR后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度能达到350 cfu;Chelex-100法更适于纯菌的检测,该法结合实时荧光PCR法对无乳链球菌的检测灵敏度能达到350 cfu的灵敏度。结论应根据样品类型、方法要求和检测成本来选择适合的核酸提取方法。
- 洪颖肖震郝俊虎蒋鲁岩王毅谦吴福平邵景东蒋原封莉黄明祝长青
- 关键词：牛奶无乳链球菌DNA提取实时荧光PCR
- 空肠弯曲菌鞭毛蛋白单克隆抗体的制备被引量：3
- 2010年
- 目的为获得空肠弯曲菌鞭毛蛋白单克隆抗体,用于空肠弯曲菌的检测和研究。方法用空肠弯曲菌ATCC29428株灭活全菌作为抗原,免疫BALB/c小鼠,待抗体水平达到1∶51 200时,取脾细胞与生长良好的对数期Sp2/0进行融合。同时以粗提天然鞭毛蛋白和人工表达重组鞭毛蛋白包板,用间接ELISA方法筛选,多次克隆化培养后获得的单抗用Western blot进行生物学特性鉴定。结果获得3株持续、稳定分泌抗空肠弯曲菌鞭毛蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G8、1G9和3F2。结论获得的空肠弯曲菌鞭毛蛋白单克隆抗体为建立空肠弯曲菌的蛋白检测及后续研究奠定基础。
- 唐泰山王婷祝长青蒋原姚火春张常印薛峰栾军
- 关键词：空肠弯曲菌鞭毛蛋白杂交瘤单克隆抗体
- 改良琼脂扩散法鉴定麦卢卡蜂蜜被引量：3
- 2016年
- 目的改良Allen等提出的测定麦卢卡蜂蜜非过氧化氢抑菌活性的琼脂扩散法。方法参照Allen等提出的琼脂扩散法,研究以下3个方面对琼脂扩散法的影响:使用恒温箱或在杂交炉中混匀蜂蜜水溶液,使用不同代的金黄色葡萄球菌菌株和培养基的倾斜程度。结果麦卢卡蜂蜜样品溶液使用恒温箱和杂交炉静置法混匀,测得样品的独麦素(Unique Manuka Factor,)UMF值没有显著差异;随着金黄色葡萄球菌传代数的增加,样品的UMF值也没有显著差异;培养基倾斜后同一麦卢卡蜂蜜位于中间样孔的样品UMF值明显高于边际样孔。结论杂交炉混匀蜂蜜的方法操作简单,更有利于麦卢卡蜂蜜非过氧化氢活性的检测,25代以内的任何1代菌株均可用于测定麦卢卡蜂蜜样品的非过氧化氢活性,培养基倾倒时要尽量避免过度倾斜。
- 马丽栾军刘芸周俊吴斌张睿张常印祝长青邓晓军郭德华何宇平
- 关键词：琼脂扩散法金黄色葡萄球菌
- 大豆转基因检测中DNA提取方法的比较研究被引量：19
- 2013年
- 为筛选出用于大豆DNA提取的适宜方法,分别使用Bayer法、DuPont法、Monsanto法、Qiagen和Tiangen试剂盒法提取大豆子粒DNA,并通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法与实时荧光聚合酶链式反应分析DNA质量。结果显示:Bayer法提取的DNA含有较多杂质,抑制实时荧光聚合酶链式反应;Monsanto法提取的DNA纯度差且得率低,不符合检测要求;DuPont法、Qiagen与Tiangen试剂盒法能提取到纯度好、得率高、完整性好的DNA,符合实时荧光聚合酶链式反应的检测要求,但是Qiagen试剂盒法成本过高。因此,DuPont法与Tiangen试剂盒法适用于大豆转基因检测中的DNA提取。
- 刘欣祝长青王毅谦沈赟黄明蒋原周光宏
- 关键词：大豆DNA提取转基因生物琼脂糖凝胶电泳
- 叠氮溴化丙锭(PMA)对单增李斯特氏菌死菌活菌检测影响的比较研究
- 目的：研究叠氮溴化丙锭(PMA)对单增李斯特氏菌检测的影响，评估PMA抑制死菌核酸扩增的效果，提高基因检测方法的准确性；方法：利用PMA处理单核细胞增生李斯特氏菌标准菌株CMCC 54004的死菌、活菌以及混合菌液等，然...
- 周阳祝长青沈涛刘欣叶可萍徐幸莲郭云昌付瑞燕
- 关键词：单增李斯特氏菌实时荧光PCR
- 鸡肉中空肠弯曲菌和沙门氏菌的精准检验方法研究与应用
- 食源性致病菌所引起的疾病数量逐年增加，已成为全球性公共卫生的焦点，受到国际卫生组织和世界各国的高度关注。现在中国倡导全民健康，食品安全已成为各级政府和食品监管部门的首要任务。空肠弯曲菌和沙门氏菌是引起人和动物发生多种食源...
- 祝长青
- 关键词：鸡肉空肠弯曲菌沙门氏菌
- 文献传递
- 空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原的设计、表达与鉴定被引量：1
- 2012年
- 构建空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达,免疫动物后检测其抗血清与空肠弯曲菌菌体的反应性。从空肠弯曲菌的6个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段,将其插入原核表达载体,获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,经IPTG诱导后表达出25k的目标蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,Western blot和间接ELISA检测重组蛋白抗原性和抗血清反应性。结果表明目标蛋白具有良好的反应原和免疫原性,抗血清能与菌体发生反应。其抗体可用于C.jejuni免疫磁珠和免疫胶体金等检测方法的建立。
- 欧瑜鄢方兵唐泰山祝长青蒋原张常印
- 关键词：空肠弯曲菌多表位抗原原核表达
- 空肠弯曲菌致病机理研究进展被引量：10
- 2003年
- 空肠弯曲菌是一种人畜共患病病原菌 ,可以引起人和动物发生多种疾病 ,并且是一种食物源性病原菌 ,被认为是引起全世界人类细菌性腹泻的主要原因 ,对空肠弯曲菌的致病机理的研究越来越多。其致病因素包括粘附、侵袭、产生毒素和分子模拟机制等四个方面 ,通过分子分子模拟机制可以引起最严重的并发症 -格林 -巴利综合征。空肠弯曲菌可以通过产生细胞紧张性肠毒素、细胞毒素和细胞致死性膨胀毒素而致病。就空肠弯曲杆菌致病机理研究现状作了概述。
- 阳成波蒋原祝长青黄克和甘玉冬
- 关键词：空肠弯曲菌致病机理发病机制细胞毒素人畜共患病
