葛超
- 作品数：48 被引量：91H指数：6
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沉默脂肪甘油三酯脂肪酶基因表达可抑制肝细胞癌细胞的增殖、迁移与侵袭被引量：4
- 2017年
- 目的:分析肝细胞癌组织及细胞系中脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)的表达水平,探讨ATGL在肝细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用。方法:采用蛋白质印迹法检测57对肝细胞癌组织和相应癌旁正常肝组织,以及12种肝癌细胞系中ATGL的表达水平。将靶向ATGL基因的shRNA重组慢病毒(GV248-shATGL-1、-2和-3)及其阴性对照慢病毒(GV248-shNC)分别感染肝癌Huh7和MHCC-97L细胞系,然后采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证ATGL基因沉默效率。采用CCK-8法和Transwell小室法分别检测ATGL基因沉默对肝癌Huh7和MHCC-97L细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:57例肝细胞癌患者中,有28例(49%)肝癌组织的ATGL表达水平明显高于其相应癌旁肝组织,16例(28%)肝癌组织的ATGL表达水平低于相应癌旁肝组织,而13例(23%)无明显变化。与阴性对照组相比,沉默ATGL基因表达能够明显抑制肝癌Huh7和MHCC-97L细胞增殖(P值均<0.05),同时细胞迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.01)。结论:肝细胞癌组织中ATGL相对高表达,而沉默ATGL基因表达可以抑制肝细胞癌Huh7和MHCC-97L细胞的增殖、迁移和侵袭。
- 侯剑晶刘腾飞葛超田华陈陶阳李红
- 关键词：基因沉默细胞增殖细胞运动
- ZNF143-MDIG-CDC6轴在肝细胞癌中的应用
- 本发明提供了一种ZNF143‑MDIG‑CDC6轴在肝细胞癌中的应用。具体地，本发明提供了一种活性成分组合及其用于协同治疗肝癌用途，所述活性成分组合包括第一活性成分锌指蛋白ZNF143抑制剂，第二活性成分细胞分裂周期蛋白...
- 李锦军张莉莉李红田华葛超
- 经组成性活化Akt1修饰的鼠胚胎肝前体细胞体内形成肿瘤的观察
- 2009年
- 目的:观察组成性活化Akt1(myr-Akt1)导入的p53-/-鼠胚胎肝前体细胞(fetal hepatic progenitor cells,FHPCs)体外培养的特点和小鼠体内肿瘤模型的建立。方法:利用磁性细胞分选系统(magnetic cell-sorting system,MACS)分离上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)阳性的p53-/-小鼠FHPCs,经细胞体外培养和反转录病毒导入myr-Akt1后,接种到C57BL/6小鼠的脾脏。应用RT-PCR和免疫组织化学法分析肝细胞分化和生长相关基因mRNA和蛋白的表达。结果:导入myr-Akt1后可明显提高E-cadherin阳性p53-/-小鼠FHPCs的体外生长和克隆形成能力,并可导致p16Ink4a和p19Arf mRNA表达水平下降;将该细胞接种到小鼠脾脏后可形成肿瘤,肿瘤细胞内GSK3β呈磷酸化,β-catenin呈一定水平表达。结论:成功建立了经Akt1修饰的p53-/-鼠FHPCs体内肿瘤模型,为探讨肝癌发生的分子机制和对相关抗癌药物的研究提供了平台。
- 马爱辉何爱丽葛超刘永忠
- 关键词：肝肿瘤动物实验钙黏附素
- 肝癌细胞系HCC-LY10的建立及应用
- 本发明提供了肝癌细胞系HCC-LY10的建立及应用。具体地，本发明提供的所述肝癌细胞系HCC-LY10的性状稳定，可稳定多次传代，并且适用于建立的肝癌动物模型，是肝癌的基础和临床前期应用研究的理想细胞系。另外，该肝癌细胞...
