程婷婷
- 作品数：17 被引量：64H指数：4
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- 相关领域：农业科学石油与天然气工程医药卫生生物学更多>>
- 布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析法快速检测技术的建立
- 本研究拟应用胶体金免疫层析法(GICA)研制牛布鲁氏菌病诊断试剂条,以期用于布鲁氏菌病的快速检测,尤其是基层畜牧兽医站对本病的初筛.本文拟建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的新方法.以大肠埃希菌表达、纯化的OMP31与BP26...
- 程婷婷张辉郭飞李志强桂丹刘娟陈创夫
- 关键词：动物医学布鲁氏菌病抗体检测胶体金免疫层析法
- 文献传递
- 布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析法快速检测技术的建立被引量：18
- 2014年
- 目的建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的新方法。方法利用胶体金免疫层析技术,以大肠埃希菌表达、纯化的OMP31与BP26重组蛋白作为检测抗原,以金黄葡萄球菌A蛋白(SPA)作为胶体金标记物,制备胶体金免疫层析试纸条,用于检测布鲁氏菌抗体,并分析方法的敏感性和特异性。结果以粒径为40nm胶体金制备的试纸条检测布鲁氏菌抗体的敏感性最高,胶体金最佳标记pH为6.2,SPA蛋白最适标记量为6μg/ml。交叉试验证明试纸条不与其他非相关疾病感染血清反应,特异性高。试纸条检测结果与琥红平板试验方法的符合率为92%。结论制备的布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,可用于鉴别布鲁氏菌自然感染和人工免疫,并可区分牛、羊种布鲁氏菌感染,可在基层推广使用。
- 程婷婷石峰陈创夫王远志张辉李志强鲁芝子监通马齐蔓
- 关键词：布鲁氏菌胶体金免疫层析
- 布鲁氏菌病与莱姆病胶体金免疫层析试纸条的研制
- 布鲁氏菌病是由布鲁氏杆菌侵入机体而引起的慢性细菌性人畜共患病。布鲁氏菌可感染人类、多种家畜和野生动物，严重影响着畜牧业的发展和公共卫生安全。因此，针对该病研发出快速、有效的诊断方法是非常必要的。目前，针对该病的诊断国内外...
- 程婷婷
- 关键词：布鲁氏菌胶体金免疫层析伯氏疏螺旋体
- 文献传递
- 伯氏疏螺旋体外膜蛋白OspA胶体金免疫层析法快速检测技术的建立
- 研究目的：建立莱姆病重组蛋白OspA 的胶体金检测抗体方法,为商品化试剂盒研发奠定基础。材料方法：以莱姆病伯氏疏螺旋体标准株B31 为模板,PCR 扩增OspA 目的基因,构建重组质粒pET-30a-OspA,以IPTG...
- 钱红石峰陈创夫王远志程婷婷张辉陈荣贵
- 自组装颗粒调驱体系注入方式优选实验研究被引量：1
- 2018年
- 针对渤海油田储层渗透率高、水驱窜流严重的问题,采用新型自组装颗粒调驱体系,进行室内封堵以及驱油实验研究,并对颗粒注入方式进行对比。静态实验表明,自组装颗粒具有良好的耐温耐盐性能,耐温100℃,耐盐35 000mg/L;封堵实验表明,对于渗透率为10 000×10-3μm2左右的砂管模型,采用胍胶或聚合物溶液悬浮颗粒封堵后,砂管渗透率降至3 000×10-3μm2左右,砂管有效封堵率达70%;驱油实验表明,对于渗透率为20 000×10-3μm2和4 000×10-3μm2的并联砂管模型,在水驱采出程度为27.34%~28.17%的基础上,注入0.4PV自组装颗粒调驱体系,其采出程度可提高28.57%~38.76%,最终达55.91%~66.80%,且采用胍胶或聚合物悬浮颗粒的注入方式效果较好。实验揭示了自组装颗粒的封堵机理主要是填充封堵、架桥封堵、黏接封堵。
- 程婷婷程婷婷侯吉瑞
- 关键词：调驱封堵率提高采收率
- 伯氏疏螺旋体外膜蛋白OspA胶体金免疫层析法快速检测技术的建立被引量：3
- 2014年
- 目的建立一种快速诊断莱姆病螺旋体的胶体金免疫层析试纸条检测方法。方法以莱姆病伯氏疏螺旋体标准株B31DNA为模板,PCR扩增OspA基因,构建重组质粒pET-30a-OspA,以IPTG诱导原核表达并用亲和层析方法对重组蛋白OspA进行纯化;用柠檬酸钠还原法以OspA作为检测线,优化试纸条制备条件,制备莱姆病诊断试纸条,检测其特异性和敏感性;用该方法对20份绵羊血清进行检测,并用WB验证结果的准确性。结果构建了外膜基因OspA的原核表达体系,获得高纯度的OspA蛋白;用40nm金颗粒制备的莱姆病胶体金试纸条,最适胶体金标记pH值为6.2,SPA蛋白的最佳标记量是6μg/ml,该蛋白不与布鲁氏菌、大肠杆菌等阳性血清反应,能重复多次与莱姆病阳性血清特异性反应。用该方法检测20份动物血清样品2份阳性(10%),与WB结果一致。结论以纯化的OspA蛋白为包被抗原制备的免疫层析试纸条特异性强,敏感性高,与WB验证结果符合率高,且具有准确、快速、方便的优点,可用于临床样品的检测。
- 钱红石峰陈创夫王远志程婷婷张辉陈荣贵
- 关键词：莱姆病螺旋体免疫层析
- 布鲁氏菌M5-90 bp26表位缺失株的构建及对肝脏的影响研究
- 本文构建羊种布鲁氏菌MS-90疫苗株bp26抗原表位55152和22191氨基酸区域的部分缺失株，并首次以小鼠肝脏为模型比较缺失株作为疫苗候选株的潜在价值，即是否能区分疫苗免疫与自然感染产生的抗体或/和降低疫苗株的毒力。...
