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茅毓新
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
供职机构:
中国科学院生物物理研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
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生物学
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合作作者
梁栋材
中国科学院生物物理研究所
桂璐璐
中国科学院生物物理研究所
叶军
中国科学院生物物理研究所
常文瑞
中国科学院生物物理研究所
刘芳
北京大学
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B链羧端去三肽(B28-B30)与去四肽(B27-B30)胰岛素的制备及去三肽胰岛素的初步晶体学研究
被引量:1
1999年
双突变的胰岛素原基因在E.coli温度诱导表达体系中直接高密度发酵表达,表达产物形成的包含体经变复性处理及Sephadex G50纯化后,再由胰酶及羧肽酶B联合酶切,FPLC Mono Q纯化,最终得到B链羧端去三肽胰岛素(B28-B30)(DTRI)和去四肽(B27-B30)(DTI)胰岛素的纯品.应用悬滴气相扩散法在含丙酮的柠檬酸钠缓冲体系中培养出可供X射线衍射用DTRI单晶.空间群为P2_12_12_1,晶胞参数为a=4.98nm,b=5.21nm,c=8.92nm.晶体学不对称单位中含有4~6个DTRI分子.我们在考察胰岛素二体结构模型并比较一些胰岛素衍生物结构及缔合行为的基础上,探讨了胰岛素二体形成的可能机制,并对其意义作了初步的讨论.
茅毓新
李梅
万柱礼
江涛
安晓敏
梁栋材
刘芳
黄春媚
陈来同
胡美浩
关键词:
胰岛素
晶体结构
B链羧端去三肽(B28-B30)胰岛素晶体结构
被引量:2
2000年
采用悬滴气相扩散法,获得了B链羧端去三肽胰岛素3种晶型的单晶体,其中 晶型1属于P2_1空间群,晶胞参数为a=4.77 nm,b=6.19 nm,c=6.12 nm,β=110.3°;晶 型2属于P4_122或P4_322空间群,晶胞参数为a= 6.45 nm, c= 12.07 nm;晶型3属于 P2_12_12_1空间群,晶胞参数为 a= 4.98 nm, b= 5.16 nm, c= 10.06 nm.采用分子置换法, 测定并精化了 B链羧端去三肽胰岛素晶型1的 0.23 nm分辨率晶体结构.最终模型的 R 因子为18.8%,键长和键角与标准键长和键角的均方根偏差分别为0.0015 nm和3.3°. 晶体结构的结果表明, B链羧瑞去三肽胰岛素失去了对缔合有重要作用的 B28 Pro后, 虽然仍能形成六聚体,但表现出比天然胰岛素更易解聚的结构变化。
叶军
茅毓新
桂璐璐
常文瑞
梁栋材
关键词:
晶体结构
六聚体
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