- 李锦军姚明闫明霞张立行刘蕾葛超郝向芳顾健人
- 文献传递
- ANGPTL4基因对不同肝癌细胞株生长的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:观察血管生成素样蛋白4(angiopoietin-like4,ANGPTL4)基因对不同肝癌细胞株生长的影响。方法:用RT-PCR和Western印迹法检测9种不同肝癌细胞及永生化肝细胞中ANGPTL4的表达水平;选择ANGPTL4低表达的Huh-7、MHCC-LM3和中度表达的MHCC-97L共3个肝癌细胞株,以pEGFP-N1质粒为载体,用Lipofectamine 2000脂质体转染ANGPTL4基因,用G418筛选结合FCM法对转染阳性细胞进行筛选,建立过表达ANGPTL4的稳定细胞株。制备细胞芯片,用Ki-67荧光免疫细胞化学技术检测3个稳定细胞株的体外增殖率,用裸小鼠体内成瘤实验观察ANGPTL4对这3个细胞株在裸小鼠体内生长的影响。结果:ANGPTL4 mRNA在未转染肝癌细胞Huh-7和MHCC-LM3中低表达,在MHCC-97L细胞中中度表达,在Hep3B细胞中高表达。细胞芯片检测结果表明,与空载体组相比,稳定过表达ANGPTL4的Huh-7细胞体外增殖率较低(P=0.00074),而稳定过表达ANGPTL4的MHCC-LM3(P=0.07308)和MHCC-97L(P=0.01152)细胞株的体外增殖率则较高。体内实验证实,ANGPTL4可以明显抑制Huh-7细胞的裸鼠体内成瘤(P=0.00110),而促进MHCC-LM3细胞(P=0.05750)和MHCC-97L细胞(P=0.01891)的裸鼠体内成瘤。结论:ANGPTL4对不同肝癌细胞株的生长有不同影响,而对同一种细胞株体内和体外生长的影响基本一致。
- 曾一元郝向芳李红敖军平姚明葛超李锦军
- 关键词：肝肿瘤肿瘤细胞细胞生长
- 原发性肝癌患者血清诱导人肝癌细胞上皮-间叶间变被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨原发性肝癌和肝硬化患者的外周血清和门脉血清以及健康志愿者外周血清对肝癌细胞SMMC-7721体外生长行为、细胞骨架和侵袭能力的影响。方法:采用不同血清培养细胞,观察SMMC-7721细胞发生上皮-间叶间变反应(epi-thelial-mesenchymal transition,EMT)的能力。采用荧光免疫细胞化学检测不同血清对SMMC-7721细胞骨架蛋白(F-actin、β-tu-bulin)、上皮细胞表面分子E-cadherin、间叶细胞标志分子Vimentin表达的影响。采用体外迁移试验和侵袭试验观察不同血清对SMMC-7721细胞迁移、侵袭能力的影响。结果:不同血清诱导体外培养SMMC-7721细胞EMT的结果表明,肝硬化患者的门脉血清、肝癌患者的门脉血清和外周血清可诱发细胞发生形态学改变,其明显的特征是细胞形态由多角形变为纺锤形,即典型的EMT,而健康志愿者的外周血清则无此作用。荧光免疫细胞化学检测结果显示,经肝癌患者门脉血清处理的细胞,其骨架蛋白(F-actin、β-tubulin)的表达和排列、上皮细胞表面分子E-cadherin、间叶细胞标志分子Vimentin的表达发生明显改变。结论:肝癌患者门脉血清可促进SMMC-7721细胞的EMT反应、迁移和侵袭,这可能是导致肝细胞癌发生肝内转移、甚至远处转移的部分主要原因。
- 徐文郝向芳李红谢海洋蒋国平胡晨葛超李锦军
- 关键词：血清
- 泛素结合酶UBE2T基因在肝癌细胞迁移和侵袭中的作用及其临床意义被引量：5
- 2018年
- 目的:探讨泛素结合酶E2 T(ubiquitin conjugating enzyme E2 T,UBE2T)在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义,并研究UBE2T基因表达在肝癌细胞迁移和侵袭过程中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR法检测54对肝细胞癌及相应癌旁肝组织中UBE2T mRNA的表达水平。应用免疫组织化学法检测233例肝细胞癌组织中UBE2T蛋白的表达水平,并分析UBE2T表达与患者临床病理参数之间的关系。