- 程婷婷张辉郭飞李志强孙志华陈创夫
- 关键词：疫苗株抗原表位肝脏病理毒力评价
- 文献传递
- miRNA-125b在牛病毒性腹泻病毒感染MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究被引量：1
- 2013年
- 为研究miRNA-125b在致细胞病变牛病毒性腹泻病毒(cpBVDV)感染牛肾细胞(MDBK细胞)过程中诱导细胞凋亡的机制,本研究将cpBVDV感染MDBK细胞,并将构建的pcDNA-miR-125b转染MDBK细胞作为阳性对照。采用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测细胞中miRNA-125b和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)mRNA转录水平,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率。检测结果显示,cpBVDV感染MDBK细胞12 h和24 h,细胞中miRNA-125b的转录水平分别为正常细胞对照组的2.01倍和3.85倍,Bcl-2 mRNA的转录水平分别为对照组的0.71倍和0.31倍;pcDNA-miR-125b转染MDBK细胞48 h后,Bcl-2 mRNA的转录水平为正常细胞对照组的0.42倍。细胞凋亡检测结果显示,cpBVDV感染MDBK细胞12 h和24 h,细胞的凋亡率分别为15.06%和36.43%;pcDNA3.1-miR-125b转染48 h,细胞的凋亡率为25.56%。结果表明miRNA-125b在cpBVDV感染MDBK细胞过程中能够通过抑制抗凋亡基因Bcl-2 mRNA转录水平从而诱导细胞产生凋亡。
- 王讲德程婷婷陈创夫任艳张辉王远志李蕊李跃峰倪伟张俊波
- 关键词：荧光定量RT-PCR流式细胞仪
- 伯氏疏螺旋体外膜蛋白OspA胶体金免疫层析法快速检测技术的建立
- 研究目的:建立莱姆病重组蛋白Osp A的胶体金检测抗体方法,为商品化试剂盒研发奠定基础。材料方法:以莱姆病伯氏疏螺旋体标准株B31为模板,PCR扩增Osp A目的基因,构建重组质粒p ET-30a-Osp A,以IPTG...
- 钱红石峰陈创夫王远志程婷婷张辉陈荣贵
- 文献传递
- 布鲁氏菌介导对细胞类泛素SUMO1表达影响的研究
- 2013年
- 为研究布鲁氏菌侵染细胞后对SUMO1表达的影响,本研究采用Ni柱亲和层析法纯化SUMO1蛋白,制备兔抗SUMO1多克隆抗体,布鲁氏菌M5-90和16M菌株分别侵染巨噬细胞后,通过免疫印迹方法和荧光实时定量方法分别检测细胞中类泛素SUMO1蛋白表达水平与mRNA转录水平。结果显示,表达并纯化了鼠源类泛素SUMO1蛋白,并制备了兔抗SUMO1多克隆抗体;布鲁氏菌M5-90和16M菌株侵染巨噬细胞后,SUMO1蛋白表达水平与mRNA转录水平在12 h内均呈现先上升后下降的趋势,M5-90菌株侵染4 h时SUMO1表达量最高(p<0.01),16M菌株侵染8 h时SUMO1表达量最高(p<0.01)。实验结果表明布鲁氏菌在侵染细胞时能够引起类泛素SUMO1表达的增强,对布鲁氏菌在宿主细胞中存活和细胞抗菌均起一定作用。
- 监通陈创夫张辉张俊波张科李跃峰李蕊王讲德程婷婷
- 关键词：多克隆抗体布鲁氏菌
