苏乾莲
- 作品数:117 被引量:271H指数:9
- 供职机构:广西兽医研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>
- 一种快速区分PCV2、PCV3和Mhp的多重PCR检测引物组及试剂盒
- 本发明公开一种快速区分PCV2、PCV3和Mhp的多重PCR检测引物组及试剂盒,属于动物病学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1‑6所示的引物序列,还包括10×Multi HoeStart Buffer、Su...
- 刘磊段群棚周英宁赵武李斌何颖秦毅斌卢冰霞陈忠伟张宁梁家幸苏乾莲蓝常力冯建远蒋冬福卢敬专郭旋
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎及流行性腹泻比较研究被引量:2
- 2006年
- 苏乾莲陆芹章黄维义
- 关键词:猪传染性胃肠炎猪流行性腹泻
- 一种猪戊型肝炎病毒逆转录环介导等温扩增试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种猪戊型肝炎病毒的可视化逆转录环介导等温扩增试剂盒及其应用,该试剂盒包括RT-LAMP引物、2×反应缓冲液、EM、荧光目视检测试剂、超纯水和猪戊型肝炎病毒RNA模板;所述的RT-LAMP引物包括外引物F3与...
- 何颖赵武陈忠伟秦毅斌卢冰霞段群棚范晴李斌周英宁梁家幸杨思仪蒋冬福苏乾莲
- 文献传递
- 三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建
- 为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,在由猪戊型肝炎病毒(HEV)ORF2N端及中间部分三个连续基因片段B1、B2、B3所构建的原核表达质粒pET32a-B1、pET32a-B2、pET32a-B3的基础上,设计引物扩...
- 李斌苏乾莲赵武秦毅斌梁家幸肖爱欢卢冰霞李莹莹何颖段群棚姜佳佳梁保忠
- 关键词:猪戊型肝炎病毒ORF2真核表达质粒核酸疫苗
- 文献传递
- 猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用被引量:3
- 2013年
- [目的]建立1种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。[方法]根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。[结果]该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5 pg;特异性试验表明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nested-PCR相比,2种方法检出率的符合率为90.9%。反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间。该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法。[结论]成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步应用。
- 卢冰霞刘磊秦毅斌赵武梁家幸郭旋黎木兰李斌何颖苏乾莲梁保忠闭炳芬黄伟坚
- 关键词:RT-LAMP敏感性特异性
- 一种检测猪丁型冠状病毒的RT‑LAMP引物组、试剂盒及应用
- 本发明公开了一种检测猪丁型冠状病毒的RT‑LAMP引物组、试剂盒及应用,所述引物组如SEQ ID NO:1~6所示;所述试剂盒包括以上所述RT‑LAMP引物组、2×反应缓冲液、EM、超纯水和猪丁型冠状病毒RNA模板。所述...
- 何颖卢冰霞陈忠伟秦毅斌赵武段群棚周英宁李斌梁家幸苏乾莲蒋冬福卢敬专杨思仪
- 文献传递
- 猪丁型冠状病毒CH/GX/1468B/2017的分离鉴定及全基因组序列分析被引量:9
- 2019年
- 本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离,并通过细胞病变(CPE)、RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和全基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定。结果显示,试验成功分离到1株PDCoV,命名为CH/GX/1468B/2017(简称PDCoV 1468B)。该毒株可稳定有效地在LLC-PK细胞生长增殖,并引起典型CPE;该毒株已在LLC-PK细胞连续传代15代,病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在108.10TCID50/mL以上。该毒株全基因组序列长25 399 nt;与23个GenBank中登录的参考毒株的全基因组序列比对显示,核苷酸同源性为97.2%~99.4%,其中PDCoV 1468B分离毒株与Vietnam/Binh21/2015株同源性最高,为99.4%。全基因组系统进化分析显示,PDCoV 1468B分离毒株属于Ⅱ群,与东南亚国家PDCoV毒株亲缘关系密切,处于同一进化分支。综上所述,本研究成功分离出PDCoV 1468B株并进行了全基因序列分析,为进一步开展PDCoV致病性等生物学特性研究及疫苗研制奠定了基础,同时可为PDCoV的遗传进化提供数据支持。
- 秦毅斌何苹萍卢冰霞何颖梁家幸刘磊段群棚韦嫔媛李斌陈忠伟周英宁苏乾莲蒋冬福卢敬专赵武
- 关键词:全基因组
- 应用实时荧光定量RT-PCR检测猪HEV ORF2基因3个连续片段的真核表达水平被引量:1
- 2014年
- 将构建的猪戊型肝炎病毒广西株3个连续ORF2基因片段重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3转染人肾上皮细胞系293T,应用实时荧光定量RT-PCR检测目的基因LB1、LB2、LB3。经ABI7500系统建立的标准曲线相关系数(R2)范围为0.994 209~0.999 130,斜率范围-3.469 403^-3.579 107,扩增效率范围为90.28%~94.19%。经对转染细胞、空白对照细胞的目的基因、内参基因的扩增曲线和融解曲线分析,表明该实时荧光定量PCR扩增体系的特异性良好,通过2-ΔΔCt相对定量法计算,可得出转染细胞293T-a、293T-b、293Tc目的基因LB1、LB2、LB3的基因表达量分别为6 226 830.88±826 430.14、9 449 238.68±926 057.13、35 177 915.63±3 949 173.42。本实验室建立的3个重组真核表达质粒在293T细胞中的转染成功为深入研究猪戊型肝炎基因工程疫苗奠定了基础。
- 苏乾莲李斌赵武秦毅斌梁家幸卢冰霞何颖段群棚卢敬专蒋冬福周英宁梁保忠
- 关键词:真核表达质粒实时荧光定量PCR
- 猪流行性腹泻病毒S2蛋白间接ELISA抗体检测方法及其试剂盒
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒S2蛋白间接ELISA抗体检测试剂盒,包括包被酶标板,包被酶标板以重组S2蛋白作为包被抗原。据此,还建立相应ELISA检测方法并进行临床应用,为检测PEDV抗体提供了一种有实际价值的诊断工...
- 秦毅斌赵武刘磊卢冰霞何颖陈忠伟周英宁李斌梁家幸闭炳芬段群棚蒋冬福卢敬专苏乾莲
- 文献传递
- 猪源棒状杆菌的分离及其16S rRNA基因分析被引量:5
- 2016年
- 本研究从某猪场发病保育猪的脓肿肺脏器官中分离到1株革兰阳性杆状菌,并进行形态特征、培养特性、生化特性、药敏试验、致病性试验及16S rRNA基因克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在兔血琼脂平板和马血清胰蛋白胨大豆琼脂平板有氧条件下生长良好,可以致小鼠死亡,对头孢类抗生素和喹诺酮类抗菌药敏感;系统进化分析显示,分离菌株与棒状杆菌属细菌遗传进化关系较密切,其16S rRNA基因序列与棒状杆菌代表菌株的同源性在91.7%~98.3%之间,表明分离菌为棒状杆菌(Corynebacterium)。
- 秦毅斌何苹萍卢冰霞何颖李斌梁家幸段群棚陈忠伟闭炳芬周英宁苏乾莲蒋冬福黎珂钰卢敬专赵武
- 关键词:棒状杆菌RRNA基因分析