罗光华
- 作品数：186 被引量：414H指数：11
- 供职机构：苏州大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金常州市卫生局重大招标项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 一种单管中多位点单核苷酸多态性的检测方法
- 本发明涉及一种单管中多位点单核苷酸多态性的检测方法，属于单核苷酸多态性检测技术领域。本发明提供的在单管中多位点单核苷酸多态性的检测方法包括以下步骤：1)采用不同的荧光基团分别标记不同的探针，得到不同荧光基团标记的探针；所...
- 罗光华毛慧慧
- 文献传递
- 人脐静脉内皮细胞1-磷酸鞘氨醇受体鉴定及其应用探讨被引量：1
- 2016年
- 目的鉴定人脐静脉内皮融合细胞株EA.hy926 和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）CRL-1730 1-磷酸鞘氨醇受体（S1PR）亚型和胞浆中C-myc 及His 标签蛋白的表达情况,为研究载脂蛋白M（ApoM）-1-磷酸鞘氨醇轴（ApoMS1P轴）的功能提供参考.方法体外培养EA.hy926 及CRL-1730 至细胞密度达到60%～70%时,采用细胞免疫荧光技术鉴定内皮细胞标志凝血八因子（FⅧ）、ApoM、S1PR1-S1PR5、C-myc 和His 标签蛋白.结果（1）两种细胞均表达FⅧ和ApoM,FⅧ在CRL-1730 中呈散在颗粒状分布,在EA.hy926 中呈均匀分布.（2）两种细胞均主要表达S1PR1,少量表达S1PR2 和S1PR3,不表达S1PR4 和S1PR5.（3）两种细胞胞浆中均有C-myc 和His 标签蛋白的表达.结论两种细胞都具有内皮细胞的特性;因其自身表达ApoM、C-myc 和His 标签蛋白,在应用这两种细胞研究ApoM-S1P 轴的功能时,不适合选用带有C-myc 和（或）His 标签的重组ApoM 蛋白.
- 梁云罗光华刘宏喻妙梅王敏刘洪尧黄波徐宁张晓膺
- 关键词：内皮细胞载脂蛋白M原癌基因蛋白质C-MYC
- 红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤被引量：24
- 2015年
- 目的研究红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)预处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),再使用1 mmol/L Hcy与不同浓度红景天苷共同作用HUVEC。24 h后,MTT法检测细胞存活率。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的基因表达水平,Western blot检测Bip、CHOP蛋白表达水平、PKR内质网激酶(PERK)及内质网核信号转导蛋白1α(IRE1α)磷酸化水平。结果与正常对照组比较,Hcy组细胞存活率降低,Bip和CHOP的基因和蛋白水平升高,PERK和IRE1α的磷酸化水平升高(P<0.05)。与Hcy组比较,高浓度红景天苷(300μmol/L)与Hcy共同作用后细胞存活率升高,Bip和CHOP的基因和蛋白表达水平下降,PERK和IRE1α的磷酸化水平下降(P<0.05)。结论红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机制可能与抑制内质网应激信号通路的活化有关。
- 朱琳王彦军俞天虹罗光华魏江于洋贾方孙建辉
- 关键词：人脐静脉内皮细胞高同型半胱氨酸血症红景天苷内质网应激
- RT-PCR检测肾移植术后血浆、尿及白细胞中巨细胞病毒感染的临床意义被引量：1
- 2006年
- 目的比较RTPCR连续动态监测肾移植患者血、尿及白细胞中巨细胞病毒(CMV)载量的临床意义。方法接受同种异体肾移植的患者共56例,应用RTPCR动态监测血、尿及白细胞中CMVDNA载量,比较三类标本检测的阳性率、病毒载量的变化以及与CMV肺炎的相关性。结果血浆、尿液和白细胞中的检出率分别为85.7%、87.5%和92.5%。采用术后第5～15周内连续三次病毒载量大于104拷贝/ml作为预测CMV肺炎的指标,三类标本均有令人满意的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。尿液检测的灵敏度最高,白细胞的Kappa一致性最优,预警时间以尿标本为最佳。结论连续动态监测病毒载量是临床上预警CMV肺炎的有效手段,血浆、尿液和白细胞这三类标本均有独立价值。
- 许贤林何小舟罗光华叶青朱江徐宁巢志复董选
- 关键词：肾移植巨细胞病毒病毒载量
- 胃癌术中腹腔游离癌细胞检测临界值的确定及其临床意义被引量：1
- 2009年
- 目的探讨胃癌术中腹腔游离癌细胞(FCC)检测的最佳阳性判定值,以及腹腔FCC的存在对预后的影响。方法用实时荧光RT-PCR方法检测术中腹腔FCC,并进行5年的随访。用MedCalc软件分析FCC最佳阳性判定值;[大于此值表示FCC存在,标记为FCC(+)],并前瞻性地分析FCC(+)组及(-)组与预后的关系。最后用多因素Cox回归模型分析影响预后的独立因素。结果(1)最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL时约登指数最高;(2)FCC(+)与(-)组的平均存活期分别为17.2个月和48.7个月,中位存活期分别为8.1个月和60.0个月;5年累积存活率分别为9.1%和67.4%。Kaplan-Meier生存分析显示,FCC(-)组生存时间明显长于FCC(+)组(P=0.000)。Cox模型分析发现FCC,浆膜及远处转移是影响生存预后的独立因素(P<0.05)。结论(1)FCC最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL;(2)腹腔FCC是影响预后的独立危险因素之一,FCC(+)反映手术时肿瘤存在扩散状态,预示患者预后较差。
- 董雪伟张岩松王荣朝许军李忠罗光华朱江徐宁
- 关键词：胃肿瘤游离癌细胞ROC曲线
- 肾移植受者并发巨细胞病毒感染的相关研究
- 叶青何小舟罗光华董选曾文彤郑璐朱江许贤林牟琴峰陆亚萍
- 该课题为了进一步提高肾移植病人术后的长期存活率，调研了国内外相关资料，尚未发现有较成熟的早期诊断和预测肾移植患者发生CMV病的方法，因而进行了该课题研究。该项目所建立的预测肾移植受者并发CMV肺炎的阈值具有很高的灵敏度和...