构建含有UBE2T基因序列的pWPXL重组慢病毒载体(pWPXLUBE2T)并将其转染肝癌Hep3B和SMMC-7721细胞系,另一方面将靶向UBE2T基因的shRNA慢病毒载体(GV248-shUBE2T-1和GV248-shUBE2T-2)及阴性对照慢病毒载体(GV248-NC)转染肝癌MHCC-LM3和SK-Hep1细胞系,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证UBE2T基因过表达和干扰效率,然后采用Transwell小室法分别检测UBE2T基因过表达和干扰表达对肝癌细胞迁移和侵袭的影响。结果:54对肝细胞癌组织中UBE2T mRNA表达水平明显高于相应癌旁肝组织(P<0.000 1)。在233例肝细胞癌组织中,UBE2T高表达与肝细胞癌的肝内转移有关(P=0.004)。与对照组相比,过表达UBE2T基因能够明显促进肝癌细胞Hep3B和SMMC-7721的迁移与侵袭(P值均<0.01)。与阴性对照组相比,干扰UBE2T基因表达能够明显抑制肝癌细胞MHCCLM3和SK-Hep1的迁移与侵袭(P值均<0.05)。结论:肝细胞癌中UBE2T高表达与肿瘤肝内转移有关,而过表达UBE2T基因可以促进肝癌细胞的迁移和侵袭。
- 刘腾飞刘小琴葛超宋镇陈静田华陈陶阳崔英李红
- 关键词：肿瘤转移基因表达调控
- 人醛氧化酶蛋白在肝癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨人醛氧化酶(human aldehyde oxidase,hAOX)蛋白在肝癌细胞系、肝癌组织、癌旁肝组织、肝硬化及正常肝组织中的表达及其临床意义。方法:采用Western印迹法和免疫组织化学法检测hAOX蛋白在7个肝癌细胞系、2个永生化肝细胞系、10例正常肝、12例肝硬化、57例肝癌及癌旁肝组织中的表达差异,分析其表达差异的临床意义。结果:Western印迹法检测结果表明,hAOX蛋白在MHCC-LM3、Hep3B、Huh-7和BEL-7402肝癌细胞系以及人永生化肝细胞系L-02和Chang’s liver等6个细胞系中均有较高表达,在MHCC-97L、HepG2和SMMC-7721细胞中则为低表达。免疫组织化学检测发现,hAOX在正常肝、肝硬化组织和癌旁肝组织中高表达,在癌旁肝组织中的表达较匹配肝癌组织的高(P<0.001)。Western印迹法检测结果提示癌旁肝组织中hAOX表达明显高于肝癌组织。hAOX表达与肝癌患者性别、年龄、血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平、乙肝表面抗原、肿瘤大小、病理学分级以及是否伴有肝硬化均无相关性(P>0.05),而与肿瘤血管侵犯和肿瘤生长方式有一定的相关性(P=0.053,P=0.011)。结论:hAOX在正常肝、肝硬化、癌旁肝组织中高表达,而在肝癌组织中表达明显降低,其表达可能会影响肝癌的血管侵犯和肿瘤生长方式。
- 李红葛超郝向芳李锦军
- 关键词：肝肿瘤免疫组织化学
- 肿瘤相关新基因HC90的表达差异及初步功能研究被引量：1
- 2001年
- 目的 对新基因克隆HC90进行蛋白表达、各种肿瘤组织和细胞系中表达差异检测和体内外功能研究。方法 用pET 32a融合表达载体在大肠杆菌BL2 1(DE3)中对该基因进行表达 ,免疫小鼠制备小鼠源性多克隆抗体 ;从体外细胞集落形成试验 ,裸鼠体内成瘤实验 ,原位杂交 ,免疫细胞化学及免疫组化检测HC90基因的表达差异和对体内外细胞生长影响的生物学功能进行研究。结果 SMMC 772 1细胞系的体外集落形成试验表明 ,HC90转染组与空载体组和p5 3对照组相比集落形成数显著增加 (P <0 0 5和P <0 0 1) ;转染细胞系的裸鼠体内成瘤实验结果表明该基因对L92 9细胞系的成瘤有明显促进作用 (P <0 0 5 ) ;免疫组化结果显示HC90在人多种肿瘤组织 ,癌旁和正常组织中均有不同程度的表达 ,总体上表现为癌组织 >癌旁组织 >正常组织。结论 HC90是个新的肿瘤相关基因。
- 李锦军赵瑞皎赵新泰万大方蔡兴锋薛鹏葛超顾健人
- 关键词：蛋白表达基因功能原位杂交肿瘤肿瘤相关基因
- ANGPTL4作为缺氧检测的标志物及其应用
- 本发明涉及一种ANGPTL4作为缺氧检测的标志物及其应用。具体地，本发明提供了血管生成素样蛋白4(ANGPTL4蛋白)在制备缺氧检测的诊断试剂或试剂盒中的用途。本发明还提供了相应的缺氧检测试剂盒。
- 李锦军李红葛超顾健人
- 文献传递