- 关键词：
- 关键词：肾移植巨细胞病毒并发症
- 冠心病患者肝X受体基因多态性研究
- 2010年
- 目的 探讨肝X受体基因-115A（rs12221497）和-6A（rs11039155）多态性位点与冠心病遗传易感性的关系.方法 采用单荧光标记探针技术检测243例冠心病患者、256例正常对照组肝X受体基因-115A和-6A基因型.结果 （1）AA基因型携带者与GA基因型携带者患冠心病的风险为GG基因型携带者的1.732倍（ P〈0.05）, -115A等位基因携带者患冠心病的风险是-115G等位基因携带者的1.81倍（ P〈0.01）;（2）Logistic回归分析提示,-115A位点等位基因A是冠心病的独立危险因素;（3）汉族人群不存在LXR-6A（rs11039155）这一SNPs位点.结论 肝X受体基因-115A（rs12221497）多态性与汉族人群冠心病遗传易感性独立相关.
- 朱锦孙建辉白江涛罗光华张俊徐敏
- 关键词：肝X受体基因冠心病多态性
- 一种检测脱氧核糖核酸的单核苷酸多态性的方法
- 本发明涉及一种检测脱氧核糖核酸的单核苷酸性质的方法。该方法确定待测DNA片段的一条单链上的包含变异位点的靶序列，制备对应于靶序列的碱基淬灭探针，探针的一端仅一端结合有荧光基团，制备与待测DNA片段相对应的一对引物，然后进...
- 罗光华郑璐
- 文献传递
- 基于二维PCR技术的高危型人乳头瘤病毒及相关肿瘤抑制基因 p53和 RB1的分型检测方法
- 2024年
- 目的应用高通量二维PCR技术(2D-PCR), 建立一种单管一步法检测和鉴定宫颈细胞中16种高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)亚型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、73、82)、p53(rs1042522)和RB1(rs3092905)基因型的方法。方法根据16种不同亚型HR-HPV、p53及RB1基因DNA序列设计特异性引物, 同时将待测靶基因p53及RB1基因作为评判标本取样及PCR扩增成功与否的内参基因。在3个荧光检测通道中, 采用相应标签标记不同亚型HR-HPV、p53及RB1的上游引物, 并构建完善的2D-PCR检测体系。应用该方法检测804份来源于常州市第一人民医院2022年12月至2023年8月妇科门诊的宫颈刷样本, 将检测结果与PCR-反向点杂交法、流式荧光杂交法、单重实时荧光定量PCR法分别进行一致性比较;同时采用Sanger测序法检测p53和RB1的基因型。采用Kappa检验评价2D-PCR法和其他方法间的一致性。结果 2D-PCR可通过FAM、HEX和Alexa Fluor568通道的特征性熔解谷对16种HR-HPV型别和p53、RB1的基因型进行准确区分和鉴定。2D-PCR法与PCR-反向点杂交法具有较高的一致性(Kappa=0.699), 与流式荧光杂交法具有更高的一致性(Kappa=0.793), 和单重荧光定量PCR法的一致性Kappa=0.880(95%CI 0.862~0.907)。以Sanger测序法为金标准, 2D-PCR法检测p53、RB1基因型的准确度为100%。p53 rs1042522 位点3种基因型(G/G型、G/C型和C/C型)的分布频率为32.09%(258/804)、49.88%(401/804)和18.03%(145/804), RB1 rs3092905位点检出基因型均为A/A型。结论成功开发了一种2D-PCR方法, 用于高危型HR-HPV型别鉴定与宫颈癌相关肿瘤抑制基因p53和RB1的基因分型。
- 张俊姚霜于洋喻妙梅罗光华
- 关键词：人乳头瘤病毒基因P53
- CYP3A基因多态性与他克莫司血药浓度的相关性研究被引量：10
- 2010年
- 目的:探讨肾移植术后口服免疫抑制剂他克莫司的剂量及其全血谷浓度个体差异的原因。方法:用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对60例肾移植稳定期患者的CYP3AP1、CYP3A5*3的基因型进行检测,并分析各项临床指标对他克莫司血药浓度的影响。结果:60例肾移植患者中,性别、年龄、体质量、身高、激素剂量、血清肌酐对他克莫司浓度/(剂量×体表面积)比值并没有显著影响(P>0.05),术后时间和CYP3AP1、CYP3A5*3是主要影响因素(P<0.05)。CYP3AP1他克莫司浓度/(剂量×体表面积)比值高低依次为GG组
- 王明丽吴萍罗光华蒋艳
- 关键词：肾移植他克莫司飞行时间质谱
